Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Большой практикум / Белки и ДНК / Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум.pdf
Скачиваний:
180
Добавлен:
09.05.2021
Размер:
12.3 Mб
Скачать

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.5. ОЗНАКОМЛЕНИЕ С МЕТОДАМИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ, ИМЕЮЩИХ ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

ние дистиллированной воды — 2 л/ч. Анализатор за один рабочий цикл способен исследовать до 40 образцов в обычном режиме, и до пяти образцов в режиме экстренной пробы. В ходе работы в режиме реального времени выдается информация о нештатных ситуациях и значениях исследуемых параметров. Потребляемая мощность 0,6 кВт

Рабочая зона анализатора (рис. 10.15) состоит из трех вращающихся платформ (слева направо):

для реагентов (термостатируемая, заполняется стандартными картриджами с растворами);

для проведения аналитических реакций (термостатируемая, заполняется многоразовыми кюветами);

для биологических образцов, стандартов и контролей (не термостатируется, заполняется стандартными пластмассовыми пробирками для проб).

Дозирование растворов осуществляется роботизированными манипуляторами. После каждого исследования реакционная кювета осушается, промывается дистиллированной водой и двумя типами чистящих растворов, после чего вновь осушается; существует возможность контроля степени чистоты кювет.

Задания на выполнение лабораторной работы

Задание 10.5.1. Построение абсолютного калибровочного графика зависимости концентрации глюкозы в пробе от изменений оптической плотности

Порядок выполнения работы

1.Надеть одноразовые латексные перчатки. Проверить уровень жидкостей в емкостях для кислотного и щелочного очищающего растворов. При необходимости долить.

2.Включить прибор.

3.Установить штатив с реактивами на платформу для реактивов. Снять колпачки со всех картриджей. Закрыть отсек реактивов крышкой.

4.С экрана загрузки реактивов проверить уровень раствора в картридже для определения глюкозы. При необходимости долить.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

477

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.5. ОЗНАКОМЛЕНИЕ С МЕТОДАМИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ, ИМЕЮЩИХ ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

5.Установить пробирку со стандартным раствором глюкозы в штатив для контролей и стандартов. Штатив поместить на платформу для проб.

6.Дождаться температурной стабилизации и сообщения о готовности анализатора к работе.

7.С экрана калибровок заказать определение глюкозы.

8.Выйти в основной экран и активировать трафарет «старт».

9.После сигнала об окончании исследования войти в экран «Журнал»

ипроверить полученные значения, а также наличие или отсутствие сообщений о нештатных ситуациях.

10.Выключить прибор.

11.Закрыть картриджи колпачками. Штатив с реактивами поместить в холодильник.

12.Опорожнить канистру для отходов.

Задание 10.5.2. Определение глюкозы на анализатореSAPPHIRE 400

Определение глюкозы крови имеет важное диагностическое значение в распознавании таких заболеваний, как сахарный и несахарный диабет, опухоли поджелудочной железы.

Порядок выполнения работы

1.Надеть одноразовые латексные перчатки. Проверить уровень жидкостей емкостях для кислотного и щелочного очищающего растворов. При необходимости долить.

2.Включить прибор.

3.Установить штатив с реактивами на платформу для реактивов. Закрыть отсек реактивов крышкой.

4.С экрана загрузки реактивов проверить уровень раствора в картридже для определения глюкозы. При необходимости долить.

5.Установить пробирку с анализируемой пробой в штатив для проб. Штатив для проб поместить на соответствующую платформу.

6.Дождаться температурной стабилизации и сообщения о готовности анализатора к работе.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

478

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.5. ОЗНАКОМЛЕНИЕ С МЕТОДАМИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ, ИМЕЮЩИХ ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

7.С экрана «Рабочий лист» заказать определение глюкозы в анализируемой пробе.

8.Выйти в основной экран и активировать трафарет «старт».

9.После сигнала об окончании исследования войти в экран «Результаты» и проверить полученные значения, а также наличие или отсутствие сообщений о нештатных ситуациях.

10.Выключить прибор.

11.Штатив с реактивами поместить в холодильник.

12.Опорожнить канистру для отходов.

Задание 10.5.3. Контроль качества исследований глюкозы на анализатореSAPPHIRE 400

Контроль качества исследований является важной и обязательной частью работы для любой лаборатории системы практического здравоохранения. Контролируются правильность и сходимость результатов исследования специальных контрольных материалов с неизвестными значениями, присылаемых органами Федеральной системы внешней оценки качества (ФСВОК) лабораторных исследований. Без участия в этой системе лаборатория не может получить лицензию на право выполнения исследований в медицинских целях.

