Эпизоотологические особенности
Источники и пути передачи инфекции.Основной источник-больная птица. Переносчиками могут быть насекомые. Доказана передача вируса оспы кур посредствомGuliceidesarakawae. Механические носители ВОП-клещиA.persicus,D.gallina,S.Bipectinatusи клопыCimexlectularius. ВОП в организме заражённых в естественных условиях клещейA.persicusсохраняет активность до 730 дн, передаётся в последующее поколение трансовариально, в организме клещейD.gallinae-соответственно до 300 и 240 дн. Однако птицы чаще заражаются при контакте с больной птицей, через загрязнённые вирусом корма, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. В организм вирус проникает через повреждённые кижу и слизистые оболочки.
Спектр патогенности в естественных условиях. Большинство выделяемых полевых штаммов ВОП патогенны для птиц этого вида. Однако в экспериментальных условиях некоторые штаммы могут вызывать заражение норок, уток, ястребов и канареек. Встречаются так называемые бипотогенные и трипатогенные штаммы ОП; они заражают кур и голубей или кур, голубей и индеек. Штаммы Никано и Хоккей обладают широким спектром патогенной активности; вызывают оспенную реакцию у цыплят, голубей и кроликов. По спектру патогенности ВОП могут быть расположены в таком порядке: голуби, индейки, куры и канарейки. Вирус оспы перепелов (шт.QP-241) вызывает гибель перепелов-цыплят. При кожном заражении у голубей развивается слабовыраженная фолликулярная реакция. Вирус оспы выделен у из бородавкоподобных поражений у 3-х видов австралийских диких птиц: сорокиGumnrhinatibicen, белоглазкиZosteropslateralsи сорочьего жаворонкаGrallinacyanoleuca. Все 3 вируса не вызывали ЦПД в культуре фибробластов КЭ. В РН, РДП показана АГ близость этих вирусов с вирусами оспы кур и голубей,но они не давали антигенных перекрёстов с вирусом осповакцины.
Диагностика
Диагноз на ОП ставят на основании эпизоотологических данных, результатов клинического обследования птиц, вирусологических и серологических исследований. Если имеются типичные оспенные поражения кожи, гребня, серёжек и лицевой части головы, диагноз поставить нетрудно. Если же поражения локализуются только в ротовой и носовой полостях, диагностировать болезнь значительно труднее.
Выделение вируса.
Выделение вируса на КЭ.Из 10%-ной суспензии, свободной от микрофлоры, готовят разведения 10-2и 10-3на физрастворе. Каждым разведением (по 0,2мл) заражают на ХАО по 4 10-12-дн КЭ, которые инкубируют в течении 6 дн. КЭ, погибшие на 3-и сут и позже, а так же оставшиеся на 6-е сут после заражения охлаждают и вскрывают. В положительных случаях на ХАО обнаруживают отдельно расположенные или слившиеся оспины. Под влиянием вируса оспы голубей возникают наиболее крупные, толстые, компактные, с выпуклой серединой очаги оспенных поражений диаметром 5-6 мм, не имеющие признаков некроза. При высокой заражающей дозе наблюдается значительное утолщение и железообразный отёк всей оболочки (вид медузы).
От вируса оспы кур появляются более мелкие (3-5 мм в диаметре) плоские поражения, иногда с неровными краями. При большой заражающей дозе наблюдаются обширные утолщения оболочки, которая имеет беловатую окраску. Вирус оспы индеек даёт беловатые слабо выраженные очаги поражения диаметром 2-3 мм, часто окружённые кольцеобразной зоной. Вирус оспы канареек образует дифференцированные очаги. Первичные очаги средней величины, разлитые и напоминают поражения, вызываемые оспой голубей. Вторичные очаги имеют вид беловатых точек. О вируса осповакцины появляются хорошо видимые очаги уже на 3-й день после инфицирования. Они плоские, диаметром 2-3 мм, с отчётливо видимым центральным некрозом в первичных очагах. ИЗ оспенных поражений ХАО делают тонкие мазки или отпечатки на предметных стёклах и окрашивают по Морозову или Пашену для выявления элементарных оспенных телец (вирионов). Выделение вируса на КЭ проводят до 3-х пассажей.
Биопроба.Её проводят на неиммунных к вирусу оспы цыплятах 3-4 мес возраста. Для этого используют 10%-ную суспензию материала, полученного от естественно больной птицы, или суспензию ХАО заражённых КЭ. В том и другом случаях испытуемый материал осторожно втирают стеклянной палочкой или зубной щёткой в скарифицированную поверхность гребня, бородок, а так же в освобождённые от перьев фолликулы голени. При наличии в материале вируса оспы на месте втирания на 5-6-й дн развиваются оспенные поражения: припухание и покраснение фолликулов, появление на поверхности их гнойных пробочек, затем струпьев, которые в дальнейшем сливаясь, дают общий струп коричневого цвета. Специфичность оспенных поражений у экспериментально заражённой птицы в каждом случае может быть подтверждена при помощи вирусоскопии мазков. У кур, заражённых вирусом оспы голубей в перьевые фолликулы, развивается доброкачественный фолликулит (без некроза), который к 10-12-му дню исчезает. Вирус оспы кур после нескольких пассажей на индейках может вызывать оспенный процесс у голубей, а после нескольких пассажей через них ослабить свою вирулентность по отношению к курам и индейкам.
Индикация вируса.
Вирусоскопия.Готовят мазки из воспалённых фолликулов голени экспериментально заражённых кур или голубей или из свежих оспенных бородавок естественно больной птицы. Окрашивают их методом серебрения по Морозову, на присутствие элементарных телец можно окрашивать также по методу Герцберга или Пашена.
При иммерсионной микроскопии элементарные тельца Борреля просматриваются в виде мелких (200-300 нм) округлых образований тёмно-коричневого или чёрного цвета, расположенных поодиночке, парами, короткими цепочками, в виде скоплений. Присутствие оспенного вируса считается подтверждением только при обнаружении характерных телец в массовом количестве. Достоинством метода вирусоскопии следует считать быстроту ответа (0,5-1 ч после доставки материала в лабораторию), простоту и доступность. Однако есть и некоторые недостатки: наиболее чёткие результаты при вирусоскопии можно получить при использовании срезов от свежих везикул (до нагноения) или везикулярной жидкости; при исследовании пустулёзной жидкости, особенно корок, возможность обнаружения элементарных телец и достоверность полученных результатов значительно снижается. Вирусоскопические исследования могут быть проведены также с использованием техники фазовоконтрастной микроскопии.
ЭМ.В эпителии оспин можно найти вирус ЭМ методом после адсорбции на коллодиевую плёнку. При этом выявляются как незрелые пузырьковидные частицы размером от 60 до 200 нм, так и типичные кирпичеобразные и овальные зрелые вирионы. При негативном контрастировании видны филаментозные структуры вирионов. Диагноз считают установленным при наличии в препаратах одиночных или расположенных группами оспенных вирионов. Метод позволяет определить не только размеры исследуемых вирусов, но и форму и структуру их.