всякое / furany_posobie

Анализ качества резерпина

Reserpinum – Резерпин Reserpin (ГФ Х, с. 585) l-Резерпин

С33Н40N2О9, М.в. 608,7

Описание. Белый или желтоватый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, 95 % спирте и эфире, легко растворим в хлороформе и уксусной кислоте.

Подлинность. К 1 мг препарата прибавляют 0,2 мл раствора ванилина в соляной кислоте; в течение 2 минут появляется розовое окрашивание.

1 мг препарата растворяют в 2 мл 95 % спирта, прибавляют 1 мл 0,5 н. раствора серной кислоты и 0,5 мл 0,1 н. раствора нитрита натрия; через 1–2 минуты появляется зеленая флюоресценция.

Удельное вращение от –113° до –122° (1 % раствор в хлороформе).

Оптическая плотность. 0,002 % раствор препарата в 95 %

спирте имеет максимум поглощения при длине волны 268 нм; оптическая плотность этого раствора в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 268 нм около 0,55; в интервале длин волн от 288 нм до 295 нм около 0,34.

Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата

(точная навеска) сушат при 100–105° до постоянного веса. Потеря в весе не должна превышать 1 %.

Сульфатная зола из 0,2 г препарата должна быть невесомой.

Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл безводной уксусной кислоты и титруют 0,1 н. раствором хлорной кислоты до зеленого окрашивания (индикатор кристаллический фиолетовый).

1 мл 0,1 н. раствора хлорной кислоты соответствует 0,06087 г

29

С33Н40N2О9, которого в пересчете на сухое вещество должно быть не менее 98,5 % и не более 101,0 %.

Хранение. Список А. В хорошо укупоренных банках оранжевого стекла, в прохладном, защищенном от света месте.

Высшая разовая доза внутрь 0,002 г. Высшая суточная доза внутрь 0,01 г.

Нейролептическое, гипотензивное средство.

Фармакопейный анализ резерпина

Резерпин является производным алкалоида иохимбана, включающего циклы A, B, C, D, является дважды сложным эфиром метилового эфира резерпиновой и триметоксибензойной кислоты. Атомы азота в резерпине неравноценны: азот в системе индола проявляет кислотные свойства, азот между циклами С и D – основные свойства (алкалоид).

Индол
A	B	C	Основный центр
CH3 O	N		N
			D
	H			Метокси-группы
			E	O
	CH3	O		O	CH3
			O
		O	O CH3	O	CH3
			Сложноэфирные	O CH3
			группы (2)

Подлинность

1.ИК-спектр должен соответствовать спектру сравнения резерпина или его стандарта.

2.УФ-спектр в интервале длин волн 288–295 нм с max = 268 нм (0,002 %-й спиртовой раствор).

3.Удельное вращение раствора препарата в хлороформе. Резер-

пин оптически активное соединение, содержит 6 хиральных атома углерода.

30

Химические реакции

1. Реакция конденсации с ванилином в присутствии соляной кислоты общая реакция на производные индола (электрофильное замещение).

При добавлении к резерпину раствора ванилина в соляной кислоте в течение 2 мин появляется розовое окрашивание.

2. Реакция нитрозирования раствором нитрита натрия в кислой среде – наблюдается зеленая флюоресценция.

CH3 O	N	N		HNO2			N
				H2SO4	CH3 O	N
	H		O		O=N		O
	CH3 O			O CH3
			O			O	O	O CH
	O								3
			O CH3	O CH3	H C	O	O CH	O	CH
					3		3
				O CH3				O CH	3
								3

Нефармакопейные реакции

3. Кислотный гидролиз сложноэфирных групп резерпина. Резерпин – двойной сложный эфир резерпиновой кислоты. Образуются резерпиновая, триметоксибензойная кислота и метанол.

		H2SO4	(конц.)				N		O
				CH3	O	N		+ HO	O CH3
CH3 O	N	N
						H			O CH3
	H	O				HO
	CH3 O		O CH3					OH	O CH3
		O
						O		O CH3
	O	O CH3	O CH3						+ CH3OH
		O CH3

4. Для резерпина характерны реакции окисления. С хлорной водой образуются продукты фиолетового цвета, с раствором калия перманганата – темно-сиреневого, с перекисью водорода – желто-си- реневого, с реактивом Фреде – красное окрашивание, переходящее в голубое.

5. Гидроксамовая реакция основана на наличии двух сложноэфирных групп.

