Биохимические методы исследования
Биохимические методы исследования позволяют при воспалительных заболеваниях легких выявить некоторые изменения, которые не являются специфическими. Многие биохимические показатели позволяют оценить степень выраженности местной воспалительной реакции. Обычно для этого определяют белок в сыворотке крови, протеинограмму (содержание альбуминов и глобулинов, а так же их разделение на отдельные фракции), С-реактивный протеин, сиаловые кислоты, гаптоглобин, серомукоид и др.
Общий белок плазмы крови снижается на 25-40% от нормы при хронических нагноительных процессах в легких (хроническом абсцессе, бронхоэктатической болезни, эмпиема плевры). При остром абсцессе легкого общий белок плазмы увеличивается. Уровень альбумина плазмы так же снижается при большинстве острых и хронических заболеваний легких. Снижение альбумина наиболее выражено при деструктивных заболеваниях легких (абсцесс, гангрена легкого). Увеличение a-глобулинов встречается при большинстве заболеваний, но наиболее выраженное при деструктивных заболеваниях, долевых пневмониях, экссудативных плевритах. Снижение a1-глобулинов может косвенно указывать на дефицит a1-антитрипсина. Количество g-глобулинов увеличивается при деструктивных процессах. При выраженной воспалительной реакции значительно снижается отношение альбумина (А) к сумме фракций a-глобулинов, т.е. А : (a1+a2). С-реактивный протеин увеличивается при большинстве заболеваний, поражающих бронхолегочный аппарат. Степень его увеличения обычно пропорциональна степени выраженности воспалительной реакции (обозначается знаками +). Минимальное его количество обозначается (+), а максимальное (++++). Максимальное увеличение С-реактивного протеина характерно для острых деструктивных процессов. Уровень серомукоида повышается незначительно при бронхите (чаще при хроническом) и может многократно увеличиваться при заболеваниях, сопровождающихся деструкцией легочной ткани. Сиаловые кислоты и гликопротеид гаптоглобин реагируют на воспаление бронхолегочного аппарата так же, как и серомукоид (наибольшее увеличение при деструктивных процессах). Нормальный уровень рассмотренных биохимических показателей представлен в приложении 2. Реже используются другие показатели выраженности воспалительной реакции организма: церулоплазмин, лизоцим, лактатдегидрогеназа (ЛДГ).
Большинство биохимических методов исследования предназначены для оценки:
степени выраженности воспаления;
эффективности назначаемой противовоспалительной терапии;
прогнозирования исхода заболевания.
Однако некоторые биохимические методы исследования имеют важное диагностическое значение. К ним можно отнести оценку общей антитрипсической активности в сыворотке крови. Т.к. общая активность в основном (на 75-90%) определяется активностью a1-антитрипсина, то это является важным критерием диагностики первичной эмфиземы легких. Существуют так же методики, позволяющие определить нарушение баланса в системе «протеазы - ингибиторы протеаз», но пока являются малораспространенными из-за трудоемкости и дороговизны. Пока нет надежного неинвазивного метода исследования поверхностно активных веществ легких - сурфактантов.
Микробиологические методы исследования.Для заболеваний, имеющих инфекционное происхождение, определение инфекционного агента, вызвавшего заболевание, является решающим фактором в выборе антибактериальной терапии, наблюдении за динамикой патологического процесса и прогнозировании его исхода. Роль инфекции в возникновении таких заболеваний как пневмония, абсцесс и гангрена легкого, туберкулез, грибковое поражение и других общепризнанна. Выявить микроорганизм, вызвавший заболевание можно несколькими способами. Микробиологический способ позволяет вывить сам микроорганизм, определить его чувствительность к антибиотикам и т.д. Косвенно можно определить микроорганизм по антигенам и антителам, вырабатываемым на эти антигены. Этот метод достаточно точен, но он имеет существенный недостаток: невозможно определить чувствительность микроорганизма к антибиотикам. Эффективность микробиологических исследований зависит от:
·своевременного (как можно более раннего) получения материала для исследования;
·от качества полученного материала;
·специфичности и чувствительности методов выделения микроорганизмов;
·точности идентификации выделенных микроорганизмов;
·этиологической значимости выделенного микроорганизма (выделенный микроорганизм не всегда является причиной патологического процесса).
Для микробиологического исследования используется:
мокрота;
плевральная жидкость;
кровь (бактериемия выявляется у 20-30% детей в первые дни острой пневмонии; реже у взрослых);
материал, полученный из патологического очага (например, при бронхоскопии или при трансторакальной пункции);
трахеобронхиальный смыв;
жидкость, полученная при бронхоальвеолярном лаваже, и др.
Работа с любым материалом имеет свои особенности. Например, мокроту легко получить, но при этом неизбежно попадание в мокроту флоры полости рта. Примесь флоры минимальна или практически отсутствует при трудоемких способах получения материала (см. последние 3 пункта). Если причиной патологического процесса является анаэробная инфекция, то необходимо сохранить анаэробные условия, как во время получения материала, так и при дальнейшей работе с ним. Кроме этого важен правильный выбор питательных сред, сроков и условий культивирования и др. Для эффективного микробиологического исследования важно получить исследуемый материал до начала антибактериальной терапии.
Вирусологические методы исследования. Некоторые вирусы являются частой причиной возникновения острых и хронических респираторных заболеваний. Часто используется прямая и непрямая флюоресценция. Это метод позволяет быстро (в течение нескольких часов) определить фрагменты вирусов в клетках исследуемого материала. Однако по иммунофлюоресценции невозможно оценить давность и степень активности инфекционного процесса. В определенной степени это позволяет сделать серологический метод. Учитывая, что серологический метод основан на определении и динамике уровня специфических антител, то он, фактически, является методом ретроспективной диагностики вирусной инфекции. Относительно новым и чрезвычайно чувствительным методом выявления различных микроорганизмов (в том числе и вирусов) является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Так же, как и в микробиологической диагностике, при выделении вирусов важно правильно выбрать:
способ изоляции и культивирования вирусов (клеточная культура, лабораторное животное, куриный эмбрион);
оптимальные условия культивирования (температура, рН среды, частота пересевов и др.);
идентификация вирусов с помощью специальных реакций и др.