- •1. Цели и задачи мед бактериологии, вирусологии, иммунологии.
- •2. Систематика микроорганизмов. Основы систематики и таксономические группы микроорганизмов.
- •3. Морфология, ультраструктура бактерий.
- •4. Морфология, ультраструктура микоплазм.
- •5. Морфология, ультраструктура хламидий.
- •6. Морфология, ультраструктура риккетсий.
- •7. Морфология, ультраструктура спирохет.
- •8. Морфология, ультраструктура актиномицетов.
- •9. Морфология, ультраструктура грибов.
- •11. Структура липополисахарида и механизмы его биологического воздействия на макроорганизмы
- •12. Дифференциально-диагностические среды, их состав и механизм действия.
- •13. Дыхание бактерий. Методы создания анаэробных условий.
- •14. Питание бактерий. Клсф питательных сред, их состав.
- •15. Периодические и хемостатные культуры.
- •16. Биология и морфология вирусов. Их взаимоотношения с клеткой хозяина.
- •17. Клеточные культуры, их происхождение. Способы выявления вирусов в клеточных культурах.
- •18. Бактериофаги. Морфология, взаимодействие с клеткой, культивирование, практическое использование.
- •19. Строение генетического аппарата у бактерий. Плазмиды. Виды плазмид и их значение в изменчивости бактерий.
- •20. Генотипическая и фенотипическая формы изменчивости, их механизм.
- •21. Генетические рекомбинации (трансдукция, конъюгация, трансформация), их механизм и значение в изменчивости.
- •22. Споры и спорообразование у микроорганизмов, свойства спор, методы обнаружения спор.
- •23. Методы микроскопии в микробиологии: световая, темнопольная, фазовоконтрастная, люминесцентная. Их практическое применение.
- •24. Стерилизация. Методы стерилизации и стерилизационная аппаратура. Режимы стерилизации и контроль качества стерилизации в автоклаве.
- •25. Асептика, антисептика, дезинфекция. Определение понятий, механизмы влияния химических веществ на микробную клетку
- •26. Простые и сложные способы окраски микроорганизмов. Способы окраски спор, жгутиков, капсул, включений.
- •27. Антибиотики. Механизмы проявления чувствительности и устойчивости микроорганизмов к антибиотикам.
- •28. Нормальная микрофлора тела человека. Её роль в организме. Гнотобиология.
- •29. Микрофлора окружающей среды. Её значение в экологии.
- •30. Чистая культура микроорганизмов. Способы выделения аэробных и анаэробных микроорганизмов.
24. Стерилизация. Методы стерилизации и стерилизационная аппаратура. Режимы стерилизации и контроль качества стерилизации в автоклаве.
Стерилизация – полное уничтожение всех микроорганизмов. Стерилизуют посуду, инструменты, питательные среды, лекарственные препараты, перевязочные средства, медицинское белье, эндоскопические аппараты и другие объекты. Для их стерилизации применяются в основном физические и механические методы.
Стерилизация в пламени проводится для обеззараживания бактериальных петель, игл, предметных и покровных стекол, пинцетов.
Стерилизация горячим воздухом проводится в электрических сухожаровых шкафах, имеющих различную форму и размеры, снабженных хорошей тепловой изоляцией. Необходимая температура автоматически поддерживается терморегулятором. Cтерилизуют лабораторную посуду и шприцы при температуре 180С в течение 1 ч. Чашки Петри, пастеровские и градуированные пипетки помещают в специальные металлические пеналы или заворачивают в бумагу по несколько штук. Пробирки и колбы закрывают ватными пробками.
Стерилизация паром проводится двумя способами: насыщенным паром под давлением и текучим паром.
СТЕРИЛИЗАЦИЮ ПАРОМ ПОД ДАВЛЕНИЕМ осуществляют в автоклаве, который представляет собой толстостенный котел цилиндрической формы, покрытый снаружи кожухом и герметически закрывающийся крышкой, бывают горизонтальные и вертикальные. Пар поступает в рабочую камеру из маленького котла, воду в котором нагревают электротоком. Давление измеряют манометром.
Не изменяющиеся под действием высокой температуры и давления питательные среды (МПА, МПБ), растворы или посуду с заразным материалом стерилизуют при 1 атм (121°С) 15–20 мин; среды с углеводами и нативными белками – при 0,5 атм (110°С) 5–10 мин; материал и посуду, содержащие бациллы сибирской язвы, обеззараживают при 1 атм в течение 2ч.
Контроль за соблюдением режимных параметров работы автоклава проводится с помощью максимального термометра. В отдельных случаях в автоклав помещают бензойную кислоту или бензонафтол с точками плавления 120°С и 110°С.
СТЕРИЛИЗАЦИЯ ТЕКУЧИМ ПАРОМ проводится троекратно (дробно) в течение трех дней по 30–60 мин в автоклаве при незавинченной крышке и открытом выпускном кране или в спец аппарате, который представляет собой металлический цилиндр, покрытый теплоизоляционным материалом с отверстием в конической крышке для выхода пара, краном и указательной трубкой в донной части. Внутри аппарата имеется подставка для стерилизуемых материалов. Залитую в него воду подогревают любым источником тепла. В текучепаровом аппарате стерилизуют питательные среды, изменяющие свои свойства при температуре выше 100°С: молоко, желатину, картофель и среды с углеводами. Вегетативные формы микроорганизмов при такой стерилизации погибают, а споры сохраняются. Спустя сутки при комнатной температуре часть из них прорастает и повторное воздействие пара их уничтожает. Прогреванием на третьи сутки полностью обезвреживают всю спороносную микрофлору, которая к этому времени завершает вегетацию.
Свертывание (уплотнение) сыворотки и яичных сред производят в двустенном свертывателе с электрическим нагревом. Аппарат покрыт теплоизоляционным материалом и имеет стеклянную и металлическую крышки. Воду в свертыватель наливают через имеющееся в его верхней части отверстие, которое закрывается пробкой с вмонтированным термометром. Пробирки со средами укладывают на дно свертывателя в наклонном положении. Прогревают среды однократно или дробно при температуре 80–90С в течение 1 ч.
Фильтрование как механический способ стерилизации может быть использовано для обеспложивания жидких веществ, которые нежелательно подвергать действию высокой температуры, например сывороток, антибиотиков. Для этого изготовляют мелкопористые фильтры с точно градуированными порами, которые задерживают микроорганизмы.
В быту используется стерилизация кипячением для обработки игл и шприцев. Кипятят их в стерилизаторах 30–45 мин. Для повышения точки кипения и устранения жесткости воды добавляют 1 % соды. Этот метод не обеспечивает полного уничтожения микробов, так как споры бактерий и некоторые вирусы выдерживают кипячение в течение нескольких часов.