- •3.Образец сопроводительного документа.
- •4.Первичная обработка патологического материала в токсикологической лаборатории
- •1.Методы извлечения ядовитых веществ из патологического материала и корма
- •2. Методы обнаружения и идентификации ядов
- •2.1 Химические методы
- •2.2 Физико-химические методы
- •2.3 Биологические методы
- •2.4 Ботанический анализ
- •6.Порядок ведения документации хта и оформление заключения
- •1.Общие принципы диагностики отравлений животных
- •2.3 При отравлении антикоагулянтами непрямого действия, ратицидами и растениями, содержащими кумарины, которые нарушают синтез витамина к, в качестве антидота назначается коагулянт викасол.
- •Гипоксическая форма нарушения дыхания наблюдается при:
- •А. -арбоксигемоглобинемии ;
- •При отравлении антикоагулянтами непрямого действия, ратицидами и растениями, содержащими кумарины, которые нарушают синтез витамина к, в качестве антидота назначается:
- •2.Возможности отравления животных натрия хлоридом.
- •Отравление протекает остро с высокой смертностью. Характерны клинические признаки: жажда, отказ от корма, раннее появление депрессивного состояния и параличей.
- •Рецепт №1
- •8.Список препаратов, применяемых в лечении отравления
- •Путь введения и дозы
- •Тема №4 Отравление животных нитратами и нитритами
- •Информационный материал
- •1.Характеристика нитратов и нитритов
- •Корове:
- •5.Кофеин –бензоат натрий (Coffeinum – natrii benzoas).
- •6.Магния сульфат (Magnesii sulfas)
- •1.Мускариноподобные эффекты:
- •2.Никотиноподобные эффекты:
- •4.Клинические признаки отравления фос
- •7.Профилактика отравлений животных фос
- •Тема №6 отравление животных соединениями тяжелых металлов и мыщьяка
- •1.5. Ветсанэкспертиза продуктов животного происхождения и корма для животных при отравлениях металлами.
- •1.6. Химико – токсикологический анализ при отравлениях соединениями металлов мышьяка.
- •Список тем токсикологии для самостоятельного изучения (рефераты)
- •Задания для зачетного занятия по токсикологии:
2.3 Для стимуляции сердечной деятельности кардиотонические средства: кофеин, сульфокамфокаин, адонизид, строфантин.
Лошади массой 500 кг сульфокамфокаин для 2 внутривенных инъекций Rp.: Sol.Sulfocamphocami 10%-2ml
D.t.d. №20 in ampullis S.: Внутривенно по 20мл на
7.Профилактика отравлений животных фос
Соблюдать инструкции по технике безопасности при хранении, транспортировке и применению пестицидов в сельском хозяйстве .
Скармливать зеленые корма и растения не ранее 6 суток после обработки растений препаратами контактного действия и не ранее 45 дней после обработки препаратами системного действия.
Не скармливать животным корма, в которых содержание ФОС превышает МДУ (табл.№4)
Таблица №4 МДУ ФОС в кормах для животных
№ п/п
Название препарата
МДУ (мг/кг)
1.
Антио
2
2.
Бутифос
3
3.
Дурсбан
0,2
4.
Карбофос
2- для молочного скота и яйценоских птиц 5- для откормочных животных
5.
Метафос
0- не допускается для молочного скота и яйценоской птицы 0,5 - для откормочных животных
6.
Хлорофос
1 - для молочного скота 2- для откормочного скота
7.
Фталофос
1 - для молочного скота 2- для откормочных животных
8.
Фосфамид
2
9.
Метилмеркаптофос
1
10.
Метилнитрофос
1 - для молочного скота 2 - для откормочных животных
В воде для поения животных содержание ФОП не допустимо. Специалисты агрономической, зоотехнической, ветеринарной, санитарной служб и службы защиты растений должны вести точный учет и знать, где, когда и какие пестициды применялись на территории хозяйства. Эти сведения необходимы для безопасного использования пастбища, водоемов, садов, полей и лесных массивов.
