2 курс / Микробиология 1 кафедра / Микра 6

2.Экспресс – диагностика:

•РИФ (прямая);

•реакция иммобилизации вибрионов (РИВ) – утрата подвижности возбудите-

лей в присутствии диагностических сывороток (О1 или О139).

3.Молекулярно-биологический: ПЦР (для определения гена, кодирую-

щего синтез экзоэнтеротоксина).

Лечение холеры основано на восстановлении водно-солевого баланса с незамедлительным введением специальных солевых растворов и антибиотико-

терапии.

Специфическая профилактика холеры: вакцины пероральные, содер-

жащие убитые холерные вибрионы О1 серогруппы.

2. Микробиологическая характеристика вибриозов.

Вибриозы – это заболевания, вызываемые представителями рода Vibrio.

Возбудителями вибриозов являются вибрионы различных серогрупп (кроме О1

и О139), а также галофильные вибрионы (12 видов), обитающие в морской во-

де. Название этих микробов отражает их способность размножаться только в присутствии высокой концентрации NaCl (hals – соль, philus – любить).

Из галофильных вибрионов наибольшее медицинское значение имеют

V.parahaemolyticus и V.vulnificus.

Источники инфекции: морские гидробионты (моллюски, крабы, рыбы,

устрицы).

43

Пути заражения: алиментарный – при употреблении сырых или слабо термически обработанных гидробионтов, контактный – при попадании в рану

инфицированной морской воды.

Клинические формы заболевания:

1.Гастроэнтериты (возбудитель V.parahaemolyticus).

2.Сепсис (возбудитель V.vulnificus).

3.Раневая инфекция (возбудитель V.vulnificus).

Основной метод диагностики вибриозов: бактериологический.

3. Характеристика возбудителей псевдотуберкулеза и кишечного иерсини-

оза. Микробиологическая диагностика.

В семействе энтеробактерий к роду Yersinia относят 15 видов, из них пато-

генны для человека 3 вида: Y.pestis (см. учебно-методическое пособие «Пато-

генные кокки и грамотрицательные бактерии. Возбудители зоонозов»),

Y.pseudotuberculosis и Y.enterocolitica.

Возбудители псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза

Морфология: мелкие, грамотрицательные палочки с биполярным окра-

шиванием, перитрихи, в организме образуют капсулу.

Чистая культура иерсиний.

Культуральные свойства: температурный оптимум 280С; хорошо растут на простых питательных средах и среде Эндо.

44

Антигенная структура:

−О-антиген;

−Н-антиген.

Факторы патогенности:

1.Адгезины (pili, белок наружной мембраны);

2.Капсула;

3.Инвазины (белки, обеспечивающие трансцитоз через слизистую кишеч-

ника);

4.Цитотоксин, энтеротоксин;

5.Плазмиды (кодируют адгезивные и инвазивные свойства).

Y.pseudotuberculosis – возбудитель псевдотуберкулеза.

Источники инфекции: грызуны, дикие и домашние животные, птицы,

выделяющие микроорганизмы с испражнениями. Возбудители накапливаются в почве и воде.

Путь заражения: алиментарный – через овощи и воду. В овощах (мор-

ковь, капуста, зеленый лук) иерсинии размножаются и накапливаются даже в условиях хранения при температуре +40С. Характерны сезонные подъемы забо-

леваемости (февраль-март).

Клиника: острый гастроэнтерит, брыжеечный лимфаденит (псевдоаппен-

дицит), артриты.

Y.enterocolitica – возбудитель кишечного иерсиниоза.

Источники инфекции: домашние (свиньи и др.) и дикие животные, гры-

зуны, больной человек.

Путь заражения: алиментарный – через мясо, молоко, воду.

Y.enterocolitica может быть причиной внутрибольничной инфекции.

Клиника: энтероколит с продолжительной диареей (до нескольких меся-

цев), возможно развитие сепсиса, артрита.

Материал на исследование: фекалии, кровь, суставная жидкость.

45

Микробиологическая диагностика.

1.Молекулярно-биологический метод: ПЦР.

2.Бактериологический метод.

3.Серологический метод имеет значение для эпидемиологической рас-

шифровки заболеваемости, т.к. антитела в диагностически значимых количествах появляются у больных на 2-й неделе заболевания.

4. Этиологическая структура пищевых отравлений. Микробиологическая

диагностика пищевых отравлений бактериальной природы.

Пищевые отравления – острые кишечные инфекции. Для их возникнове-

ния необходимым условием является предварительное попадание, размножение и накопление микроорганизмов в пищевых продуктах. К возбудителям относят обширную группу грамотрицательных бактерий (энтеробактерии, вибрионы,

кампилобактерии и др.), а также представителей грампозитивной микрофлоры

(стафилококки, бациллы, клостридии и др.).

