Простые питательные среды Мясопептонный агар
К 1000 мл мясопептонного бульона перед стерилизацией добавляют 20 г агара и кипятят на слабом огне при постоянном помешивании до полного растворения.
Мясопептонный агар, охлажденный до температуры 50- - 55° С, осветляют яичным белком (из расчета один белок на 1000 мл мясопептонного агара), помешают в автоклав, не завинчивая крышку автоклава, или в аппарат Коха на 1 ч чтобы белок свернулся и, оседая, увлек за собой взвешенные частицы. Горячий Мясопептонный агар фильтруют через ватно-марлевый фильтр, устанавливают в нем рН 7,0—7,4, разливают во флаконы или пробирки и 20 мин стерилизуют в автоклаве при температуре 120° С.
Мясопептонный желатин
К мясопептонному бульону прибавляют мелко нарезанный желатин из расчета ю—15 г на 100 мл. После набухания желатин растворяют при медленном нагревании в водяной бане при температуре 40—45 °С, устанавливают рН=7,0 10%-ным раствором бикарбоната натрия, фильтруют через бумажный фильтр в горячем виде. Среду разливают в пробирки по 5—8 мл, стерилизуют дробно 3 дня по часу при температуре 100° С или однократно при 110° С в течение 20 мин. После стерилизации среду охлаждают.
Пептонная вода
К 1000 мл дистиллированной воды добавляют 10 г пептона и 5 г хлористого натрия, кипятят до растворения пептона, фильтруют и устанавливают рН 7,2— 7,4, после чего стерилизуют 30 мин при температуре 120° С.
Элективные среды для выявления возбудителей пищевых то кс и ко инфекций Среды фуксин — сульфитный агар (среда Эндо), бакто-агар Плоскирева, ме-тилен-эозиновая среда Левина, висмут-сульфит агар (среда Вильсон-Блера) готовят из сухих стандартных сред по прописи, указанной на этикетке.
Среда Смирнова
К 1 л расплавленного МП А добавить 10—12 г лактозы и 4—5 мл 1,2% раствора бромкрезолпурпур. Стерилизовать дробно (или при 0,5 атм 20 мин).
Среды накопления сальмонелл Среда Мюллера Для приготовления среды Мюллера готовят вначале растворы серноватисто-кислого натрия и Люголя.
В мерный цилиндр с 50 г серноватистокислого натрия добавляют до 100 мл Дистиллированной воды. Раствор переливают в бутыль и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин.
Для приготовления среды Мюллера в стерильные флаконы помещают по 4,5 г мела и стерилизуют их сухим паром в течение 1 ч. Затем наливают в каждый флакон по 90 мл бульона из перевара Хоттингера, содержащего 130— 150 мг % азота, устанавливают рН 7,2—7,4 и стерилизуют 30 мин при температуре
120°С После стерилизации вновь устанавливают рН 7,2—7,4, для чего проверяют в одном из флаконов и определяют необходимый для подтитровки данного количества среды объем соляной кислоты или гидрата окиси натрия. Затем в асептических условиях перед употреблением добавляют по 2 мл раствора Лю-голя и по 10 мл раствора серноватистокислого натрия.
Таблица 1 Рост возбудителей пищевых токсикоинфекций на элективных средах и МПА
Название |
Среда до |
Кишечная |
Сальмонелла |
Протей |
Среды |
Посева |
Палочка |
|
|
Эндо |
Бледно- |
Мелкие колонии |
Мелкие колонии |
Сплошной |
|
Розового |
красного цвета с |
цвета среды, цвет |
рост, цвет |
|
цвета |
металлическим |
среды не меняет- |
среды не |
|
|
оттенком, среда |
ся |
меняется |
|
|
вокруг краснеет |
|
|
Смирнова |
фиолетово- |
Мелкие колонии |
Мелкие колонии |
Сплошной |
|
го цвета |
желтого цвета, |
цвета среды, с |
рост, цвет |
|
|
среда вокруг |
голубым оттен- |
среды не |
|
|
желтеет |
ком, цвет среды не меняется |
меняется |
Левина |
Коричнево- |
Мелкие колонии |
Мелкие колонии |
Сплошной |
|
го цвета |
темно-бурого |
цвета среды, с |
рост, цвет |
|
|
цвета, цвет сре- |
сиреневым от- |
среды не |
|
|
ды не меняется |
тенком, цвет среды не меняется |
меняется |
Плоскире- |
Кирпично- |
Мелкие колонии |
Мелкие колонии |
Отдельные |
ва |
красного |
красного цвета, |
цвета среды, сре- |
колонии |
|
цвета |
цвет среды не меняется |
да вокруг немного просветляется |
цвета среды |
МПА |
Соломенно- |
Мелкие колонии |
Мелкие колонии |
Сплошной |
|
желтого |
серого цвета |
серого цвета с |
рост, цвет |
|
цвета |
|
голубоватым оттенком |
среды не меняется |