При работе с ФОС все лица должны соблюдать правила личной безопасности: работать в комбинезонах, резиновых сапогах и перчатках, респираторах; делать перерывы через каждые 30 минут.
Обработку животных проводить вдали от ферм, жилья, посевов и пастбищ (не менее 1000м) и в более прохладное время, чтобы уменьшить летучесть пестицидов.
,
Трупы павших животных вскрывать на скотомогильниках или в хорошо проветриваемом помещении. Все операции по исследованию проб проводить в резиновых перчатках и в вытяжном шкафу.
После работы с пестицидами опрыскивающую аппаратуру и одежду обработать 5% раствором кальцинированной соды, руки и участки тела, загрязненные ФОС, вымыть с мылом и нашатырным спиртом.
З.Ветеринарно-санитарная экспертиза сырых животных продуктов при отравлении ФОС.
Убой животных и птиц на мясо разрешается не ранее, чем через 25 дней после перенесенного отравления ФОС.
В случае вынужденного убоя раньше указанного срока при отравлении животных ФОС необходимо провести химико- токсикологический анализ на присутствие в тканях животных остаточных количеств ФОС.
При обнаружении остаточных количеств ФОС в продуктах животного происхождения вопрос о пригодности их в пищу решается в соответствии с инструкциями об МДУ пестицидов в пищевых продуктах. В молоке и молочных продуктах содержание любых пестицидов не допускается. Мясо, содержащее ФОС выше МДУ подлежит утилизации. (табл.№5)
Таблица №5.
МДУ ФОС в мясных продуктах для человека.
№п/п
Препарат
МДУ (мг/кг)
LD 50 мг/кг
1.
Байтекс
0,2
250
2.
Дурсбан
од
-
3.
Амидофос
0,3
-
4.
Дифос
1
-
5.
Трихлорметафос -3
0,3
414
Для всех других ФОС присутствие их в продуктах животноводства не допускается.
Список препаратов, применяемых для лечения отравления животных пестицидами группы ФОС.
L Дипироксим (Dipiroximum)
Механизм действия: Реактивирует холинэстеразу, ускоряет распад
ацетилхолина.
Форма выпуска: Порошок , 15 % раствор в ампулах по 1 мл.
Способ применения и дозы: Подкожно, внутримышечно или внутривенно в
виде 15 20 % раствора в дозах (мг/кг)
КРС - - 2
лошади — 10
овце — 10
свинье — 10
собаке — 10
курице — 30
кролику — 20
2_ Атропина сульфат (Atropini sulfatis)
Механизм действия: Блокирует преимущественно периферические
холинорецепторы. устраняет холиномиметические эффекты ФОП: бронхоспазм, бронхорею. гиперсаливацию, угнетение сердечной деятельности, диарею, непроизвольное мочеиспускание, спастические боли гладких мышц, миоз, спазм аккомодации.
Форма выпуска: 0,1 % раствор в ампулах по 1 мл; 1 % раствор во флаконах по
мл.
Способ применения и дозы: Подкожно и внутривенно (мг/кг):
лошади 0,04—0,4
КРС 0,1-0,4
овце 0,1-1
свинье 0,1-1
собаке 0,2-2
кролику 5
3_ Тропацин (Tropacinum)
Механизм действия: Блокирует преимущественно холинорецепторы ЦНС,
устраняет перевозбуждение ЦНС, судороги, тремор, паралич дыхательного и
сосудодвигательного центров.
Форма выпуска: Порошок..
Способ применения и дозы: Внутримышечно, внутривенно в форме 10 %
раствор а (мг/кг):
лошади — 5
КРС- 1
овце — 3
свинье — 5
собаке — 5
кролику — 10
курице — 20
,
Антидотная смесь при отравлении ФОП:
Состоит из равных объемов 10 % раствора тропацина и 20 % раствора
дипироксима, в который добавлен порошок атропина сульфата в количестве 1,5% от объема.
