- •Для студентов лечебного и педиатрического факультетов
- •Оглавление
- •Раздел 1. Строение, свойства и функции белков
- •Лабораторная работа 1
- •Лабораторная работа 2
- •Оформление работы
- •Практическое значение
- •Тема 1.2. Структура и физико-химические свойства белков Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Клинико-диагностическое значение
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Исследование денатурации белков при нагревании в условиях различной рН Проведение анализа
- •Оформление работы
- •Тема 1.3. Классификация белков. Строение и функции белков в организме. Сложные белки Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Анализ химического состава гликопротеинов Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 2. Строение, классификация и роль витаминов Тема 2.1. Жирорастворимые витамины Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Тема 2.2. Водорастворимые витамины Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Качественные реакции на аскорбиновую кислоту
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 3. Энзимология Тема 3.1. Строение и свойства ферментов. Регуляция активности ферментов Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Проведение реакции.
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Обнаружение специфичности действия амилазы слюны Принцип
- •Проведение реакции
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 4 Влияние активаторов и инактиваторов на активность амилазы Принцип
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение реакции
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Вопросы для самоподготовки
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 5. Обмен аминокислот и белков Тема 5.1. Внешний обмен белков Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 3
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1 Определение активности аминотрансфераз сыворотки крови Принцип
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1 Определение аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Принцип
- •Реактивы
- •Материал исследования
- •Проведение анализа
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 6. Строение и обмен пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов Тема 6.1. Строение и метаболизм пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Титрометрическое определение мочевой кислоты в моче
- •Ситуационные задачи
- •Темы для реферативных сообщений
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Раздел 8. Строение и обмен углеводов Тема 8.1. Строение и внешний обмен углеводов. Обмен гликогена Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •ТЕмы для реферативных сообщений
- •Нормальные значения
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тема 8.2. Окисление глюкозы в анаэробных условиях. Глюконеогенез Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Тема 8.3. Аэробное окисление глюкозы. Пентозофосфатный путь Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Материал исследования
- •Реактивы
- •Определение концентрации глюкозы
- •Нормальные величины
- •Оценка гликемической кривой
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Раздел 9. Строение и обмен липидов
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1
- •Оформление работы
- •Темы для реферативных сообщений
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 2 Определение концентрации триацилглицеролов в сыворотке крови Принцип
- •Материал исследования
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Качественная проба Либена на ацетон Принцип
- •Проведение анализа
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тема 9.3. Внутриклеточный обмен фосфолипидов и холестерола. Транспорт липидов в крови Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Раздел 10. Гормональная регуляция обмена веществ и функций организма Тема 10.1. Механизмы передачи гормонального сигнала. Классификация гормонов. Гормоны гипофиза. (семинар) Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Тема 10.2. Гормоны гипоталамуса, гипофиза, щитовидной поджелудочной и паращитовидной желез Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1
- •Оформление работы
- •Тема 10.3. Гормоны гипофиза, надпочечников и половых желез Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Лабораторная работа 1
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 11. Биохимия крови
- •Темы для реферативных сообщений
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 4 (теоретически) Электрофорез белков на бумаге и ацетатцеллюлозных пленках Принцип
- •Материал исследования