Характерные признаки пищевых отравлений:

1)больной человек не является источником инфекции для окружающих;

2)короткий инкубационный период, острое начало;

3)короткое течение с преимущественным поражением желудочно-

кишечного тракта (за исключением ботулизма) и соответствующими симптомами заболевания: тошнота, рвота, резкие боли в животе, диарея;

4)групповой характер заболевания;

Пищевые отравления микробной природы подразделяются:

1.Пищевые токсикоинфекции – возникают в результате размножения и накопления бактерий в пищевых продуктах. Важным условием развития клиники пищевого отравления является массивная обсемененность пищевых продуктов микроорганизмами (более 105 КОЕ в 1 г или 1 мл). Возбудителями заболеваний являются различные виды условно-патогенных энтеробактерий

46

(кишечные палочки, протеи, сальмонеллы, кроме возбудителей брюшного

тифа и паратифов), галофильные вибрионы, энтерококки и др.

2.Пищевые интоксикации – при накоплении в пищевых продуктах экзоток-

синов бактерий (S.aureus, C.botulinum, C.perfringens и др.) и микотоксинов микроскопических грибов (Aspergillus, Fusarium и др.).

3.Смешанные пищевые отравления.

Материал на исследование: промывные воды желудка, рвотные массы,

фекалии, остатки пищевых продуктов (для эпидемиологического расследова-

ния).

Микробиологическая диагностика: бактериологический метод.

При подозрении на пищевую интоксикацию необходимо определение со-

ответствующего экзотоксина.

ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА

1.Световая микроскопия препаратов из чистых культур V.cholerae, окрашенных по Граму.

2.Изучение схемы бактериологического исследования фекалий больного с клиническим диагнозом холера при круглосуточном режиме работы лаборатории.

I этап исследования.

Посев фекалий больного на 1% пептонную воду (1-й пептон) и щелочной агар. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

II этап исследования (через 6 часов).

При наличии возбудителя в исследуемом материале, в 1-м пептоне образуется нежная пленка. Пересев с 1-го пептона на 2-й пептон и щелочной агар. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

III этап исследования (через 6 часов).

Пересев со 2-го пептона на щелочной агар. Посевы ставят в термостат на 24 часа при температуре 370С.

47

-аллергологический

78.Продукты, с которыми может быть связано заражение V.parahaemolyticus

-яйцепродукты, мясные продукты

-кондитерские изделия, овощные салаты

+ моллюски, сырая и вяленая морская рыба

-молочные продукты, фрукты

79.Галофильные вибрионы вызывают

-брыжеечный лимфаденит, артрит

-холеру

+раневую инфекцию, сепсис, гастроэнтерит - менингит, пиелонефрит

80.Основной метод микробиологической диагностики вибриозов - бактериоскопический

+бактериологический

-серологический

-аллергологический

81.Клинические формы псевдотуберкулеза

-менингит, менингоэнцефалит

-пневмония, пиелонефрит

+	гастроэнтерит, брыжеечный лимфаденит, артрит
-	раневая инфекция, септикопиемия
82.	Степень обсемененности пищевых продуктов бактериями, при которой возникают
	пищевые токсикоинфекции
-	>101	в 1 мл (г) пищевого продукта
-	>102	в 1 мл (г) пищевого продукта
-	>104	в 1 мл (г) пищевого продукта
+	>105	в 1 мл (г) пищевого продукта
83.	Материал от больного при пищевом отравлении
-	биоптаты желудка, кровь
+	промывные воды желудка, рвотные массы, фекалии
-	моча, суставная жидкость
-	мазок со слизистой оболочки ротоглотки, ликвор
84.	Основной метод диагностики пищевых отравлений

-бактериоскопический

-аллергологический

+	бактериологический
-	серологический

Ситуационные задачи:

1.При бактериологическом исследовании фекалий больного с подозрением на эшерихиоз были выделены ЕТЕС. Каков механизм патогенного действия диареегенных E.coli данной категории?

2.Больная 26 лет жалуется на частое болезненное мочеиспускание, боли внизу живота, повышенную температуру. Эти симптомы повторяются 3-4 раза в год. При бактериологическом исследовании мочи на среде Эндо – лактозопозитив-

59

ные колонии, при микроскопическом исследовании – грамотрицательные палочки средних размеров. Какой микроорганизм можно предположить? Латинское название. Какое заболевание у пациентки?

3.При посеве мокроты на МПА были обнаружены крупные слизистые колонии, а при микроскопии мазков – грамотрицательные палочки с капсулой. Ваши предположения о выделенных возбудителях? Какие заболевания могут вызывать эти микроорганизмы?

4.В инфекционное отделение доставлен больной с подозрением на брюшной тиф. Из данных анамнеза болеет более 10 дней. Укажите материал на исследование и методы диагностики.

5.Из крови больного с подозрением на брюшной тиф выделена культура лактозонегативных грамотрицательных палочек средних размеров. Какие признаки необходимо изучить для идентификации выделенной культуры?

6.У больного в день прилета из Гоа жалобы на частый жидкий стул (до 25 раз в сутки), рвоту фонтаном. Ваш предварительный диагноз, латинское название возбудителя, материал на исследование, методы экспресс-диагностики.

7.Одной из особенностей брюшного тифа является высокий процент бактерионосительства. Назовите контингенты населения, которые подлежат обязательному обследованию для выявления брюшнотифозного бактерионосительства, материал на исследование и методы диагностики.

