протокол 9 укр

Тема заняття № 9. Дослідження альтернативних шляхів перетворення глюкози. Метаболізм галактози та фруктози. Цукровий діабет.

Цілі заняття:

• Пояснювати послідовність ферментативних реакцій та значення пентозофосфатного шляху окислення глюкози.

• Аналізувати метаболічні шляхи перетворення фруктози і галактози в організмі людини.

• Проаналізувати основні джерела та шляхи використання глюкози крові.

• Пояснювати роль гормонів в підтримці постійного рівня глюкози в крові.

• Пояснювати порушення метаболізму вуглеводів при цукровому діабеті.

Теоретичні питання

1. Пентозофосфатний шлях окислення глюкози:

• схема реакцій окислювальної та неокислювальної стадії ПФШ;

• роль ферментів та коферментів в проходженні реакцій ПФШ;

• сумарне рівняння реакцій ПФШ;

• біологічне значення ПФШ.

2. Ферментативні реакції перетворення фруктози в організмі людини.Сорбітоловий шлях.

3. Спадкові ензимопатії обміну фруктози.

4. Ферментативні реакції перетворення галактози в організмі людини.

5. Спадкові ензимопатії обміну галактози.

6. Схема біохімічних процесів, що забезпечують постійний рівень глюкози в крові.

7. Гормони – регулятори обміну глюкози в організмі. Механізми впливу гормонів на рівень глікемії. Характеристика гіпер-, гіпоглікемії та глюкозурії.

5. Методи визначення вмісту глюкози в крові.

6. Цукровий діабет 1 (інсулінзалежний) та 2 типу (інсуліннезалежний).

7. Біохімічна характеристика та діагностичні критерії цукрового діабету.

8. Використання глюкозотолерантних тестів обміну вуглеводів в організмі людини.

9. Значення визначення вмісту сіалових кислот в крові для діагностики

Практична робота

Завдання 1. Кількісне визначення вмісту глюкози в крові методом В.К.Городецького.

Принцип роботи. Нормальний рівень глюкози в крові забезпечується за рахунок динамічної рівноваги між фізіологічними та біохімічними процесами, що поставляють глюкозу в кров, та відповідними процесами, що зменшують її кількість в плазмі крові за рахунок надходження в клітини внутрішніх органів. В регуляції рівня глюкози в крові приймають участь наступні гормони: інсулін, глюкагон, адреналін, глюкокортикоїди та соматотропні.

Для визначення вмісту глюкози в крові використовується реакція, яка заснована на властивості глюкози окислюватись глюкозооксидазою в глюконову кислоту. Пероксид водню, що утворився розщеплюється пероксидазою і відбувається окислення ортотолуідину. Кількість окисленого барвника прямо пропорційна концентрації глюкози в крові.

Хід роботи. До 1,0мл безбілкового фільтрату крові додають 1,5мл робочого розчину, який містить препарати глюкозооксидози, пероксидази та о-толуідину та 1,5мл ацетатного буферу.

Спостерігають розвиток синього забарвлення. Результати заносять до таблиці:

Вміст пробірок	Інтенсивність забарвлення з реактивом на глюкозу	Висновки
Безбілковий фільтрат крові здорової людини
Безбілковий фільтрат крові хворого на цукровий діабет

Клініко-діагностичне значення.

В теперішній час досконалим методом визначення глюкози в крові є глюкооксидазний метод за В.К. Городецьким.

У здорової людини вміст глюкози в крові складає від 3.3 до 5.5ммоль/л.

Гіперглікемія спостерігається за наступних станів: цукровий діабет, захворювання печінки та підшлункової залози, підвищення функції щитоподібної залози, кори і мозкового шару наднирників, гіпофіза; механічному та токсичному ураженні ЦНС, травмах та пухлинах мозку, епілепсії, отруєнні окисом вуглецю, стрихніном, сильні емоції і психічні збудження.

Після значного надходження вуглеводів з їжею спостерігають аліментарну гіперглікемію, яка триває 2-3 години.

Гіпоглікемія зустрічається при передозуванні інсуліну під час лікування цукрового діабету, недостатній функції щитоподібної залози, надниркових залоз, гіпофіза; гіперфункції острівків Ларгенганса підшлункової залози (аденоми, гіперплазії, гіпертрофії), довготривалій перерві між прийняттям їжі та при голодуванні.