2.1.2. Отбор, хранение и подготовка проб вод суши для биотестирования
Пробы вод суши отбирают с учетом требований ГОСТ 17.1.5.05 и Р 52.24.566.
Объем пробы должен быть не менее 50 мл.
Сосуды должны быть из материала, не содержащего токсичных примесей (полиэтиленовые емкости для пищевых продуктов, стеклянные баллоны и бутыли). Сосуды необходимо маркировать.
Перед заполнением сосудов воду фильтруют через газ № 70 - 76 (для удаления природного планктона) и несколько раз ополаскивают сосуд. Заполняют водой полностью. Анализ проб воды по определению токсичности проводят не позднее 6 ч после отбора проб. В случае невозможности проведения исследований за указанный в 8.6 срок пробы охлаждают до +4 °С или замораживают согласно ГОСТ Р 51592 и хранят до 30 сут. Консервирование проб химическими веществами не допускается. Перед биотестированием измеряют концентрацию кислорода, значения рН (с целью дифференцирования токсического воздействия каких-либо загрязняющих веществ и измеренных значений рН и кислорода, если эти параметры не обеспечивают нормальной жизнедеятельности гидробионтов). Пробу делят на две части для проведения биотеста на фильтрованной (пропущенной через бумажный фильтр для удаления взвешенных веществ) и нефильтрованной воде. [Игнатова Н.А. Оценка токсичности вод и донных отложений]
2.2. Принцип метода
Метод основан на оценке влияния испытываемой воды, фильтрованной водной вытяжки донных отложений и необработанных донных отложений, отобранных из водоемов и водотоков, на гибель и размножение лабораторных культур тест-объектов. Влияние испытываемых проб оценивают по изменению коэффициента регенерации популяции микроводорослей, микромезозоопланктона, моллюсков и др. тест-объектов при экспозиции их в испытываемой среде по сравнению с контролем.
Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, оборудование, реактивы.Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, оборудование, реактивы должны соответствовать методике с выбранным тест-объектом:
- для микроводорослей согласно Р 52.24.566, РД 118-02, Р 52.24.690;
- для инфузорий согласно Р 52.24.566, Р 52.24.669;
- для коловраток согласно Р 52.24.566, Р 52.24.662, РД 52.24.669;
- для дафний согласно Р 52.24.566, Р 118-02, РД 52.24.635;
- для хирономид согласно РД 52.24.635;
- для артемий согласно РД 52.24.690, Р 52.24.635;
- для рыб согласно Р 52.24.566.[ Методическое руководство по биотестированию воды]
3. Результаты исследования
В данной главе приведены таблицы и графики исследований токсичности вод и донных отложений малых рек Восточного Донбасса, р. Темерник по результатам биотестирование на Raphanus sativus.