6. Резерпин – алкалоид, для него возможны реакции с общеалкалоидными осадительными реактивами (пикриновая кислота, аммония рейнекат, реактив Драгендорфа и др.).

31

Чистота

1.Потеря в весе при высушивании.

2.Сульфатная зола.

3.Продукты окисления.

4.Удельное оптическое вращение.

Количественное определение

1. Ацидиметрия, неводное титрование в среде ледяной уксус-

ной кислоты.

Метод основан на слабых основных свойствах резерпина, которые усиливаются при растворении в протогенном растворителе.

Титрант – 0,1М HClO4, индикатор – кристаллический фиолето-

вый, fэкв = 1.

CH3 O	N	N
					+ HClO4
	H			O
CH3 O		O		O CH3
	O	O CH3		O CH3
				O CH3
CH3	O	N	N + H
					* ClO-4
		H		O
	CH3 O			O	O CH3
		O		O CH3	O CH3
				O CH3

Анализ качества индометацина

Indometacin – индометацин (British Pharmacopoeia 2012)

C19H16ClNO4 357.8 53-86-1

32

Action and use

Cyclo-oxygenase inhibitor; analgesic; anti-inflammatory.

Preparations

Indometacin Capsules Indometacin Suppositories

DEFINITION

Indometacin contains not less than 98.5 per cent and not more than the equivalent of 100.5 per cent of [1-(4-chlorobenzoyl)-5- methoxy-2-methylindol-3-yl]acetic acid, calculated with reference to the dried substance.

CHARACTERS

A white or yellow, crystalline powder, practically insoluble in water, sparingly soluble in alcohol.

IDENTIFICATION

First identification A, C. Second identification A, B, D, E.

A.Melting point (2.2.14): 158 °C to 162 °C.

B.Dissolve 25 mg in a mixture of 1 volume of 1 M hydrochloric acid and 9 volumes of methanol R and dilute to 100.0 ml with the same mixture of solvents. Dilute 10.0 ml of the solution to 100.0 ml with a mixture of 1 volume of 1 M hydrochloric acid and 9 volumes of methanol R. Examined between 300 nm and 350 nm (2.2.25), the solution shows an absorption maximum at 318 nm. The specific absorbance at the maximum is 170 to 190.

C.Examine by infrared absorption spectrophotometry (2.2.24), comparing with the spectrum obtained with indometacin CRS. Examine the substances in the solid state without recrystallisation.

D.Dissolve 0.1 g in 10 ml of alcohol R, heating slightly if necessary. To 0.1 ml of the solution add 2 ml of a freshly prepared mixture of 1 volume of a 250 g/l solution of hydroxylamine hydrochloride R and 3 volumes of dilute sodium hydroxide solution R. Add 2 ml of dilute hydrochloric acid R and 1 ml of ferric chloride solution R2 and mix. A vio- let-pink colour develops.

E.To 0.5 ml of the solution in alcohol prepared in identification

test D, add 0.5 ml of dimethylaminobenzaldehyde solution R2. A precipitate is formed that dissolves on shaking. Heat on a water-bath. A bluish-green colour is produced. Continue to heat for 5 min and cool in iced water for 2 min. A precipitate is formed and the colour changes to light greyish-green. Add 3 ml of alcohol R. The solution is clear and violet-pink in colour.

33

TESTS

Related substances

Examine by thin-layer chromatography (2.2.27), using silica gel HF254 R as the coating substance. Prepare the slurry using a 46.8 g/l solution of sodium dihydrogen phosphate R.

Test solution Dissolve 0.2 g of the substance to be examined in methanol R and dilute to 10 ml with the same solvent. Prepare immediately before use.

Reference solution Dilute 1 ml of the test solution to 200 ml with methanol R.

Apply separately to the plate 10 µl of each solution. Develop over a path of 15 cm using a mixture of 30 volumes of light petroleum R and 70 volumes of ether R. Allow the plate to dry in air and examine in ultraviolet light at 254 nm. Any spot in the chromatogram obtained with the test solution, apart from the principal spot, is not more intense than the spot in the chromatogram obtained with the reference solution (0.5 per cent).

Heavy metals (2.4.8)

2.0 g complies with limit test C for heavy metals (20 ppm). Prepare the standard using 4 ml of lead standard solution (10 ppm Pb) R.

Loss on drying (2.2.32)

Not more than 0.5 per cent, determined on 1.000 g by drying in an oven at 100 °C to 105 °C.

Sulphated ash (2.4.14)

Not more than 0.1 per cent, determined on 1.0 g.

