Иллюстрационное пособие по бактериологии

111

вырабатывается стойкий гуморальный иммунитет, повторные случаи заболевания почти не наблюдаются.

Для лабораторной диагностики менингококковой инфекции в зависимости от формы заболевания отбирают носоглоточную слизь (от больных и носителей), ликвор, кровь, соскоб из элементов геморрагической сыпи на коже и др.

Носоглоточную слизь берут специальным изогнутым тампоном с задней стенки глотки (рисунок 2.21).

Рисунок 2.21 - Отбор носоглоточной слизи. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

После отбора слизь засевают на сывороточный агар непосредственно у постели больного или тампон помещают в транспортную среду для доставки в лабораторию.

При гнойном менингите основным исследуемым материалом является ликвор, который берут в день госпитализации больного в количестве 2-5 мл (рисунок 2.22).

Рисунок 2.22 - Отбор спинномозговой жидкости. Заимствовано из Интернетресурсов.

Спинномозговую жидкость (СМЖ), кровь собирают в стерильные пробирки и сразу же высевают на питательные среды или же немедленно направляют в лабораторию, соблюдая температурный режим доставки материала (в термоконтейнере при температуре 37ОС). При гнойном менингите ликвор мутный

(рисунок 2.23).

112

Рисунок 2.23 - Внешний вид ликвора при гнойном менингите. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

При лабораторной диагностике менингококковой инфекции применяют бактериоскопический, бактериологический (культуральный) и серологический методы.

Бактериоскопический метод. Носоглоточная слизь микроскопически не исследуется, так как в ней присутствуют условно-патогенные нейссерии, морфологически сходные с менингококками.

Ликвор центрифугируют при 3500 об/мин в течение 5 минут, а затем из осадка готовят мазки, которые окрашивают по Граму в модификации Калины (использование спиртового раствора бриллиантовой зелени перед фиксированием препарата) или водно-спиртовым раствором метиленового синего. Микроскопируют с иммерсией под большим увеличением. Выявление в мазках грамотрицательных диплококков бобовидной формы, окруженных капсулой, позволяет предположить менингококковую природу заболевания. Менингококки располагаются свободно и в цитоплазме фагоцитов.

Для микроскопического исследования крови готовят препарат “толстой капли”, который высушивают и окрашивают водно-спиртовым раствором метиленового синего без предварительной фиксации. При микроскопии с иммерсией выявляются бактерии типичной морфологии, окруженные капсулой в виде бесцветного ореола.

Трупный материал исследуют только бактериоскопическим методом из-за низкой жизнеспособности менингококка.

Бактериологическое (культуральное) исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка. По-возможности посев материала производят у постели больного. Бактериологическому исследованию подвергают носоглоточную слизь, кровь и ликвор. Посев материала для получения чистой культуры производят на плотные или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку крови, кровь или асцитическую жидкость. Посевы инкубируют в течение 18-24 часов при 37°С в атмосфере углекислого газа (8-10%). Идентификацию выделенной культуры проводят на основании следующих свойств:

-продукция оксидазы;

-ферментация глюкозы и мальтозы до кислоты;

-принадлежность к серогруппам в реакции агглютинации.

113

Серологические методы используют для обнаружения бактериальных антигенов в исследуемых материалах или антител в сыворотке крови. Для обнаружения антигенов применяют реакцию латекс-агглютинации, встречный иммуноэлектрофорез (ВИЭФ), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) и другие методы.

Наиболее простым является метод латекс-агглютинации, позволяющий в течение 15 минут установить наличие или отсутствие специфических антигенов. Для латекс-агглютинации используют коммерческие наборы (рисунок 2.24).

Рисунок 2.24 – Набор для латекс-агглютинации менингококков. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

ВИЭФ является экспресс-методом, так как позволяет с помощью специфических антисывороток выявлять полисахаридный антиген возбудителя в СМЖ и в сыворотке крови больного.

РНГА является дополнительным методом лабораторного подтверждения генерализованной менингококковой инфекции и позволяет выявлять специфические антитела. Для получения достоверного результата исследуют парные сыворотки крови, полученные в динамике (в первые сутки заболевания и на 10-12 день).

У больных менингококковой инфекцией антитела обнаруживаются с конца первой недели болезни, достигая максимума на 2-3 неделе, а затем их титр снижается. В разгар менингококковой инфекции повышается уровень IgМ, особенно при генерализованных формах; в период реконвалесценции выявляются IgG.

Лечение. Для лечения менингококковой инфекции используют антибиотики. Наиболее эффективными являются бензилпенициллин, полусинтетические пенициллины (ампициллин, оксациллин), левомицетин, рифампицин. Антимикробную терапию сочетают с симптоматическими средствами. Для предотвращения отека головного мозга назначают диуретики.

Неспецифическая профилактика менингококковой инфекции заключается

ввыполнении следующих мероприятий:

-изолирование и лечение больного;

-выявление и санирование бактерионосителей;

-разобщение детских коллективов;

-проведение текущей дезинфекции в очаге заболевания.

114

Выявление носителей в окружении больного проводится бактериологическим исследованием носоглоточной слизи. Выявленных носителей санируют антибиотиками.