Таблица 2. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г.
|
Место отбора |
Выклев |
|
| |||||||
|
1 сутки |
2 сутки |
3 сутки |
4 сутки |
Оценка токсического действия | ||||||
|
шт. |
откл от К |
шт. |
откл от К |
шт |
откл от К |
шт |
откл от К | |||
|
контроль |
10 |
|
10 |
|
10 |
|
10 |
|
|
|
|
4 |
2,3 |
-77 |
7 |
-30 |
7 |
-30 |
8,3 |
-17 |
нет ТД | |
|
5 |
2 |
-80 |
6,6 |
-34 |
7,3 |
-27 |
9 |
-10 |
нет ТД | |
|
6 |
3,3 |
-67 |
5,3 |
-47 |
6 |
-40 |
7 |
-30 |
нет ТД | |
|
1 |
2 |
-80 |
4,6 |
-54 |
4,6 |
-54 |
4,6 |
-54 |
ТД | |
|
2 |
1 |
-90 |
4,3 |
-57 |
8 |
-20 |
8,6 |
-14 |
нет ТД | |
|
7 |
1,6 |
-84 |
4 |
-60 |
5 |
-50 |
6 |
-40 |
нет ТД | |
|
8 |
3,6 |
-64 |
4,6 |
-54 |
6,6 |
-34 |
7,6 |
-24 |
нет ТД | |
|
9 |
1,6 |
-84 |
2,6 |
-74 |
3,6 |
-64 |
4,6 |
-54 |
ТД | |
|
10 |
2,3 |
-77 |
4 |
-60 |
5 |
-50 |
5 |
-50 |
ТД | |
|
11 |
0,6 |
-94 |
1,3 |
-87 |
1,3 |
-87 |
2,3 |
-77 |
ТД | |
|
12 |
0 |
-100 |
3,6 |
-64 |
7 |
-30 |
7,3 |
-27 |
нет ТД | |
|
13 |
2 |
-80 |
3,3 |
-67 |
5,6 |
-44 |
5,6 |
-44 |
нет ТД | |
|
14 |
2 |
-80 |
5,3 |
-47 |
6,3 |
-37 |
6,6 |
-34 |
нет ТД | |
|
бсмп1 |
1 |
-90 |
5,6 |
-44 |
5 |
-50 |
6,3 |
-37 |
нет ТД | |
|
бсмп2 |
0,3 |
-97 |
2,6 |
-74 |
3,3 |
-67 |
4,3 |
-57 |
ТД | |
|
бсмп3 |
1 |
-90 |
4,6 |
-54 |
5,6 |
-44 |
5,6 |
-44 |
нет ТД | |
График 1. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г.
Таблица 3. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г.
|
Место отбора |
Показатель | ||||||||||||
|
кол-во ростков |
длина корней |
длина ростков | |||||||||||
|
шт. |
откл от К |
шт. |
откл от К |
шт |
откл от К | ||||||||
|
контроль |
8 |
|
1,7 |
|
1,5 |
| |||||||
|
4 |
5,3 |
-34 |
0,6 |
-65 |
1,1 |
-27 | |||||||
|
5 |
6,6 |
-18 |
1,2 |
-29 |
1,7 |
13 | |||||||
|
6 |
5,3 |
-34 |
2,2 |
29 |
3,3 |
120 | |||||||
|
1 |
3,6 |
-55 |
2,4 |
41 |
2,9 |
93 | |||||||
|
2 |
4,6 |
-43 |
1,3 |
-24 |
1,7 |
13 | |||||||
|
7 |
4 |
-50 |
2 |
18 |
2,1 |
40 | |||||||
|
8 |
6 |
-25 |
2,1 |
24 |
2,6 |
73 | |||||||
|
9 |
3,6 |
-55 |
1,9 |
12 |
2,7 |
80 | |||||||
|
10 |
3,3 |
-59 |
2,3 |
35 |
3 |
100 | |||||||
|
11 |
1,3 |
-84 |
2,4 |
41 |
1,9 |
27 | |||||||
|
12 |
4,3 |
-46 |
2,5 |
47 |
2,1 |
40 | |||||||
|
13 |
3,3 |
-59 |
1,5 |
-12 |
2,6 |
73 | |||||||
|
14 |
5 |
-38 |
2,4 |
41 |
3,7 |
147 | |||||||
|
бсмп1 |
3,6 |
-55 |
2,2 |
29 |
1,5 |
0 | |||||||
|
бсмп2 |
2 |
-75 |
1,8 |
6 |
1,1 |
-27 | |||||||
|
бсмп3 |
3,3 |
-59 |
4,6 |
171 |
3,8 |
153 | |||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
| ||||||
График 2. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г.
Таблица 4. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г.
