V_N_Kovalev_Praktikum_po_farmakognozii

Макро и микроскопический анализ ЛРС, содержащего кумарины		1 0 1

с добавлением 2 г натрия хлорида, как описано выше. После расслоения фаз водную часть переносят в ту же мерную колбу, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Полученный раствор центрифугируют (5000 об/мин) в течение 5 мин, после чего фильтруют через бумажный фильтр «желтая лента».

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре при длине волны 290 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание суммы кумаринов Х, %, в пересчете на псорален и высушенное сырье вычисляют по формуле

D · 100 · 100 · 10

D · 500 · 100

Х = ————————————— = ——————————— , 650 · m · 20 · (100 – W) 650 · m · (100 – W )

где D — оптическая плотность испытуемого раствора при 290 нм; 650 — удельный показатель поглощения псоралена при 290 нм; m — масса навески сырья, г;

W — содержание влаги в сырье, %.

Макро? и микроскопический анализ ЛРС, содержащего кумарины

Объекты для лабораторного исследования: трава донника, плоды амми большой, плоды пастернака, листья смоковницы (инжира), корневища с корнями дудника обыкновенного.

Объекты для самостоятельного изучения: плоды псоралеи, семена каштана конского (см. тему «Сапонины»), корневища и корни вздутоплодника сибирского, трава руты душистой.

ТРАВА ДОННИКА — Herba Meliloti

Задание 1. Сравните по гербарным образцам, рис. 5.2 и описанию, приве денному в табл. 5.1, донник лекарственный, донник рослый и близкие виды, недо пустимые к заготовке. Запишите в лабораторный журнал название сырья, лекар ственных растений и семейства на русском и латинском языках.

Т а б л и ц а 5.1

Отличительные признаки видов донника

1 0 2		Фенольные соединения. Тема 5. Кумарины

Окончание табл. 5.1

Задание 2. Проведите анализ травы донника в сравнении со стандартным образцом сырья. Запишите, используя схему 10, основные внешние признаки ис следуемого сырья (цв. вкл. V, рис. 1). Обратите внимание на цвет венчика и запах

сырья. Напишите русское и латинское названия возможных примесей.
		Внешние признаки по ГОСТ
	14101—69. Цельные олиствен-
	ные цветущие верхушки и бо-
	ковые		веточки		растений со
	стеблем длиной до 30 см и диа-
	метром до 3 мм. Прилист-
	ники ланцетные или шило-
	видные, цельнокрайние, ред-
	ко у самых нижних листьев —
	с	1—2	зубчиками. Нижние
	листья			обратнояйцевидные,
	верхние — продолговатые или
	ланцетные, по краю с обеих
	сторон		с	10—13 неровными
	зубчиками у донника лекар-
	ственного и с 8—20 зубчика-
	ми у донника рослого. Цвет-
	ки	мотыльковые,				мелкие,
	длиной от 5 до 7 мм. Чашечка
	колокольчатая,				5-зубчатая,
	остающаяся при плоде, голая
	у	донника лекарственного
	и опушенная у донника рос-
	лого. Иногда встречаются в не-
	значительном				количестве
	мелкие незрелые плоды-бо-
	бы — от 3 до 5 мм, неясносет-
	чатые или поперечно-морщи-
	нистые, голые или покрытые
	редкими			волосками.		Семя
Рис. 5.2. Донник лекарственный	одно, реже два. Цвет стеблей,

Макро и микроскопический анализ ЛРС, содержащего кумарины		1 0 3

чашечек и плодов — зеленый, венчиков — желтый. Запах ароматный, свежего сена (кумарин). Вкус горьковатый.

Задание 3. Изучите числовые показатели, характеризующие доброкачествен ность травы донника. Обратите внимание, что они не соответствуют современным требованиям, так как отсутствует стандартизация по действующим веществам.

Числовые показатели. Влажность — не более 14 %; золы общей — не более 10 %; стеблей диаметром более 3 мм — не более 2 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 0,5 мм,— не более 5 %; пожелтевших, побуревших и почерневших частей растения — не более 2 %; органической примеси — не более 1 %; минеральной примеси — не более 0,5 %.

Задание 4. Известно, что трава донника обладает размягчающим, рассасы вающим, муколитическим и антикоагулянтным действием. Запишите лекарствен ные средства травы донника в лабораторный журнал.

П р и м е ч а н и е. Растение культивируется как хороший медонос, дающий много нектара и пыльцы. Сухие и свежие соцветия используют для ароматизации табака, а также в качестве фиксатора запахов в парфюмерной промышленности.