Порядок выполнения работы

1.Надеть одноразовые латексные перчатки. Проверить уровень жидкостей в емкостях для кислотного и щелочного очищающего растворов. При необходимости долить.

2.Включить прибор.

3.Установить штатив с реактивами на платформу для реактивов. Снять колпачки со всех картриджей. Закрыть отсек реактивов крышкой.

4.С экрана загрузки реактивов проверить уровень раствора в картридже для определения глюкозы. При необходимости долить.

5.Установить пробирку с контрольным раствором глюкозы в штатив для образцов. Штатив поместить на платформу для образцов.

6.Дождаться температурной стабилизации и сообщения о готовности анализатора к работе.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

479

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.5. ОЗНАКОМЛЕНИЕ С МЕТОДАМИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ, ИМЕЮЩИХ ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ

7.С экрана «Рабочий лист» заказать определение глюкозы.

8.Выйти в основной экран и активировать трафарет «старт».

9.После сигнала об окончании исследования войти в «Базу данных» и проверить полученные значения, а также наличие или отсутствие сообщений

онештатных ситуациях.

10.Сравнить полученный результат с целевым значением контрольного образца. Внести оба значения в рабочую тетрадь.

11.Выключить прибор.

12.Закрыть картриджи колпачками. Штатив с реактивами поместить в холодильник.

13.Опорожнить канистру для отходов.

14.Результаты определений всех трех задач внести в рабочую тетрадь.

Контрольные вопросы

1.Какое диагностическое значение имеет определение глюкозы в крови человека?

2.Какой метод используется в анализаторе SAPPHIRE 400 для определения исследуемых веществ?

3.Какие сообщения (флаги) свидетельствуют о технических неполад-

ках?

4.В каких случаях необходима экстренная остановка анализатора и как это можно сделать?

5.Как можно заказать внеочередную пробу?

6.Что будет происходить с анализатором, если опустеет резервуар очищающего раствора? Переполнится канистра для отходов? Закончится ка- кой-то из реагентов?

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

480

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕАКТИВНОСТИАНТИОКСИДАНТНЫХФЕРМЕНТОВ НАБИОХИМИЧЕСКОМАНАЛИЗАТОРЕSAPPHIRE 400

Краткие теоретические сведения

Согласно современным представлениям, процессы свободнорадикального окисления – фундаментальные биологические процессы, обеспечивающие нормальную жизнедеятельность организма. Свободные радикалы участвуют в обмене веществ, обеспечивают защитные реакции, разрушение чужеродных соединений, как поступающих извне, так и образующихся в организме. Свободные радикалы и активные формы кислорода (АФК) в основном образуются при последовательном присоединении электронов к кислороду и в процессе свободно-радикального перекисного окисления липидов (ПОЛ).

При действии многих неблагоприятных факторов – облучении, введении в организм некоторых лекарственных препаратов, при стрессе, физическом перенапряжении, некоторых патологических состояниях – скорость свободно-радикального окисления и количество свободных радикалов в живой системе меняются. Образующиеся в избыточном количестве свободные радикалы, прежде всего АФК могут непосредственно взаимодействовать с органическими соединениями, что ведет к потере биологической активности белков, ферментов, нуклеиновых кислот и т. д. Кроме того, образующиеся продукты перекисного окисления токсичны, ингибируют пролиферацию и созревание клеток, обладают канцерогенными свойствами.

Защиту от повреждающего действия АФК обеспечивает в первую очередь антиоксидантная система, представленная рядом специализированных ферментов, а именно – супероксиддисмутазой (СОД), каталазой, ферментами редокс-системы глутатиона.

В норме в системе прооксиданты – антиоксиданты сохраняется равновесие. При интенсивном образовании АФК и при недостаточной активности антиоксидантной компенсирующей системы возникает окислительный стресс, который может явиться причиной многочисленных патологий. Сво- бодно-радикальное окисление является базисным механизмом старения органов и тканей и вовлекается в патогенез практически всех известных болезней.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум.Учебебное пособие

481

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ НА БИОХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ

Задания на выполнение лабораторной работы

Задание 10.6.1. Определениеактивности супероксиддисмутазы

Супероксиддисмутаза (КФ 1.15.1.1., супероксид:супероксид оксидоредуктаза, СОД,) представлена семейством металлоферментов, катализирующих реакцию дисмутации супероксидных радикалов:

2¯+ 2Н → О2 + Н2О2

Принцип метода определения активности фермента основан на ингибировании реакции аутоокисления адреналина в щелочной среде в присутствии СОД, вследствие дисмутации супероксидных анион-радикалов, которые являются продуктом одного из этапов окисления и одновременным участником его последующих стадий. Об интенсивности аутоокисления адреналина судят по нарастанию поглощения при длине волны 347 нм.