|
Место отбора |
Выклев |
Оценка токсического действия | |||||||
|
1 сутки |
2 сутки |
3 сутки |
4 сутки | ||||||
|
шт. |
откл от К, % |
шт. |
откл от К, % |
шт. |
откл от К,% |
шт. |
откл от К | ||
|
Исходное кол-во |
10 |
|
10 |
|
10 |
|
10 |
|
|
|
4 |
1,3 |
-87 |
6,3 |
-37 |
7,3 |
-27 |
7,6 |
-24 |
нет ТД |
|
5 |
3,3 |
-67 |
8,6 |
-14 |
9,3 |
-7 |
9,3 |
-7 |
нет ТД |
|
6 |
2,6 |
-74 |
6,6 |
-34 |
8,3 |
-17 |
8,3 |
-17 |
нет ТД |
|
7 |
2,6 |
-74 |
8 |
-20 |
8,3 |
-17 |
8,6 |
-14 |
нет ТД |
|
8 |
0,3 |
-97 |
9,3 |
-7 |
9,6 |
-4 |
9,6 |
-4 |
нет ТД |
|
9 |
0,6 |
-94 |
2 |
-80 |
3 |
-70 |
3,3 |
-67 |
ТД |
|
10 |
2 |
-80 |
5,6 |
-44 |
7 |
-30 |
7,3 |
-27 |
нет ТД |
|
11 |
1,3 |
-87 |
8 |
-20 |
9 |
-10 |
9,6 |
-4 |
нет ТД |
|
12 |
0,6 |
-94 |
2 |
-80 |
2 |
-80 |
2 |
-80 |
ТД |
|
13 |
0,6 |
-94 |
7 |
-30 |
7,6 |
-24 |
8 |
-20 |
нет ТД |
|
14 |
1 |
-90 |
5,6 |
-44 |
8,3 |
-17 |
9 |
-10 |
нет ТД |
|
15 |
2 |
-80 |
8 |
-20 |
8,6 |
-14 |
9,3 |
-7 |
нет ТД |
|
16 |
1,6 |
-84 |
6 |
-40 |
6,3 |
-37 |
7 |
-30 |
нет ТД |
|
17 |
1,6 |
-84 |
9 |
-10 |
9 |
-10 |
9 |
-10 |
нет ТД |
График 3. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г.
Таблица 5. Биотестирование по фитотоксичности Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г. Данные показателей биотеста на последний день эксперимента.
|
Место отбора |
Показатель |
Оценка токсического действия | |||||
|
Кол-во ростков |
Длина корней |
Длина ростков | |||||
|
шт. |
откл от К,% |
мм |
откл от К,% |
мм |
откл от К,% | ||
|
Исходное кол-во |
10 |
|
10 |
|
10 |
|
|
|
4 |
3,6 |
-64 |
1,75 |
-82,5 |
1,13 |
-88,7 |
ТД |
|
5 |
7 |
-30 |
1,35 |
-86,5 |
1,72 |
-82,8 |
ТД |
|
6 |
5,6 |
-44 |
1,85 |
-81,5 |
3,36 |
-66,4 |
ТД |
|
7 |
8 |
-20 |
1,52 |
-84,8 |
1,2 |
-88 |
ТД |
|
8 |
9,3 |
-7 |
1,87 |
-81,3 |
1,33 |
-86,7 |
ТД |
|
9 |
2,3 |
-77 |
1,75 |
-82,5 |
1,81 |
-81,9 |
ТД |
|
10 |
4 |
-60 |
0,75 |
-92,5 |
1,04 |
-89,6 |
ТД |
|
11 |
8,3 |
-17 |
2,08 |
-79,2 |
1,58 |
-84,2 |
ТД |
|
12 |
0,6 |
-94 |
0,5 |
-95 |
0,25 |
-97,5 |
ТД |
|
13 |
3,6 |
-64 |
1,04 |
-89,6 |
0,77 |
-92,3 |
ТД |
|
14 |
6 |
-40 |
1,19 |
-88,1 |
0,91 |
-90,9 |
ТД |
|
15 |
6,3 |
-37 |
1,84 |
-81,6 |
2,94 |
-70,6 |
ТД |
|
16 |
4,6 |
-54 |
1,03 |
-89,7 |
0,78 |
-92,2 |
ТД |
|
17 |
5,6 |
-44 |
1,66 |
-83,4 |
1,23 |
-87,7 |
ТД |
График 4. Биотестирование по фитотоксичности Raphanus sativus на испытуемой воде, р. Темерник,2014г. Данные показателей биотеста на последний день эксперимента.