8.Больной жалуется на боли в животе, жидкий стул с примесью крови, ложные позывы к дефекации. Ваш предполагаемый диагноз, материал на исследование, методы диагностики.

9.При проведении гастроскопии больному с жалобами на боли в эпигастральной области обнаружен язвенный дефект в пилорическом отделе желудка. Ваш предполагаемый диагноз. Какой микроорганизм причастен к данной патологии, материал на исследование, наиболее результативные методы диагностики?

10.У ребенка 4 лет жалобы на диарею, боли в животе и температуру. Участковый педиатр обратил внимание на ежедневный контакт ребенка со щенком лабрадора. Ваш предполагаемый диагноз, латинское название возбудителя, материал на исследование, методы диагностики.

11.В инфекционное отделение доставлен больной с жалобами на частый (10 раз в день) жидкий стул, рвоту. Больной связывает свое состояние с употреблением

60

в пищу морепродуктов. Ваш предполагаемый диагноз, латинское название возбудителя, материал на исследование, метод диагностики.

12.Больной доставлен в инфекционное отделение с симптомами пищевого отравления (рвота, диарея, боли в животе). Нужна ли изоляция пациента для предотвращения заражения других больных? Какие признаки характерны для пищевых отравлений?

13.Пациент А., 40 лет. При микробиологическом исследовании фекалий выделены:

	Микроорганизмы	Норма	Результат (КОЕ/г)
		(взрослые, КОЕ/г)
	Бифидобактерии	109-1010	104
	Лактобактерии	107-108	108
	Бактероиды	109-1010	109
	Фузобактерии	108-109	108
	Эубактерии	109-1010	109
	Пептострептококки	109-1010	109
	Клостридии	≤105	104
	E.coli типичные	107-108	107
	E.coli лактозонегативные	<105	0
	E.coli гемолитические	0	0
	Другие энтеробактерии*	<104	104
	Неферментирующие бактерии**	≤104	102
	Энтерококки	105-108	107
	Стафилококки коагулазонегативные	≤104	104
	Стафилококки золотистые	0	0
	Грибы рода Candida	≤104	104

Примечание: * – представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.; ** – Pseudomonas, Acinetobacter и др.

Что необходимо назначить пациенту для коррекции выявленных количественных сдвигов кишечной микробиоты?

61

14. Пациент Б., 35 лет. При микробиологическом исследовании фекалий выделены:

	Микроорганизмы	Норма	Результат (КОЕ/г)
		(взрослые, КОЕ/г)
	Бифидобактерии	109-1010	102
	Лактобактерии	107-108	105
	Бактероиды	109-1010	109
	Фузобактерии	108-109	108
	Эубактерии	109-1010	109
	Пептострептококки	109-1010	1010
	Клостридии	≤105	105
	E.coli типичные	107-108	107
	E.coli лактозонегативные	<105	107
	E.coli гемолитические	0	0
	Другие энтеробактерии*	<104	104
	Неферментирующие бактерии**	≤104	102
	Энтерококки	105-108	106
	Стафилококки коагулазонегативные	≤104	104
	Стафилококки золотистые	0	0
	Грибы рода Candida	≤104	103

Примечание: * – представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.; ** – Pseudomonas, Acinetobacter и др.

15. Пациент В., 33 года. При микробиологическом исследовании фекалий выделены:

Норма Микроорганизмы Результат (КОЕ/г)

(взрослые, КОЕ/г)

Бифидобактерии	109-1010	0
Лактобактерии	107-108	0
Бактероиды	109-1010	108
Фузобактерии	108-109	109
Эубактерии	109-1010	109
Пептострептококки	109-1010	1010
Клостридии	≤105	104
E.coli типичные	107-108	104
E.coli лактозонегативные	<105	106
E.coli гемолитические	0	102
Другие энтеробактерии*	<104	Klebsiella spp., 107
Неферментирующие бактерии**	≤104	102
Энтерококки	105-108	107
Стафилококки коагулазонегативные	≤104	103
Стафилококки золотистые	0	105
Грибы рода Candida	≤104	106

Примечание: * – представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.; ** – Pseudomonas, Acinetobacter и др.

62

16. Пациент Г., 27 лет. При микробиологическом исследовании фекалий выделены:

Норма Микроорганизмы Результат (КОЕ/г)

(взрослые, КОЕ/г)

Бифидобактерии	109-1010	105
Лактобактерии	107-108	103
Бактероиды	109-1010	1010
Фузобактерии	108-109	109
Эубактерии	109-1010	109
Пептострептококки	109-1010	1010
Клостридии	≤105	104
E.coli типичные	107-108	0
E.coli лактозонегативные	<105	107
E.coli гемолитические	0	107
Другие энтеробактерии*	<104	0
Неферментирующие бактерии**	≤104	P.aeruginosa, 106
Энтерококки	105-108	107
Стафилококки коагулазонегативные	≤104	103
Стафилококки золотистые	0	0
Грибы рода Candida	≤104	107

Примечание: * – представители родов Klebsiella, Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, Citrobacter и др.; ** – Pseudomonas, Acinetobacter и др.

63