Материалы и оборудование

1.Биохимический автоматический анализатор SAPPHIRE 400

2.Внешний компьютер с пакетом специализированных программ.

3.Одноразовые пласстмассовые пробирки для образцов крови, экстрактов тканей.

4.Реагенты для определения активности СОД:

a.Бикарбонатный буфер, рН=11 (2,12 г Na2 CO3, 0,168 г NaHCO3,0,074 г динатриевой соли этидендиаминтетрауксусной кислоты растворяют в 200 мл дистиллированной воды: рН доводят до нужногозначения добавлением NaОН).

b.0,1%-й (5,46 мМ) аптечный раствор адреналина.

5.Набор из трех автоматических пипеток на 2–20 мкл, на 100–1000

мкл и а 1000 – 5000 мкл.

6.Мерные стаканы и колбы, одноразовые наконечники для пипеток.

7.Растворы кислотного и щелочного очистителей кювет.

8.Дистиллированная вода.

9.Бумага для встроенного принтера

10.Холодильник для хранения образцов и реагентов.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

482

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ НА БИОХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ

11.Одноразовые латексные перчатки.

12.Этанол-хлороформная смесь (2:1).

Порядок выполнения работы

1.Надеть одноразовые латексные перчатки. Удалить гемоглобин из образца крови. Для этого в пробирку вносят 50 мкл упакованных эритроцитов и 450 мкл дистиллированной воды. Мешающее влияние гемоглобина устраняется добавлением 250 мкл этанол-хлороформной смеси. Полученную суспензию перемешивают и центрифугируют при 8000 об/мин в течение 15 мин. Супернатант используют для определения активности СОД.

2.Проверить уровень жидкостей емкостях для кислотного и щелочного очищающего растворов. При необходимости долить.

3.Включить прибор.

4.Установить штатив с реагентами 1 и 2 на платформу для реактивов. Закрыть отсек реактивов крышкой.

5.С экрана загрузки реактивов проверить уровень раствора в картридже для определения активности СОД. При необходимости долить.

6.Установить пробирку с анализируемой пробой (супернатант, плазма, сыворотка крови, экстракт ткани) в штатив для проб. Штатив для проб поместить на соответствующую платформу.

7.Дождаться температурной стабилизации и сообщения о готовности анализатора к работе.

8.С экрана «Рабочий лист» заказать определение активности СОД в анализируемой пробе.

9.Выйти в основной экран и активировать трафарет «старт».

10.Провести определение аутоокисления адреналина в холостой (без биообразца) и опытной (с биообразцом) пробах.

11.После сигнала об окончании исследования войти в экран «Результаты» и проверить полученные значения, а также наличие или отсутствие сообщений о нештатных ситуациях.

12.Выключить прибор.

13.Штатив с реактивами поместить в холодильник.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

483

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ НА БИОХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ

14. Опорожнить канистру для отходов.

Для расчета активности супероксиддисмутазы необходимо предварительно определить содержание гемоглобина в образце крови на гематологического анализатора МЕК-6400J/К или содержание белка в биообразце. Активность СОД выражают в условных единицах на г Hb или белка (за условную единицу активности СОД принимают 50 %-е ингибирование реакции окисления адреналина).

Задание 10.6.2. Определениеактивности каталазы

Каталаза: (КФ 1.11.1.6, Н2О2: Н2О2- оксидоредуктаза, КАТ) – фермент, участвующий в детоксикации нерадикальной активной формы кислорода – пероксида водорода.

2 Н2О2→2 Н2О + О2..

Принцип метода определения активности каталазы основан на образовании окрашенного в желтый цвет комплекса неразрушенного в ходе каталазной реакции пероксида водорода с молибдатом аммония.

Материалы и оборудование

1.Биохимический автоматический анализатор SAPPHIRE 400

2.Внешний компьютер с пакетом специализированных программ.

3.Одноразовые пластмассовые пробирки для образцов крови, экстрактов тканей.