ПЛОДЫ АММИ БОЛЬШОЙ — Fructus Ammi majoris

Задание 1. Ознакомьтесь с внешним видом амми большой по гербарному образцу и рис. 5.3. Запишите в лабораторный журнал название сырья, произво дящего растения и семейства на русском и латинском языках.

Задание 2. Проведите анализ плодов амми большой в сравнении со стандартным образцом сырья визуальным исследовани ем и под лупой ×10 (цв. вкл. IV, рис. 4). Запи шите, используя схему 9, основные внешние признаки сырья.

Внешние признаки по ФС 42-1996—83.

Сырье состоит из полуплодиков (мерикарпиев). Полуплодики выпуклые, со спинной стороны с 5 продольными, слабо выступающими ребрами и с ложбинкой на брюшной стороне, длиной 1,5—3,0 мм и шириной 1—2 мм; поверхность голая. Цвет зрелых полуплодиков — красновато-бу- рый, реже серовато-бурый, ребра более светлые; цвет недозрелых плодов — зеле- новато-бурый. Запах специфический; вкус горьковатый, слегка жгучий.

Задание 3. Сравните диагностические признаки плодов амми большой с особен

Рис. 5.3. Амми большая: цветущий побег и плод

1 0 4		Фенольные соединения. Тема 5. Кумарины

ностями плодов других лекарственных растений сем. сельдерейных (зонтичных) на рис. 5.4.

Рис. 5.4. Плоды сельдерейных (зонтичных) (слева — внешний вид, справа — поперечный срез):

а — амми большая; б — виснага морковевидная (амми зубная); в — пастернак; г — укроп пахучий; д — морковь; е — кориандр; ж — тмин; з — болиголов; и — анис; к — фенхель

Задание 4. Изучите числовые показатели, характеризующие доброкачествен ность плодов амми большой. Обратите внимание, что стандартизация сырья про водится по сумме фурокумаринов.

Числовые показатели. Сумма фурокумаринов (изопимпинеллина, бергаптена и ксантотоксина) — не менее 0,6 %; влажность — не более 10 %; золы общей — не более 8 %; посторонних примесей: органической — не более 5 %; минеральной — не более 1 %.

Задание 5. Известно, что плоды амми большой перерабатывают на фарма цевтических предприятиях. Напишите в лабораторном журнале название препа ратов и их применение.

ПЛОДЫ ПАСТЕРНАКА — Fructus Pastinacae sativae

Задание 1. Ознакомьтесь с внешним видом пастернака посевного по гер барному образцу и рис. 5.5. Запишите в лабораторный журнал название сырья, лекарственного растения и семейства на русском и латинском языках.

Макро и микроскопический анализ ЛРС, содержащего кумарины		1 0 5

Задание 2. Проведите анализ плодов пастернака в сравнении со стандартным образцом сырья с помощью лупы или сте реомикроскопа. Обратите внимание на размеры вислоплодников и особенность крайних ребрышек переходить в плоскую кайму, что отличает мерикарпии пастерна ка от других плодов сем. сельдерейных (зонтичных). Запишите, используя схему 9, основные внешние признаки сырья.

Внешние признаки по ФС 42-2548—88.

Плоды — округло-овальные, чечевицеобразносплюснутые вислоплодники, обычно распадающиеся на два полуплодика (мерикарпия). Полуплодики плоские, с небольшой округлой выемкой у основания, длиной 4—7 мм и шириной 3—6 мм. Спинная сторона слегка выпуклая с 5 ребрышками (3 узких, тонких, нитевидных и 2 крайних, переходящих в плоскую, немного утолщенную кайму). Брюшная сторона с продольной спайкой. Окраска плодов — светло-буро- вато-соломенная. Запах слабый, своеобразный. Вкус пряный, слегка жгучий.

Рис. 5.5. Пастернак посевной: цветущий побег и плод

Задание 3. Сравните морфологические диагностические признаки плодов пастернака с особенностями плодов других растений сем. зонтичных (стр. 104).

Задание 4. Изучите числовые показатели, характеризующие доброкачествен ность плодов пастернака. Обратите внимание, что стандартизация сырья прово дится по сумме фурокумаринов.

Числовые показатели. Суммы фурокумаринов — не менее 1 %; влаги — не более 10 %; золы общей — не более 6,0 %; посторонних примесей: органической — не более 10 %; минеральной — не более 1 %.

Задание 5. Известно, что плоды пастернака перерабатывают на фармацев тических предприятиях. Напишите в лабораторном журнале название препара тов и их применение.

КОРНЕВИЩА С КОРНЯМИ ДУДНИКА ОБЫКНОВЕННОГО —

Rhizomata cum radicibus Angelicae

1 0 6		Фенольные соединения. Тема 5. Кумарины

Задание 1. Сравните по гербарным образцам, рис. 5.6 и описанию, данному

втабл. 5.5, дудник обыкновенный и исходный вид — дудник лесной. Запишите

влабораторный журнал название сырья, лекарственного растения и семейства на русском и латинском языках.