Механизм действия: Реактивирует холинэстеразу, блокирует центральные и
перефирическне холинореактивные системы.
Форма выпуска: Готовится перед употреблением из порошкообразных
лекарственных форм тропоцина, дипироксима и атропина сульфата.
Способ применения и дозы: Внутримышечно, подкожно (мл/животное)
лошади — 40
КРС - - 6-8
овце — 4
свинье — 5-10
собаке — 1-2
кролику — 1
курице — 0,3
Кальция хлорид (Calcii chloridum)
Механизм действия: В крови препарат диссоциирует на ионы кальция и хлора.
Ионы кальция стимулируют работу сердца, ускоряют проведение импульсов в
нервно-мышечных синапсах, повышают активность гипотоламо-гипофизарно-
нажпочечниковой системы и т.о. ускоряют обезвреживание ядов в организме.
Форма выпуска: Порошок. 10 % раствор в ампулах по 5 и 10 мл.
Способ применения и дозы: В ну тр ив е н н о ( м г/кг) :
лошади 10-50
КРС 20-80
собаке 10- 150
6.. Кальция глюконат (Calcii gluconas)
Механизм действия: такой же как у кальция хлорида.
Форма выпуска: Порошок. 10 % раствор в ампулах по 10 мл.
Способ применения и дозы: Внутривенно (иг/кг)
лошади — 30-40
КРС — 30-40
овце— 15-100
собаке — 50-200
Внутримышечно (мг/кг)
овце 20-130
свинье 20-130
собаке 100-300
.
Тиамина бромид (Thiamini bromidum)
—
_.,..... .1_.-|„...—,:t, .-...—.Г, 1Механизм действия; Стимулирует передачу ипульсов в нервно-мышечных
синапсах, устраняет парезы и параличи.
Форма выпуска: Порошок.. 3 и 6 % раствор в ампулах по 1 мл.
Способ применения и дозы: Внутримышечно
0,6 - 1,2 мг/кг.
Кислота аскорбиновая (Acidi ascorbinicum)
Механизм действия: Стимулирует окислительно-восстановительные процессы,
метаболизм ядов в печени, устраняет порозность сосудов, усиливает выброс
кортикостероидов, устраняет парезы и параличи.
Форма выпуска: Порошок. 5 и 10 % раствор в ампулах по 1 и 2 мл.
Способ применения и дозы: Внутрь и парентерально 1 мг/кг.
9.. Сульфокамфокаин (Sulfocamphocain')
Механизм действия: Является водорастворимой формой камфоры. Усиливает
работу сердца, расширяет коронарные сосуды, устраняет аритмию,
стимулирует анаболические процессы в миокарде (синтез белка,
макроэргических фосфатов).
Форма выпуска: 10 % раствор в ампулах по 2 мл.
Способ применения и дозы: Парентерально 0,4 мг/кг.
Жидкость Д.Д. Полоза.
Механизм действия: Действует как плазмозаменитель, восстанавливает
ионный состав и осмотическое давление крови, стимулирует работу печени,
ЦНС, сердца, устраняет последствия дегидратации организма.
Форма выпуска: Жидкость для инъекций готовится перед применением по
прописи:
0,9 % раствора натрия хлорида — 1000 мл;
10 % раствора кальция хлорида — 4 мл;
калия хлорида— 400 мг;
витамина b1 — 80 мг;
витамина с — 1000 мг.
Способ применения и дозы: Внутрнбрюшинно (мл/животное) КРС - - 2000 теленку — 1000 овце — 500 свинье — 500.
Глюкоза (Glucosum)
Механизм действия: Усиливает антитоксическую функцию печени, стимулирует метаболизм и функции ЦНС, ССС.
Форма выпуска: Порошок. 10 и 40 % раствор в ампулах по 10 мл и флаконах по 500 мл.