4.Реактивы для определения активности каталазы.

5.Набор из трех автоматических пипеток на 2-20 мкл, на 1001000 мкл и на 1000 – 5000 мкл.

6.Мерные стаканы и колбы, одноразовые наконечники для пипеток.

7.Растворы кислотного и щелочного очистителей кювет.

8.Дистиллированная вода.

9.Бумага для встроенного принтера.

10.Холодильник для хранения образцов и реагентов.

11.Одноразовые латексные перчатки.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

484

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ НА БИОХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ

Порядок выполнения работы

1.Надеть одноразовые латексные перчатки. Приготовить гемолизат добавлением к одному объему упакованных эритроцитов 49-ти объемов охлажденной до 0 °С дистиллированной воды.

2.Проверить уровень жидкостей емкостях для кислотного и щелочного очищающего растворов. При необходимости долить.

3.Включить прибор.

4.Установить штатив с реактивами 1 и 2 на платформу для реактивов. Закрыть отсек реактивов крышкой.

5.С экрана загрузки реактивов проверить уровень раствора в картридже для определения активности каталазы. При необходимости долить.

6.Установить пробирку с анализируемой пробой (гемолизат, плазма, сыворотка крови, экстракт ткани) в штатив для проб. Штатив для проб поместить на соответствующую платформу.

7.Дождаться температурной стабилизации и сообщения о готовности анализатора к работе.

8.С экрана «Рабочий лист» заказать определение активности каталазы

ванализируемой пробе.

9.Выйти в основной экран и активировать трафарет «старт».

10.Провести определение комплекса пероксида водорода с молибдатом аммония в холостой (без биообразца) и опытной (с биообразцом) пробах.

11.После сигнала об окончании исследования войти в экран «Результаты» и проверить полученные значения, а также наличие или отсутствие сообщений о нештатных ситуациях.

12.Выключить прибор.

13.Штатив с реактивами поместить в холодильник.

14.Опорожнить канистру для отходов.

Активность каталазы рассчитывают, используя коэффициент миллимолярной экстинкции, равный 22,2х103 мМ-1 при длине волны 400 нм.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

485

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ НА БИОХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ

Задание 10.6.3. Определениеактивности глутатион-S- трансферазы

Глутатион-S-трансфераза (КФ 2.5.1.18, донор: восстановленный глутатион трансфераза, ГST) входит в семейство ферментов, нейтрализующих токсическое влияние различных гидрофобных и электрофильных соединений путем их конъюгации с восстановленным глутатионом.

Активность глутатион-S-трансферазы определяли по скорости образования глутатион-S-конъюгатов между ГSH и 1-хлор-2,4-динитробензолом (ХДНБ). Увеличение концентрации конъюгатов в ходе реакции регистрировали при длине волны 340 нм (максимум поглощения глутатион -S- ХДНБ).

Материалы и оборудование

1.Биохимический автоматический анализатор SAPPHIRE 400

2.Внешний компьютер с пакетом специализированных программ.

3.Одноразовые пласстмассовые пробирки для образцов крови, экстрактов тканей.

4.Реагенты для определения активности глутатион-S-трансферазы.

5.Набор из трех автоматических пипеток на 2-20 мкл, на 100-1000 мкл и на 1000 – 5000 мкл.

6.Мерные стаканы и колбы, одноразовые наконечники для пипеток.

7.Растворы кислотного и щелочного очистителей кювет.

8.Дистиллированная вода.

9.Бумага для встроенного принтера.

10.Холодильник для хранения образцов и реагентов.

11.Одноразовые латексные перчатки.

12.Реагенты для определения активности глутатион-S- трансферазы:

0,1 М калий-фосфатный буфер, рН 6,5.

0,015 М раствор ГSH.

0,015 M раствор 1-хлор-2,4-динитробензола, приготовленный на метаноле.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

486

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.6. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ НА БИОХИМИЧЕСКОМ АНАЛИЗАТОРЕ

Порядок выполнения работы

1.Надеть одноразовые латексные перчатки. Приготовить гемолизат добавлением к одному объему отмытых от плазмы и упакованных эритроцитов двадцати объемов дистиллированной воды, охлажденной до 0 °С.

2.Проверить уровень жидкостей в емкостях для кислотного и щелочного очищающего растворов. При необходимости долить.

3.Включить прибор.