Таблица 6. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на донных отложениях, р. Темерник,2014г.
|
Место отбора (номер точки) |
Участок |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
1 сутки |
2 сутки |
3 сутки |
4 сутки | ||||||
|
шт. |
откл.от исх,% |
шт. |
откл.от исх,% |
шт. |
откл.от исх,% |
шт. |
откл.от исх,% | ||
|
1 |
БСМП |
2 |
-80 |
8 |
-20 |
8,7 |
-13 |
9,3 |
-7 |
|
2 |
1,7 |
-83 |
6 |
-40 |
6,3 |
-37 |
7 |
-30 | |
|
3 |
1,7 |
-83 |
9 |
-10 |
9 |
-10 |
9 |
-10 | |
|
4 |
Санаторий |
1,3 |
-87 |
6,3 |
-37 |
7,3 |
-27 |
7,7 |
-23 |
|
5 |
3,3 |
-67 |
8,7 |
-13 |
9,3 |
-7 |
9,3 |
-7 | |
|
6 |
2,7 |
-73 |
6,7 |
-33 |
8,3 |
-17 |
8,3 |
-17 | |
|
7 |
Каменка |
2,7 |
-73 |
8 |
-20 |
8,3 |
-17 |
8,7 |
-13 |
|
8 |
0,3 |
-97 |
9,3 |
-7 |
9,7 |
-3 |
9,7 |
-3 | |
|
9 |
Змиевская балка |
0,7 |
-93 |
2 |
-80 |
3 |
-70 |
3,3 |
-67 |
|
10 |
2 |
-80 |
5,7 |
-43 |
7 |
-30 |
7,3 |
-27 | |
|
11 |
1,3 |
-87 |
8 |
-20 |
9 |
-10 |
9,7 |
-3 | |
|
12 |
Бот.сад |
1 |
-90 |
2 |
-80 |
2 |
-80 |
2 |
-80 |
|
13 |
0,7 |
-93 |
7 |
-30 |
7,7 |
-23 |
8 |
-20 | |
|
14 |
1 |
-90 |
5,7 |
-43 |
8,3 |
-17 |
9 |
-10 | |
График 5. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на донных отложениях, р. Темерник,2014г.
Таблица 7.Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на донных отложениях (последний день эксперимента) р. Темерник,2014г.
|
Место отбора (номер точки) |
Участок |
|
|
|
|
|
|
|
Кол-во ростков |
Длина корней |
Длина ростков | |||||
|
шт |
откл.от К,% |
мм |
откл.от К,% |
мм |
откл.от К,% | ||
|
К |
|
8 |
|
0,9 |
|
0,8 |
|
|
1 |
БСМП |
19 |
137,5 |
2,8 |
211,1 |
2 |
150 |
|
2 |
14 |
75 |
0,8 |
-11,1 |
2 |
150 | |
|
3 |
17 |
112,5 |
1,1 |
22,2 |
1,1 |
37,5 | |
|
4 |
Санаторий |
11 |
37,5 |
1 |
11,1 |
0,9 |
12,5 |
|
5 |
19 |
137,5 |
1,9 |
111,1 |
1,2 |
50 | |
|
6 |
17 |
112,5 |
2,5 |
177,8 |
1,9 |
137,5 | |
|
7 |
Каменка |
24 |
200 |
1,2 |
33,3 |
1,5 |
87,5 |
|
8 |
28 |
250 |
1,3 |
44,4 |
1,9 |
137,5 | |
|
9 |
Змиевская балка |
8 |
0 |
1,4 |
55,6 |
1,4 |
75 |
|
10 |
12 |
50 |
0,9 |
0 |
0,8 |
0 | |
|
11 |
25 |
212,5 |
1,6 |
77,8 |
2,2 |
175 | |
|
12 |
Бот.сад |
2 |
-75 |
0,2 |
-77,8 |
0,3 |
-62,5 |
|
13 |
11 |
37,5 |
0,7 |
-22,2 |
0,9 |
12,5 | |
|
14 |
18 |
125 |
0,9 |
0 |
1,1 |
37,5 | |
График 6. Биотестирование по фитотоксичности на Raphanus sativus на донных отложениях (последний день эксперимента) р. Темерник,2014г.