Дозы внутривенно мг/ кг:
Лошади-60-200;
Корове-60-300;
Свинье-100-500;
Собаке, кролику, кошке-200-700.
Отравление ФОС
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Лабораторная работа
Работа № 1
Токсическое действие ФОС на кролика и лечение отравления.
Материальное обеспечение работы.
Кролик-1
Шприцы с иглами на 5 мл -2
Вата
Спирт 96% - 50мл
10% раствор хлорофоса -1 Омл (или 10% раствор карбофоса -1 Омл)
0,1% раствор атропина сульфата -10мл
Линейка
Фонендоскоп.
Ход опыта.
Оценить исходное состояние кролика по тестам (см.таблицу №5).
Таблица №5.
Протокол опыта
№ п.п
Тесты
Исходное состояние
Хлорофос
Атропин на фоне хлорофоса
В
эемя в минутах
10
20
30
10
20
30
1.
ЦНС (возбуждение, угнетение)
2.
Рефлексы (усиление, ослабление)
3.
Тремор, судороги (есть, нет)
4.
Величина зрачка (мм)
5.
Саливация (усиление, угнетение)
6.
Дефекация (есть, нет)
7.
Пульс (уд/мин)
8.
Дыхание (дых. движений /мин.)
9.
Цвет слизистых
10.
Температура
,
Ввести под кожу 10% раствор хлорофоса в дозе 500 мг/кг (LD5o хлорофоса =540 мг/кг внутрь для мышей). Подбор дозы провести по содержанию Д.В. в препарате хлорофоса и в зависимости от индивидуальной чувствительности животного.
В течение 30 минут наблюдать за состоянием животного по тем же тестам.
На максимуме клинического проявления отравления ввести внутривенно атропина сульфат в дозе 5мг/кг (1мл 0\1% раствора на 1кг массы).
В зависимости от тяжести состояния ввести препараты патогенетической и симптоматической терапии:
Сульфокамфорокаин внутривенно в дозе 10 мг/кг.
Тиамина бромид внутримышечно в дозе 1 мг/кг.
Кальция хлорид внутривенно в дозе 50 мг/кг.
Кислоту аскорбиновую подкожно или внутримышечно в дозе 1 мг/кг.
Глюкозу внутривенно в дозе-500 мг/кг.
Объяснить механизм наблюдаемых изменений состояния животного под действием хлорофоса и атропина.
Работа №2.
Ферментный метод определения фосфорорганических пестицидов в
патологическом материале.
>
Материальное оснащение: баня водяная, термометр химический до 100° С, пробирки, колбы мерные на 100 и 50 мл, пипетки по 0,2-10мл отдельно для каждого реактива, склянки с притертыми пробками, химические стаканы, весы, вата.
Принцип метода. В основу метода лежит способность фосфорорганических соединений (ФОС) угнетать холинэстеразу. Основное значение этого фермента- разложение избытка ацетилхолина на холин и уксусную кислоту. Последняя в ходе реакции изменяет окраску индикатора бромтимолового синего до зеленого цвета. При угнетении фермента замедляется расщепление ацетилхолина, и образование уксусной кислоты в реакционной смеси происходит в течение длительного времени, что устанавливают по скорости изменения окраски индикатора.
О наличии пестицидов в пробе судят по степени угнетения активности холинэстеразы, выраженной в процентах. Расчет проводят по калибровочному графику. Чувствительность метода 0,1мг/кг анализируемого продукта. Точность метода 80%. Метод рекомендуется для определения хлорофоса, метафоса, карбофоса, трихлорметафоса -3, метилнитрофоса, метилмеркапто-фоса, ДДФВ и диброма в органах и тканях животных.
