- •Сибирский федеральный университет
- •Исследования биологических систем: довой (таксономический) состав био
- •Цели анализа химического состава биологических систем
- •Анализ химического состава биоты и окружающей среды (воды, воздуха, почв) – необходимая часть
- •Анализ химического состава биоты и окружающей среды (воды, воздуха, почв) – необходимая часть
- •Анализ химического состава биоты и окружающей среды (воды, воздуха, почв) – необходимая часть
- •Анализ химического состава биоты и окружающей среды (воды, воздуха, почв) – необходимая часть
- •Анализ биомассы как источника полезной для человека продукции
- •Физико-химические методы
- •Фотометрические методы,
- •Фотометрические методы, включая
- •Люминесцентные
- •(флуоресцентные) методы, включая
- •Электрохимические методы основаны на измерении электропроводности (кондуктометрия) или потенциала электрода (потенциометрия).
- •Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
- •Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
- •Спектроскопические методы (атомная абсорбция, эмиссия)
- •Применяемые методы анализа
- •Хроматография, масс-спектрометрия
- •Хроматография – по гречески писать
- •Изобретение хроматографии - 1903 г.
- •В 1931 г. лаборатория Ричарда Куна и Едгара Ледерера, изучавших разновидности каротиноидов, подтвердила
- •Все виды хроматографии имеют две фазы
- •Принципы классификации типов хроматографии
- •Цели анализа
- •Агрегатное состояние подвижной фазы
- •технические решения
- •Виды фаз, технические решения
- •Жидкостная хроматография – разделяет жидкие пробы с
- •Разделение в плоскости: Бумажная и тонкослойная хроматография
- •Разделение в плоскости: Бумажная и тонкослойная хроматография
- •Подсчет результатов на пластине ТСХ
- •Подсчет результатов на пластине ТСХ
- •Разделение в объеме: Колоночная жидкостная хроматография низкого давления
- •Разделение в объеме: приборная колоночная хроматография
- •Разделение в объеме: Принцип работы ВЭЖХ хроматографа
- •Разделение в объеме: Газо-жидкостная хроматография
- •Тип взаимодействия аналитов и фазы
- •Адсорбционное тип взаимодействия – один из наиболее распространенных в хроматографии
Разделение в плоскости: Бумажная и тонкослойная хроматография
покровное стекло
тонкослойная |
емкость |
пластина |
стартовая
линия Основная часть силикагельной решетки
пятно смеси растворитель
Тонкий слой (0.05-0.5 мм) силикагеля – полярная стационарная фаза
31
Подсчет результатов на пластине ТСХ
линия фронта растворителя
линия старта
Измерение расстояния от линии старта до линии фронта растворителя
Измерение расстояния от центра пятна до линии старта
Индекс подвижности вещества: Rf = Соотношение расстояний, пройденных веществом и
растворителем
32
Подсчет результатов на пластине ТСХ
Rf - это константа для данного вещества на данном сорбенте в данной системе растворителей. На величину Rf вещества влияют характеристики неподвижной фазы (слоя сорбента), качество и природа растворителя. 33
Разделение в объеме: Колоночная жидкостная хроматография низкого давления
Применяется в основном для препаративного разделения крупных групп веществ; принципы разделения подобны ТСХ.
Выход интересующего вещества зависит от объема и природы подвижной фазы – растворителя.
Разделение в объеме: приборная колоночная хроматография
Высокоэффективная жидкостная хроматография и газовая хроматография - современные приборные варианты колоночной хроматографии.
Например в ВЭЖХ, вместо гравиметрического прохождения растворителя через колонку, последний идет под высоким давлением – до 400 атмосфер, создаваемым насосом. Это в разы увеличивает скорость анализа, позволяет наполнять колонки мелкодисперсным сорбентом.
35
Разделение в объеме: Принцип работы ВЭЖХ хроматографа
Разделение в объеме: Газо-жидкостная хроматография
37
Тип взаимодействия аналитов и фазы
ионная Хроматография
гель
проникающая
Адсорбционное тип взаимодействия – один из наиболее распространенных в хроматографии
Молекула |
Молекула |
анализируемого |
|
вещества (аналита) |
конкурента-вытеснителя |
Функциональная группа адсорбента
Молекула растворителя-разбавителя
Вещества конкурента-вытеснителя и растворителя- разбавителя представляют собой подвижную фазу.