- •Оборудование
- •Проведение анализа (основные положения)
- •Клинико-диагностическое значение
- •Тема 11.2. Обмен железа. Гемопротеины. Синтез и распад гема Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Оформление работы
- •Тема 11.3. Неорганические вещества крови. Кислотно-основное состояние Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Виды нарушений кислотно-основного состояния
- •Оформление работы
- •Нормальные величины
- •Практическое значение
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Оформление работы
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Раздел 12. Биохимия почек и печени Тема 12.1. Водно-солевой обмен. Нормальные и патологические компоненты мочи Актуальность
- •Вопросы для самоподготовки
- •Темы для реферативных сообщений
- •Нормальные величины
- •Лабораторная работа 2
- •Определение кетоновых тел тест-полосками "Кетофан"
- •Определение билирубина и уробилиногена тест-полосками "Иктофан" Принцип
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Определение гемоглобина и эритроцитов тест-полосками "Гемофан"
- •Принцип
- •Нормальные величины
- •Нормальные величины
- •Оформление работы
- •Лабораторная работа 3 (теоретически) Проба Реберга – определение клиренса креатинина Материал исследования
- •Принцип
- •Проведение анализа
- •Темы для реферативных сообщений
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Тестовые задания
- •Ситуационные задачи
- •Контрольные вопросы к итоговому занятию
- •Приложение 1 Классификация и номенклатура ферментов
- •I класс. Оксидоредуктазы
- •II класс. Трансферазы
- •III класс. Гидролазы
- •IV класс. Лиазы
- •V класс. Изомеразы
- •VI класс. Лигазы
- •Приложение 2 Индивидуальные белки плазмы крови
- •Характеристика некоторых белков плазмы крови
- •Нормальные величины
- •Клинико‑диагностическое значение
- •Нормальные величины
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Нормальные величины
- •Клинико-диагностическое значение
- •Церулоплазмин
- •Нормальные величины
- •Клинико‑диагностическое значение
- •‑Глобулины
- •Желудочный сок
- •Клиренс эндогенного креатинина
- •Приложение 4
- •Строение, классификация и роль витаминов
- •Энзимология
- •Биологическое окисление
- •Обмен аминокислот и белков
- •Строение и обмен пуриновых и пиримидиновых нуклеотидов
- •Матричные биосинтезы
- •Строение и обмен углеводов
- •Строение и обмен липидов
- •Гормональная регуляция обмена веществ и функций организма
- •Биохимия крови
- •Биохимия почек и печени
Темы для реферативных сообщений
Возрастная динамика белковых фракций. Эмбриоспецифические белки и их диагностическое значение.
Остаточный азот: его основные компоненты. Динамика уровня фракций остаточного азота в постнатальный период.
Лабораторная работа 1
Количественный метод определения содержания остаточного азота крови по методу Аселя
Остаточный азот является суммарным показателем безбелкового азота крови. Он складывается из мочевины (около 50%), аминокислот (около 25%), эрготионеина (около 8%), креатина и креатинина (до 7,5%), пептидов, нуклеотидов и азотистых оснований (около 5%), мочевой кислоты (до 4%), аммиака и индикана (0,5%). Так как показатель включает различные низкомолекулярные азотсодержащие вещества, более информативным является определение отдельных фракций остаточного азота.
Принцип
Сжигание небелкового фильтрата с концентрированной серной кислотой дает переход азота органических веществ в сульфат аммония, который с реактивом Несслера образует продукты желто-оранжевого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации азота.
Материал исследования
Сыворотка крови.
Реактивы
1) Реактив Несслера (щелочной раствор йодистых солей ртути и калия), 2) 5% р-р NaOH, 3) лакмусовая бумага.
Стандартный раствор (NH4)2SO4, 26 ммоль/л.
Оборудование
Колбы Кьельдаля, песчаная баня, фотоэлектроколориметр.
Проведение анализа
1. Подготовительный этап (выполняет лаборант):
Осаждение белков: в центрифужную пробирку, содержащую 1,8 мл дистиллированной воды, вносят 0,2 мл сыворотки крови, приливают 1,0 мл 10% раствора ТХУ, центрифугируют или фильтруют через смоченный бумажный фильтр.
Для минерализации 1,0 мл надосадка переносят в термостойкую пробирку, приливают 3 капли концентрированной H2SO4и 3 капли Н2О2. Осторожно упаривают и нагревают до получения бесцветного минерализата.
2. Цветная реакция
|
Опыт, мл |
Стандарт, мл |
Минерализат |
1,0 |
–– |
Стандартный раствор (NH4)2SO4 |
–– |
1,0 |
Раствор NaOH |
Проверяя величину рН по лакмусовой бумажке, добавляют по каплям до тех пор, пока рН не станет нейтральной – в нейтральной среде лакмус синеет. N.B. