5. Питательные среды, их классификация по составу, консистенции и назначению. Требования к питательным средам.

Питательные среды — это субстраты, состоящие из компонентов, обеспечивающих необходимые условия для культивирования микроорганизмов или накопления продуктов их жизнедеятельности.

Требования, предъявляемые к питательным средам:

- должны содержать все необходимые для роста и размножения компоненты в оптимальных соотношениях;

- иметь достаточную влажность;

- иметь оптимальное значение рН;

- должны быть изотоническими для клеток микроорганизмов

- обладать определенным окислительно-восстановительным потенциалом;

- должны быть стерильными.

Классификация питательных сред

По составу:

-естественные- изготавливают из натуральных продуктов животного или растительного происхождения. Такие среды не имеют строго определённого химического состава (молоко, желчь, сыворотка крови, куриные эмбрионы)

-искусственные- изготавливают из отваров, экстрактов животного или растительного сырья с добавлением различных неорганических компонентов, таких как соли, углеводы, азотистые вещества

(МПБ (мясо-пептонный бульон),МПА(мясо-пептонный агар))

-синтетические- содержат строго определенный химический состав в точно указанных концентрациях, используют для накопления биомассы клеток и метаболитов клетки

(среда Чапика(для выращивания грибов), селективные среды для выявления Xanthomonas sp.)

По консистенции:

-жидкие применяются для изучения физиолого-биохимических особенностей микроорганизмов, для накопления биомассы и продуктов метаболизма в промышленности и в лабораторных условиях. Чтобы из жидкой среды получить твёрдую нужно добавить уплотнитель-агар-агар(комплекс полисахаридов из водорослей )

(МПБ, пептонная вода, молочная сыворотка)

-полужидкие для хранения культур

-плотные применяются для выделения чистых культур микроорганизмов, изучения морфологии колоний, количественного учёта

Почему агар-агар? его не используют микроорганизмы, может многократно расплавляться (при 100 плавится, при 45 застывает) и не изменять своих свойств

(МПА, среда Эндо)

-сыпучие используют для хранения посевного материала и культур продуцентов, антибиотиков, выращивания продуцентов ферментов, используется в промышленности

(разваренные пшено и ячмень, активированный уголь, кварцевый песок)

Сейчас используются ограниченно

По назначению:

-универсальные (простые, основные) используют для культивирования большинства микроорганизмов

МПА, МПБ для бактерий; жидкое сусло, сусло-агар, среда Сабуро- для грибов

-специальные используются для выделение и культивирования определённых групп микроорганизмов, которые как правило не растут на простых питательных средах (культивирование патогенных микроорганизмов)

Сыворотка крови для культивирования стрептококков, МПБ с глюкозой, среда Чапека для грибов

-элективные(избирательные) используют при выделении определённого вида бактерий из мест его естественного обитания или для получения накопительных культур

В образце его может быть очень мало, поэтому используются среды специальные для выведения определённых микроорганизмов, то есть создаются условия, когда выделяемый организм растёт, а рост других подавлен. Для этого используют различные красители, соли, антибиотики, которые задерживают рост чувствительных бактерий

Щелочной агар и бульон для культивирования холерного вибриона (кишечные бактерии в таких условиях не вырастают), среды с добавлением антибиотиков, или ингибиторов роста определенных групп бактерий, малахитово-зелёные подавляет рост Грам положительных бактерий (энтеробактерии хорошо растут)

-дифференциально-диагностические применяют для изучения биохимических свойств, для дифференциации одного вида микроорганизма от другого по характеру их ферментативной активности

(среда Эндо, жидкая среда с реактивом Андере, среда Левина)

Среда Эндо-состав пептон, лактоза, индикатор(основной фуксин обесцвеченный сульфитом натрия), бледно-розовый оттенок, при росте на этой среде эшерихия коли, которая имеет фермент, расщепляющий лактозу, соответственно будет расщеплять этот сахар с образованием кислых продуктов-ацетальдегида, меняется рН среды, происходит взаимодействие с сульфитом натрия, высвобождается краситель, меняется цвет индикатора, в результате при культивировании образуются малиново-красные колонии с металлическим блеском, остальные лактозоотрицательные не только кишечные палочки, но и шигеллы, сальмонеллы будут расти на чашке Петри в виде бледных колоний.