Та б л и ц а 5.2

Отличительные признаки дудника обыкновенного и дудника лесного

Задание 2. Про ведите анализ корне вищ с корнями дуд ника обыкновенного в сравнении со стан дартным образцом сырья (цв. вкл. IV, рис. 4). Запишите, используя схему 12, основные внешние признаки исследуемого сырья. Обратите внимание, что корни дудника обык новенного включены в БТФ и PhEur. Напи шите русские и латин ские названия воз можных примесей.

Внешниепризнаки

по ГОСТ 21569—76. Короткие (длиной около 6—8 см) цельные или разрезанные вдоль корневища и отходящие от них продольноморщинистые корни, достигающие 15—25 см в длину

Рис. 5.6. Дудник лекарственный (дягиль)

Макро и микроскопический анализ ЛРС, содержащего кумарины		1 0 7

и 2—7 мм в толщину. Поверхность корневищ бурая или красновато-серая, корней — белая или желтоватая; излом ровный, гладкий. Запах ароматный, усиливающийся при измельчении. Вкус пряный, горький, слегка жгучий.

Задание 3. Изучите числовые показатели, характеризующие доброкачествен ность корневищ с корнями дудника обыкновенного, сравните с требованиями

PhEur.

Числовые показатели. Влажность — не более 14 %; золы общей — не более 14 %; золы, нерастворимой в 10 %-ном растворе кислоты хлористоводородной,— не более 4 %; корневищ с остатками листьев — не более 5 %; измельченных частей, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 10 мм,— не более 3 %; органической примеси — не более 1 %; минеральной примеси — не более 1 %.

Числовые показатели по PhEur. Эфирного масла — не менее 2 мл/кг высушенного сырья; влажность — не более 10 %; золы общей — не более 10 %; золы, нерастворимой в 10 %-ном растворе кислоты хлористоводородной,— не более 2 %; остатков листьев и стеблей — не более 5 %; кусочков корней, потерявших окраску,— не более 5 %; других примесей — не более 1 %.

Задание 4. Известно, что корневища с корнями дудника обыкновенного при меняют как спазмолитическое и потогонное средство. Запишите в лабораторном журнале препараты дудника обыкновенного.

ЛИСТЬЯ СМОКОВНИЦЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (ИНЖИРА) —

Folia Fici caricae

Задание 1. Изучите по гербарным образцам и рис. 5.7 смоковницу обыкно венную. Запишите в лабораторный журнал название сырья, лекарственного рас тения и семейства на русском и латинском языках.

Задание 2. Проведите анализ листьев инжира в сравнении со стандартным образцом сырья. Запишите, используя схему 7, основные внешние признаки ис следуемого сырья. Обратите внимание, что для целей фармацевтической про мышленности у смоковницы заготавливаются также плоды.

Внешние признаки по ФС 424—99. Листья цельные или частично измельченные, простые, длинночерешковые, крупные, длиной 8—30 см, шириной 6—30 см, пальчато-лопастные или пальчато-раздельные, реже цельные, в очертаниях округлые или широкояйцевидные с сердцевидным или выямчатым основанием и сближенными или расставленными ушками; количество лопастей (долей) 3—5 (7), они овальной, яйцевидной или широкояйцевидной формы (у более молодых деревьев — от лопастной до широколанцетной); верхушки округлые, притупленные или заостренные, край у основания — цельный, переходящий в неравномерно-волнистый, иногда на отдельных участках редкопильчатый или выямчатый до лопастного; черешок уплощенный, иногда перекрученный, длиной 2—7 (12) см. Цвет верхней

	1 0 8			Фенольные соединения. Тема 5. Кумарины
				стороны темно-зе-
				леный, поверхность
				жестко-шерохова-
				тая, нижняя сторо-
				на	светлее,			барха-
				тисто-шероховатая;
				жилкование					паль-
				чатое,		жилки			свет-
				лые, выступающие
				с нижней стороны;
				многие			боковые
				жилки 2-го и 3-го
				порядка				парал-
				лельны друг другу
				и	примерно				под
				прямым углом при-
				мыкают			к	жилкам
				1-го и 2-го порядка
				соответственно. За-
				пах	своеобразный.
				Вкус слегка горько-
				ватый,			ощущается
				через			некоторое
				время.
					Задание 3. Изу
				чите числовые пока
				затели, характеризу
				ющие			доброкаче
	Рис. 5.7. Смоковница обыкновенная (инжир):			ственность листьев
				инжира.			Обратите
	а — лист; б — плод
				внимание на количе
				ство		действующих
				веществ.

