Этап 2. Определение содержания аминного азота в гидролизате пивной дробины

В мерную колбу вместимостью 50 см³ вносят 10 см³ прозрачного гидролизата пивной дробины, прибавляют 3–4 капли тимолфталеина и титруют 1 н. раствором гидроксида натрия до бледно-голубого окрашивания. Затем при перемешивании осторожно приливают 30 см³ суспензии фосфорнокислой меди и доводят объем до метки дистиллированной водой.

Смесь тщательно перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр; первые мутные порции фильтрата возвращают на повторное фильтрование.

Прозрачный фильтрат в количестве 10 см³ вносят в колбу вместимостью 50 см³, подкисляют его 80 %-й уксусной кислотой в количестве 0,5 см³, прибавляют 1 г йодистого калия, все тщательно перемешивают и оттитровывают выделившийся йод 0,01 н. раствором тиосульфата натрия. В конце титрования добавляют одну–две капли раствора крахмала в качестве индикатора. Титрование заканчивают при обесцвечивании раствора от одной капли раствора тиосульфата натрия.

Количество пошедшего на титрование тиосульфата натрия, умноженное на 0,28, дает содержание аминного азота в 10 см³ фильтрата. Это соответствует 2 см³ гидролизата пивной дробины с учетом разбавления, исходя из того, что 1 см³ 0,01 н. раствора тиосульфата натрия соответствует 0,28 мг аминного азота.

Количество аминного азота (N, мг), содержащегося в 100 см³ гидролизата пивной дробины, вычисляют по формуле:

N = a ∙ 0,28 ∙ 5 ∙ 10,

где a – количество 0,01 н. раствора тиосульфата натрия, пошедшее на титрование выделившегося йода, см³; 5 и 10 – коэффициенты пересчета.

На рис. 2 дана схема определения содержания аминного азота в гидролизате пивной дробины.

1 Н. Раствор гидроксида натрия добавляют до бледно-голубого окрашивания 30 см3 суспензии фосфорнокислой меди

3–4 капли

тимолфталеина

Дистиллированная вода до метки – 50 см³

Фильтрование через бумажный фильтр

0,5 См3 80 %-й уксусной кислоты

1 Г йодистого калия

Титрование 0,01 н. раствором тиосульфата натрия

Рис. 2. Схема определения содержания аминного азота

в гидролизате пивной дробины

Этап 3. Приготовление реактивов

1. Раствор хлорной меди (27,3 г хлорной меди растворяют в 1 дм³ дистиллированной воды).

2. Раствор трехзамещенного фосфата натрия (64,5 г двухзамещенного фосфорнокислого натрия Na₂HPO₄ растворяют в 500 см³ дегазированной дистиллированной воды, добавляют 7,2 г гидроксида натрия, а после растворения доливают водой до 1 дм³).

3. Боратный буферный раствор (57,21 г буры растворяют в 1,5 дм³ воды, добавляют 100 см³ 1 н. раствора соляной кислоты и доводят водой до 2 дм³).

4. Суспензия фосфорнокислой меди (один объем хлорной меди смешивают с двумя объемами раствора фосфата натрия и приливают два объема раствора боратного буфера; суспензию можно использовать в течение двух–трех суток).

5. Раствор тимолфталеина (0,25 г тимолфталеина растворяют в 100 см³ 50 %-го этилового спирта).

6. 0,01 н. раствор тиосульфата натрия Na₂S₂O₃ (готовят ежедневно путем разбавления 0,1 н. раствора тиосульфата натрия с последующей проверкой титра по K₂IO₃).

7. 80 %-я уксусная кислота (ледяная).

8. 1 %-й раствор крахмала.

Приготовление фосфатного буфера. В мерную колбу вместимостью 200 см³ вносят 1,815 г однозамещенного фосфорнокислого калия и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Приготовление раствора крахмала. В колбу вместимостью 100 см³ вносят 1 г сухого крахмала, приливают 25 см³ дистиллированной воды. Колбу помещают в кипящую водяную баню и выдерживают в ней до полного растворения крахмала. Затем содержимое колбы охлаждают, добавляют 10 см³ фосфатного буфера, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.