Подготовка материала к исследованию. Исследуемый материал тщательно измельчают, после чего навеску в 20-30 г. помещают в стаканчик с притертой пробкой, заливают адекватным количеством хлороформа (20-3Омл), закрывают пробкой и экстрагируют в течении часа при периодическом встряхивании. Затем пипеткой, нижний конец которой обернут ватой, набирают 1мл хлороформенного экстракта и переносят в пробирку (или химический стаканчик). В другую контрольную пробирку ( или химический стаканчик) вносят 1мл хлороформа. Обе пробирки помещают на водяную баню при температуре не выше 40° С или под струю воздуха до полного испарения хлороформа. К сухому остатку в обе пробирки добавляют 1мл дистиллированной воды и снова помещают пробирки на водяную баню на 3 минуты. После этого охлаждают до комнатной температуры.
Ход опыта. В опытную(№1) и контрольную (№2) пробирки вносят по 1 мл раствора холинэстеразы или сыворотки крови лошади. Затем в пробирку №1 добавляют экстракт из патматериала, -а в пробирку №2 дистиллированную воду. Содержимое хорошо перемешивают и ставят на водяную баню при температуре 39-40°С на ЗОмин. По истечении этого времени в пробирку №3 вносят 0,5мл содержимого из опытной пробирки №1, а в контрольную пробирку (№4) — 0,5мл из контрольной (№2). В каждую пробирку приливают по 4,5мл раствора №3 и сразу отмечают время начала реакции. Затем в отдельную пробирку №5 помещают 0,5мл содержимого из контрольной пробирки (№2) и добавляют
4,5мл раствора №2. Эта пробирка является колометрическим стандартом (см. схему). В дальнейшем отмечают время уравнения (в минутах) цвета жидкости в опытной и контрольной пробирках с цветом колометрического стандарта. Процент угнетения активности холинэстеразы вычисляют по формуле/
где X -угнетение активности холинэстеразы, %;
В - время уравнения цвета жидкости в контрольных пробирках с цветом
стандарта;
В - время уравнения цвета жидкости в опытных пробирках с цветом стандарта.
Схема определения активности холинэстеразы
Наименование компонентов
Номера пробирок
1 опыт
2 опыт
3 опыт
4 контроль
5 колорим. стандарт
Экстракт из патологического материала
1мл
-
-
-
-
Дистиллированная вода
-
1мл
-
-
-
Сыворотка крови лошади 1 :3
1мл
1мл
-
-
-
Инкубация при 40°С в течение ЗОмин.
+
+
-
-
-
Содержимое пробирки № 1
-
-
0,5мл
-
-
Содержимое пробирки №2
-
-
-
0,5мл
0,5мл
Раствор №3
-
-
0,5мл
4,5мл
-
Раствор №2
-
-
-
-
4,5мл
Инкубация при 38-39°С до уравнения цвета
-
-
+
+
+
Угнетение активности холинэстеразы на 10% и более свидетельствует о наличии ФОС в исследуемом материале.
Количественное определение ФОС проводят по калибровочному графику, построенному по препарату, наличие которого предполагается в исследуемом материале. Если подозревается неизвестное ФОС, то калибровочный график строят по одному из ядохимикатов перечисленных выше. Для этого необходимо иметь химически чистое вещество или препарат с известным содержанием активно действующего вещества (ДВ). Из заведомо чистого образца исследуемого материала (мышцы, орган или другой образец) в склянки с притертыми пробками берут 5 навесок по 1 г. и вносят в них соответственно 1,0; 5,0; 10,0; 20,0; 50,0 мкг по ДВ. Через ЗОминут каждую навеску заливают 10мл хлороформа и экстрагируют один час. Хлороформенные экстракты исследуют в описанном выше порядке. По оси ординат откладывают процент угнетения активности холинэстеразы в каждой пробе, а по оси абсцисс -количество препарата (в мг/кг) по ДВ. Зависимость процента угнетения активности холинэстеразы от концентрации ФОС в исследуемом материале (примерный калибровочный график) представлена в таблице.
Угнетение активности холинэстеразы в зависимости от содержания хлорофоса в молоке (мг/л)
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Тесты
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
I