ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИ Е МЕТОДЫ АНАЛИЗА: ПОНЯТИЕ И СУЩНОСТЬ
Подготовили Бутенко П.В. и Кашкарова Д.А.
Хроматография
– это метод разделения и определения веществ, основанный на распределении компонентов между двумя фазами – подвижной и неподвижной
Неподвижной (стационарной) фазой служит твердое пористое вещество или пленка жидкости, нанесенная на твердое вещество. Подвижная фаза представляет собой жидкость или газ, протекающий через неподвижную фазу,
иногда под
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИ Е МЕТОДЫ
По способу проведения процесса разделения:
• фронтальный
• вытеснительный
• элюентный
Элюентная хроматограмма, являющаяся зависимостью сигнала прибора (ось ординат) от времени или объема подвижной фазы (ось абсцисс), представляет собой совокупность пиков разделяемых компонентов. Обычно отдельный пик представляет собой гауссову кривую.
ДОСТОИНСТВ
А
ЭЛЮЕНТНОГО
МЕТОДА– дает наиболее полное разделение, поскольку зоны сорбатов разделены зонами элюента;
– сорбент непрерывно регенерируется;
– параметры удерживания хорошо воспроизводимы.
Методы
количественно го анализа
•Метод
абсолютной
калибровки
(предполагает
построение
градуировочного графика по стандартным
•Метод внутреннего стандарта (введение в анализируемый образец известного количества эталонного соединения, хроматографирован
•В методе внутренней нормализации предполагается, что пики всех возможных компонентов смеси зафиксированы на хроматограмме, и сумма их площадей (S) равна 100%.
•Различия в чувствительности детектора к разным компонентам учитывается введением поправочных коэффициентов (Ki).
ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
– МЕТОД РАЗДЕЛЕНИЯ ЛЕТУЧИХ, ТЕРМОСТАБИЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ
Достоинства газовой хроматографии:
– сравнительная простота аппаратурного оформления;
– весьма широкие границы применимости
– возможность определения с высокой точностью малых количеств газов органических соединений с высокой
– быстрточностью;та анализа;
–широкий выбор сорбентов и неподвижных фаз;
–высокая гибкость изменения условий разделения;
–возможность осуществления химических реакций в хроматографической колонке
или детекторе;
– повышение информативности при сочетании с различными инструментальными методами (масс-спектрометрией и ИК (Фурье) спектрометрией).
Газово-жидкостная хроматография
В газо-жидкостной хроматографии разделение компонентов пробы достигается за счет многократного повторения процессов распределения между движущейся газовой и неподвижной жидкой фазами.
•Скорость миграции компонентов зависит от их летучести и способности растворяться в стационарной жидкой фазе.
•В качестве носителя неподвижной фазы используют адсорбенты с поверхностью 0,5-3,0 м 2 /г и с размером пор (0,5-1,5)10-3 мм.
•По химическому составу неподвижные фазы делят на следующие классы:
-Углеводороды
-Силоксаны с радикалами различной полярности
-Эфиры простые и сложные, полиэфиры, полигликоли
-Фталаты и фосфаты
Выбор неподвижной фазы зависит от полярности разделяемых соединений и от их способности образовывать водородные связи. Для разделения полярных сорбатов необходимы полярные неподвижные фазы, неполярных – неполярные.
Хромато-масс-
спектрометрия
Общие особенности газовой хроматографии и масс-спектрометрии:
– анализ вещества проводится в газовой фазе;
– количество вещества, необходимое для одного анализа, составляет 10-6 г;
–скорости выполнения анализов в обоих методах могут быть согласованы таким
образом, что в процессе элюирования одного хроматографического пика можно измерить несколько полных массспектров.
Для понижения давления используют молекулярный сепаратор, который одним концом соединен с хроматографической колонкой, а другим с ионным источником массспектрометра. Сепаратор удаляет из газового потока, выходящего из колонки, основную часть газа-носителя, а органическое вещество пропускает в масс-спектрометр. Давление при этом понижается до рабочего давления масс-спектрометра.
Для этого используют следующие процессы массопереноса:
–эффузию через узкие поры и щели;
–диффузию в расширяющейся газовой струе;
–диффузию через полупроницаемые мембраны