Теоретичні питання до заняття:
Актуальність теми “Сальмонели – збудники гострих сальмонельозних гастроентеритів”.
Систематичне положення збудників сальмонельозів.
Біологічні властивості сальмонел.
Патогенез гострих сальмонельоз них гастроентеритів та його особливості.
Імунітет при сальмонельозній токсикоінфекції.
Принципи і методи мікробіологічної діагностики гострих сальмонельозних гастроентеритів.
Практичні завдання, які виконуються на занятті:
Провести мікроскопічне дослідження демонстраційних препаратів з різних видів збудників гострих сальмонельозних гастроентеритів, пофарбованих за Грамом. Зробити висновок про можливість їх диференціації за морфологічними і тинкторіальними властивостями.
Вивчити культуральні і біохімічні властивості збудників сальмонельозів на середовищах Ендо, Плоскірева, Олькеницького, вісмут-сульфіт агарі, жовчному бульйоні, МПА.
Здійснити серологічну ідентифікацію чистої культури сальмонел, що виділена від хворого з підозрою на гастроентерит, за допомогою реакції аглютинації на склі з О- і Н-сальмонельозними діагностичними сироватками. Визначити вид збудника відповідно класифікації Кауфмана-Уайта.
Створити схему мікробіологічної діагностики гострих сальмонельозних гастроентеритів.
Вивчити діагностичні препарати, що застосовуються при сальмонельозній токсикоінфекції.
Зміст теми:
На практичному занятті студенти вивчають різні біологічні властивості сальмонел – збудників гострих сальмонельозних гастроентеритів. Для знайомства з морфологічними властивостями проводять порівняльне мікроскопічне дослідження демонстраційних препаратів з різних видів сальмонел. Культуральні і біохімічні властивості вивчають на елективних та диференціально-діагностичних середовищах. Антигенні властивості визначають шляхом постановки реакції аглютинації з метою серологічної ідентифікації чистої копрокультури, виділеної від хворого з підозрою на гострий сальмонельозний гастроентерит. На підставі вивчення патогенезу цього захворювання і властивостей збудника створюють схему мікробіологічної діагностики. Вивчають імуногенез сальмонельозних гастроентеритів, знайомляться з діагностичними та лікувально-профілактичними препаратами, що використовуються в медичній практиці при сальмонельозах.
Виконані завдання студенти записують у протокол та підписують його у викладача.
Рекомендації для оформлення протоколу.
Студенти вносять до протоколів:
Малюнок 1. Вивчення морфологічних і тинкторіальних властивостей сальмонел (S.typhimurium, S.enteritidis, S.choleraeseus) на демонстраційних препаратах, пофарбованих за Грамом. Записують висновок про можливість диференціації сальмонел за морфологічними і тинкторіальними властивостями.
Таблиця 1. Культуральні і ферментативні властивості сальмонел.
Характеристика росту на |
Олькеницького |
Ряд Гіса |
||||||||
МПА S форма колоній |
Жовчному бульйоні помутніння |
Ендо прозорі колонії |
Вісмут-сульфіт агарі чорні колонії |
Ферментація |
Утворен ня H2S
+ |
Ферментація |
||||
Лактози
– |
сечовини
– |
Глюкози |
Маніту |
Лактози |
Сахарози |
|||||
КГ |
КГ |
– |
– |
|||||||
Малюнок 2. Схема постановки реакції аглютинації для серологічної ідентифікації сальмонел.
Виділена культура
4 6 9 i c g, m
Імунні діагностичні Імунні діагностичні
сальмонельозні О-сироватки сальмонельозні Н-сироватки
Малюнок 3. Схема мікробіологічної діагностики гострих сальмонельозних гастроентеритів
Бактеріологічна діагностика
Виділення гемокультури Ендо
в перші години
захворювання
Вісмут-сульфіт агар
К
ров
Жовчний бульйон
Олькеницького
В
ипорожнення,
Жовчний селенітовий
МПА
інше бульйон
Ідентифікація виділеної культури
За культуральними ознаками;
За морфологічними, тинкторіальними властивостями;
Біохімічна ідентифікація;
Серологічна ідентифікація за допомогою реакції аглютинації відповідно класифікації Кауфмана-Уайта:
А) З адсорбованою групоспецифічною О-сироваткою (В, С, Д, Е);
Б) З адсорбованою О-сироваткою серогруп 4, 7, 9, 10;
В) З адсорбованими Н-сироватками (i, r, c, g, m, e, h);
Фаготипування
Біологічне дослідження для визначення джерела захворювання.
per
os
Через
24-48 год. загибель від септицемії
Висіви з органів, крові на елективні і
Рештки їжі, Білі миші диференційні середовища і проводять
змиви з рук, ін. Ідентифікацію виділених культур, як
при бактеріологічній діагностиці.
Серологічна діагностика
Можна здійснювати з перших днів захворювання з повторним дослідженням через 7-10 днів. Використовують реакцію аглютинації або РНГА з сальмонельозними полівалентними і групоспецифічними (А, В, С, Д, Е) діагностикумами. Діагностичне значення має збільшення титрів антитіл в 2-4 рази.
Студенти записують препарати, що використовують при діагностиці сальмонельозних гастроентеритів.