ASSAY

Dissolve 0.300 g in 75 ml of acetone R, through which nitrogen R, free from carbon dioxide, has been passed for 15 min. Maintain a constant stream of nitrogen through the solution. Add 0.1 ml of phenolphthalein solution R. Titrate with 0.1 M sodium hydroxide. Carry out a blank titration.

1 ml of 0.1 M sodium hydroxide is equivalent to 35.78 mg of C19H16ClNO4.

STORAGE

Store protected from light.

IMPURITIES

A. 4-chlorobenzoic acid.

34

Фармакопейный анализ индометацина

Химическая структура									Функциональные группы
H3CO							CH2 COOH	1)	Карбоксильная группа
								2)	Амидная группа
			N				CH3	3)	Ковалентно связанный хлор
			C			O

Cl

Подлинность

1.Температура плавления.

2.УФ-спектр в интервале длин волн 300–350 нм имеет максимум при 318 нм, удельный показатель поглощения в этом максимум от 180 до 190.

3.ИК-спектр должен совпадать со спектром стандарта.

Химические реакции

1. Гидроксамовая проба на сложноэфирную группу. В присутствии гидроксиламина гидрохлорида в щелочной среде происходит аммонолиз индометацина, образуется гидроксамовая кислота (бесцветная). С FeCl3 гидроксамовая кислота образует комплексное соединение фиолетово-розового цвета.

H3CO

CH2COOH

OH

H3CO

CH2

N

CH3

NH

COOH

+ NH2OH

C

O +

CH

N

C

O

3

H

Cl

Cl

OH

O

NH

NH

3+

3

C

O

+ FeCl

3

C

O

Fe + 3HCl

Cl	Cl	3

35

2. Реакция Ван-Урка на производные индола с пара-диметил- аминобензальдегидом. Образуется осадок, который при встряхивании растворяется. Далее при нагревании на водяной бане появляется го- лубовато-зеленое окрашивание. Продолжают нагревание еще 5 мин и охлаждают в бане со льдом 2 мин. Образуется осадок, а цвет изменяется на серовато-зеленый. Далее добавляют этанол, осадок растворяется, и раствор становится прозрачным и фиолетово-розовым.

Реакция с пара-диметиламинобензальдегидом происходит как электрофильное замещение в ароматических соединениях. Для производных индола заместитель направляется в более реакционноспособное пиррольное кольцо, в положение 3 (если оно занято, в положение 2). В пиррольном кольце индометацина оба положения (2 и 3) заняты. Для таких 2,3-дизамещенных индолов реакции электрофильного замещения идут по бензольному кольцу.

H3CO	CH2COOH	O H
N	CH3	C

2	C O	+

H3C N CH3

Cl

O

ClC N

OH C						CH
3
			2

HOOC

H3CO

C

N CCl

		H
							O
		2				CH3
		C
H C N CH		COOH
3	3

Чистота

Родственные соединения определяются методом ТСХ.

Тяжелые металлы, потеря в весе при высушивании, сульфатная зола.

36

Количественное определение

Алкалиметрия, вариант нейтрализации (прямое титрование).

Метод основан на реакции нейтрализации индометацина за счет карбоксильной группы. Титрант – NaOH, индикатор – фенолфталеин.

Препарат растворяют в ацетоне и титруют в токе азота для предотвращения возможного гидролиза и окисления препарата. Необходим контрольный опыт.

H3CO

CH2 COOH

H3CO

CH2 COONa

N

CH3

+ NaOH

N

CH3

+ H2O

C

O

C

O

Cl

Cl

fэкв = 1.

37

Определение качества лекарственных средств из группы производных пиразола

Лекарственные препараты, производные пиразола

антипирин, метамизол-натрий (Анальгин), фенилбутазон (Бутадион), пропифеназон.

Производные 1,2,4-триазола – флуконазол (Дифлюкан).

Пиразол (1,2-диазол) – пятичленный гетероцикл с двумя гетероатомами азота в положении 1 и 2. Нумерация в цикле начинается от -NH- (-NH- старше =N-).

Лекарственные препараты этой группы являются производными пиразолона-5.

4			3
5		1	2		N	O					NH
									N
		N
		H							H
Пиразол							Пиразолон-5

Анализ качества антипирина (феназона)

Antipyrinum – Антипирин (ГФ Х, с. 100)

Phenazonum* 1-Фенил-2,3-диметилпиразолон-5

C11H12N2O, М. в. 188,23

Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха, слабо горького вкуса.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, хлороформе, трудно растворим в эфире.

38