4.Установить штатив с реагентами 1 (смесь буфера и раствора ГSH) и 2 (раствор ХДНБ) на платформу для реактивов. Закрыть отсек реактивов крышкой.

5.С экрана загрузки реактивов проверить уровень раствора в картридже для определения активности глутатион-S-трансферазы. При необходимости долить.

6.Установить пробирку с анализируемой пробой (гемолизат, плазма, сыворотка крови, экстракт ткани) в штатив для проб. Штатив для проб поместить на соответствующую платформу.

7.Дождаться температурной стабилизации и сообщения о готовности анализатора к работе.

8.С экрана «Рабочий лист» заказать определение активности GST в анализируемой пробе.

9.Выйти в основной экран и активировать трафарет «старт».

10.После сигнала об окончании исследования войти в экран «Результаты» и проверить полученные значения, а также наличие или отсутствие сообщений о нештатных ситуациях.

11.Выключить прибор.

12.Штатив с реактивами поместить в холодильник.

13.Опорожнить канистру для отходов.

Активность фермента рассчитывают, использую коэффициент миллимолярной экстинции, равный 9,6 мМ-1*см-1для ГS-ХДНБ при длине волны 340 нм. Активность глутатион-S-трансферазы выражают в ммоль образующихся глутатион S-конъюгатов в минуту на грамм гемоглобина (г белка).

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

487

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА10.7. ВЫПОЛНЕНИЕГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХИССЛЕДОВАНИЙНА АНАЛИЗАТОРЕМЕК-6400J/К

Цель лабораторной работы

формирование навыков оператора современного гематологического анализатора МЕК-6400J/К.

Задачи лабораторной работы

знакомство с конструктивной схемой, управлением, обслуживанием анализатора, выполнение исследований, интерпретация полученных данных

Краткие теоретические сведения

Автоматизированный гематологический анализатор МЕК-6400J/К (рис. 10.16) предназначен для одновременного измерения 18 параметров (WBC – лейкоциты, RBC – эритроциты, HGB – гемоглобин, HCT – гематокрит, MCV – средний объем эритроцитов, MCH — среднее содержание гемоглобина в эритроците, MCHC – средняя концентрация гемоглобина в эритроците, PLT – тромбоциты, LY% – процентное содерержание лимфоцитов, МО% – процентное содержание моноцитов,GR% – процентное содержание гранулоцитов, LY

– абсолютное содержание лимфоцитов, МО – абсолютное содержание моноцитов, GR – абсолютное содержание гранулоцитов,RDW — ширина распределения эритроцитов, PCT – тромбокрит, MPV – средний объем тромбоцитов, PDW – ширина распределения тромбоцитов) (см. рис.10.10). Анализатор производит быстрый подсчет клеток и концентрации гемоглобина. Эти исследования входят в понятие «клинический анализ крови». Клинические анализы крови составляют более 60% всей работы диагностической лаборатории и являются самыми распространенными заказами врачейклиницистов. Это объясняется тем, что клеточный состав крови и содержание гемоглобина в эритроцитах могут изменяться при большом числе заболеваний.

Материалы и оборудование

1.Гематологический полуавтоматический анализатор МЕК-6400J/К.

2.Одноразовые пласстмассовые пробирки для образцов.

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум.Учебебное пособие

488

РАЗДЕЛ 10. СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ КЛИНИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКИ

РАБОТА 10.7. ВЫПОЛНЕНИЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ НА АНАЛИЗАТОРЕМЕК-6400J/К

3.Набор из 4 растворов.

4.Стандартная кровь с низкими значениями исследуемых показателей.

5.Стандартная кровь с нормальными значениями показателей.

6.Стандартная кровь с высокими значениями показателей.

7.Холодильник для хранения образцов и реагентов.

8.Одноразовые латексные перчатки.

9.Бумага для термопринтера.

Характеристики оборудования

Применение методов лазерной и кондуктометрической идентификации в медицине позволило автоматизировать подсчет клеток крови. Оптические способы идентификации основаны на измерении характеристик рассеивания либо на измерении угла вращения плоскости поляризованного света. Кондуктометрия означает регистрацию изменений электрического сопротивления при прохождении клеткой узкого отверстия (апертуры). Оба этих принципа используются в современных гематологических анализаторах.

Рис. 10.16. Автоматизированный гематологический анализатор МЕК-6400J/К (Nikhon Kohden, Япония)

Современные аппаратура и методы исследования биологических систем. Большой практикум. Учебебное пособие

489