Для создания пассивного иммунитета детям дошкольного возраста вводят однократно иммуноглобулин в дозе 1,5-3,0 мл не позднее 7 дня после регистрации в коллективе первого случая заболевания. Профилактический эффект иммуноглобулина сохраняется в течение нескольких месяцев после введения.

Для активной специфической профилактики менингококковой инфекции используют три типа вакцин. Вначале были разработаны полисахаридные вакцины, которые бывают двухвалентными (группы А и С), трехвалентными (группы А, С и W) и четырехвалентными (группы А, С, Y и W135). В России для вакцинации групп риска используют менингококковую вакцины против бактерий серогрупп А и С (бивакцина) или группы А (рисунок 2.25).

Рисунок 2.25 - Менингококковые вакцины. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Примером четырехвалентной полисахаридной вакцины является Менцевакс ACWY, в состав которой входят очищенные полисахариды менингококков серогрупп A, C, W135 и Y.

Второй тип препаратов представляли вакцины, применяемые против бактерий группы В. Полисахаридные вакцины против менингококков группы В разработать невозможно из-за антигенной мимикрии (сходства) антигенов микробов с полисахаридами нервных тканей человека. Поэтому вакцины против бактерий группы В содержат наружный белок мембраны и предназначаются для профилактики заболеваний, вызванных конкретными штаммами. Такие вакцины использовались на Кубе, в Норвегии.

Однако полисахаридные менингококковые вакцины не обладают защитным эффектом у детей до 2 лет, а длительность вызываемого иммунитета у более старших лиц не превышает 3 лет.

Третий тип вакцин – это конъюгированные вакцины, в которых менингококковые капсульные полисахариды соединены с дифтерийным или столбнячным анатоксином. Конъюгированные вакцины вызывают Т-зависимый иммунный ответ с развитием иммунологической памяти. К числу конъюгированных менингококковых вакцин относятся вакцины Менактра и Менюгейт. Менактра – это четырехвалентная менингококковая вакцина, содержащая полисахариды серогрупп A, C, W135 и Y, индивидуально конъюгированные с очищенным дифтерийным анатоксином. Эта вакцина может использоваться с 9-месячного возраста. Менюгейт содержит олигосахарид менингококка серогруппы С, конъюгированный с белком CRM197 нетоксигенного модифицированного штамма дифтерийного микроба (рисунок 2.26).

115

Рисунок 2.26 – Конъюгированные менингококковые вакцины. Заимствовано из Интернет-ресурсов.

При возникновении хотя бы одного случая менингококковой инфекции в замкнутом коллективе возможно проведение экстренной профилактики с использованием антибиотиков (экстренная антибиотикопрофилактика).

Вопросы для контроля усвоения материала

1.Таксономическое положение, морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства менингококков.

2.Факторы патогенности менингококков и патогенез менингококковой инфекции.

3.Эпидемиология и клиника менингококковой инфекции.

4.Принципы профилактики и лечения менингококковой инфекции.

Тренировочные тесты

1.Менингококки относятся к роду (один правильный ответ):

1.1 Clostridium

1.2 Klebsiella

1.3 Neisseria

1.4 Staphylococcus

1.5 Bacteroides

2.Для менингококков характерно (один правильный ответ): 2.1 грамположительная окраска 2.2 грамотрицательная окраска 2.3 спорообразование 2.4 подвижность 2.5 синтез экзотоксина

3.По морфологии менингококки являются (один правильный ответ): 3.1 грамнегативными палочками 3.2 грамнегативными кокками 3.3 грампозитивными кокками

3.4 грампозитивными спорообразующими палочками

3.5 грампозитивными неспорообразующими палочками

4.Характерные признаки менингококков (один правильный ответ):

116

4.1диплококки

4.2тетракокки

4.3подвижные

4.4положительная окраска по Граму

4.5расположение цепочкой

5.Питательные среды для культивирования менингококков (несколько правильных ответов):

5.1 агар Эндо

5.2 среда Плоскирева

5.3 кровяной агар

5.4 сывороточный агар

5.5 висмут-сульфитный агар

6.Для менингококков характерно (несколько правильных ответов):

6.1облигатные аэробы

6.2облигатные анаэробы

6.3факультативные анаэробы

6.4капнофилы

6.5микроаэрофилы

7.Факторы патогенности Neisseria meningitidis (несколько правильных ответов): 7.1 тейхоевые и липотейхоевые кислоты 7.2 экзотоксин 7.3 полисахаридная капсула 7.4 холероген 7.5 пили

8.Факторами патогенности менингококков являются (несколько правильных ответов):

8.1 жгутики

8.2 белки наружной мембраны

8.3 экзотоксин

8.4 протеаза

8.5 нейраминидаза

9.Источником менингококковой инфекции являются (несколько правильных ответов):

9.1 инфицированные продукты питания

9.2 предметы обихода

9.3 больные люди

9.4 бактерионосители

9.5 медицинский инструментарий

10.Заболевания, вызываемые Neisseria meningitidis (несколько правильных ответов): 10.1 назофарингит