Числовые показатели. Суммы кумаринов в пересчете на псорален — не менее 0,08 %; влажность — не более 12 %; золы общей — не более 13 %; золы, нерастворимой в 10 %-ном растворе кислоты хлористоводородной,— не более 4 %; потемневших листьев — не более 3 %; органической примеси — не более 1 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 3 мм, — не более 5 %; минеральной примеси — не более 0,5 %.

Задание 4. Известно, что листья инжира применяют для получения препара та псоберан. Запишите в лабораторном журнале его применение, а также приме нение плодов инжира.

ТЕМА

6Хромоны

Хромоны — фенольные соединения с общей формулой С6—С3, которые образуются в растениях в результате конденсации γ-пиронового и бензольного колец, т. е. являются производными бензо-γ-пирона.

Рис. 6.1. Схема классификации хромонов

Физико-химические свойства. Хромоны — кристаллические вещества, растворимые в органических растворителях; их гликозиды растворимы в водноспиртовых растворах и в воде. На реакционную способность оказывает влияние характер заместителей: фенольный гидроксил, альдегидная или ацетильная группы вступают в характерные для них реакции замещения. В УФ-свете хромоны имеют голубую, желтую, зеленовато-желтую, желто-коричневую или коричневую флюоресценцию. Подобной флюоресценцией обладают флавоноиды и кумарины. Для отличия хромонов от кумаринов проводят реакцию со щелочью: хромоны образуют о-окси-β-дикетоны с безвозвратным раскрытием γ-пиронового кольца. В этих условиях кумарины при подкислении раствора регенерируются в исходные соединения, т. е. происходит рециклизация α-пиронового кольца. Производные хромона можно отличить от производных кумарина также по результатам реакции азосочетания. Хромоны с диазореактивами на хроматограммах вообще не обнаруживаются, а в растворах приобретают желтый цвет, в то время как кумарины образуют красную окраску.

Флавоноиды от хромонов отличаются образованием окрашенных продуктов взаимодействия с солями циркония, алюминия хлоридом, положительной цианидиновой пробой (см. с. 126—127).

Выделение. Для выделения хромонов из растительного сырья используют экстракцию хлороформом, ацетоном, метанолом или этанолом. Сумму фура-

1 1 0		Фенольные соединения. Тема 6. Хромоны

нохромонов виснаги морковевидной извлекают кипящей водой, чему способствуют поверхностно активные сопутствующие вещества. Для очистки экстрактов широко применяют метод колоночной хроматографии на силикагеле и фракционную кристаллизацию из различных растворителей.

Качественные реакции и хроматографическое обнаружение. Хромоны обнаруживают в растительных экстрактах при помощи микрохимических реакций. С концентрированными кислотами (серной, хлористоводородной, о-фосфор- ной) хромоны образуют оксониевые соли, окрашенные в лимонно-желтый цвет. В реакциях с концентрированными щелочами хромоны приобретают пурпурно-красное окрашивание. Чувствительность реакции 1 : 500 000.

Для обнаружения и идентификации хромонов используют хроматографический анализ, системы растворителей для которого описаны в соответствующей литературе.

Количественное определение. Методика количественного определения разрабатывается индивидуально для каждого вида ЛРС. Чаще всего используют оптические методы в сочетании с хроматографическим разделением.

Биологическое действие. Хромоны обладают спазмолитическим, коронарорасширяющим, антибактериальным и другим действием. Эталоном спазмолитической активности хромонов принято считать келлин, который применяют при спазмах мочевых путей, бронхоспазмах и хронической стенокардии. Гликозидирование фуранохромонов по С-2 положению приводит к потере фармакологической активности.

Анализ ЛРС, содержащего хромоны

Объекты для лабораторного исследования: плоды виснаги морковевидной (амми зубной).

Объекты для самостоятельного изучения: плоды укропа, плоды моркови дикой.

ПЛОДЫ ВИСНАГИ МОРКОВЕВИДНОЙ —

Fructus Visnagae daucoides (Fructus Ammi visnagae)

Задание 1. Ознакомьтесь с внешним видом виснаги морковевидной по гер барному образцу и рис. 6.2. Запишите в лабораторный журнал название сырья, лекарственного растения и семейства на русском и латинском языках.

Задание 2. Проведите анализ плодов виснаги морковевидной в сравнении со стандартным образцом сырья. Обратите внимание на внешнее сходство плодов виснаги морковевидной и плодов амми большой. Запишите, используя схему 9, основные внешние признаки сырья.

Внешние признаки по ФС 42-2098—83. Смесь зрелых плодов с недозрелыми, побуревшими. Плод — вислоплодник, яйцевидной формы, голый, глад-