117

10.2энтероколит

10.3бактериальный менингит

10.4гепатит

10.5скарлатина

11.Источник инфекции при менингите (несколько правильных ответов): 11.1 вода

11.2 здоровые бактерионосители

11.3 больные генерализованными формами

11.4 больные назофарингитом

11.5 почва

12.Механизм передачи менингококковой инфекции (один правильный ответ): 12.1 фекально-оральный 12.2 аэрогенный 12.3 вертикальный 12.4 контактный

12.5 артифициальный

13.Путь передачи менингококковой инфекции (один правильный ответ):

13.1водный

13.2пищевой

13.3воздушно-капельный

13.4трансплацентарный

13.5инъекционный

14.Входные ворота менингококковой инфекции (один правильный ответ): 14.1 слизистая мочеполового тракта 14.2 слизистая оболочка носоглотки 14.3 кожные покровы 14.4 кишечник 14.5 раневая поверхность

15.К генерализованным формам менингококковой инфекции относятся (несколько правильных ответов):

15.1 бактерионосительство

15.2 менингококцемия

15.3 менингит

15.4 назофарингит

15.5 пневмония

16.К локализованным формам менингококковой инфекции относятся (несколько правильных ответов):

16.1 бактерионосительство

16.2 менингококцемия

16.3 менингит

118

16.4назофарингит

16.5пневмония

17.Материал для бактериоскопической диагностики менингококковой инфекции (несколько правильных ответов):

17.1 слизь из носоглотки

17.2 кровь

17.3 ликвор

17.4 испражнения

17.5 моча

18.При микробиологической диагностике менингококковой инфекции используют методы (несколько правильных ответов):

18.1 микроскопический

18.2 культуральный

18.3 серологический

18.4 аллергический

18.5 биологический

19.Основной метод микробиологической диагностики менингококкового назофарингита (один правильный ответ):

19.1 микроскопический

19.2 культуральный

19.3 серологический

19.4 аллергический

19.5 биологический

20.Для диагностики менингококковой инфекции используются методы (несколько правильных ответов):

20.1 культуральный

20.2 биологический

20.3 аллергический

20.4 латекс-агглютинации

20.5 метод микрокультур (метод Прайса)

21.Для выделения менингококков из ликвора используют (один правильный ответ): 21.1 среду Плоскирева 21.2 сывороточный агар 21.3 среду Эндо 21.4 среду Левина

21.5 висмут-сульфитный агар

22.При микроскопии мазков, приготовленных из ликвора больного менингитом, обнаруживаются (один правильный ответ):

22.1 грамотрицательные диплококки

22.2 грамположительные диплококки

119

22.3грамотрицательные палочки в цепочке

22.4грамположительные палочки

22.5извитые бактерии

23.Препараты специфической профилактики менингококковой инфекции (один правильный ответ):

23.1 вакцины

23.2 антибиотики

23.3 пребиотики

23.4 пробиотики

23.5 диагностикумы

24.После генерализованных форм менингококковой инфекции формируется иммунитет (несколько правильных ответов):

24.1 длительный напряженный преимущественно гуморальный

24.2 длительный напряженный преимущественно клеточный

24.3 нестерильный

24.4 антибактериальный

24.5 антитоксический

Правильные ответы: 1.3; 2.2; 3.2; 4.1; 5.3, 5.4; 6.1, 6.4; 7.3, 7.5; 8.2, 8.4, 8.5; 9.3, 9.4;

10.1, 10.3; 11.2, 11.3, 11.4; 12.2; 13.3; 14.2; 15.2, 15.3; 16.1, 16.4; 17.1, 17.2, 17.3; 18.1, 18.2, 18.3; 19.2; 20.1, 20.4; 21.2; 22.1; 23.1; 24.1, 24.4.

120

2.2. Гонококки

Гонококковая инфекция (гонорея) - это инфекционное заболевание человека, вызываемое Neisseria gonorrhoeae, которое передается половым путем и характеризуется гнойным воспалением слизистой оболочки мочеполовых путей (гонорея), конъюнктивы глаз (бленнорея) или других органов.

N. gonorrhoeae относится к типу Proteobacteria, классу Betaproteobacteria, порядку Neisseriales, семейству Neisseriaceae, роду Neisseria.

Возбудитель гонореи был открыт А. Нейссером в 1879 г. Этиологическую роль N. gonorrhoeae в развитии гонореи доказал в 1885 г. немецкий акушергинеколог Э. Бумм (рисунок 2.27).

Рисунок 2.27 - Эрнст Бумм (Ernst Bumm, 1858 – 1925 гг.). Заимствовано из Интернет-ресурсов.

Морфологические и тинкториальные свойства. Гонококки представляют собой неподвижные диплококки размером 1,25÷1,0x0,7÷0,8 мкм. Они хорошо окрашиваются анилиновыми красителями (метиленовым синим, бриллиантовым зеленым и др.). По Граму окрашиваются в розовый цвет, то есть являются грамотрицательными (рисунок 2.28).

а б Рисунок 2.28 - Гонококки, форма клеток, компьютерная визуализация (а) и окраска

по Граму (б). Заимствовано из Интернет-ресурсов.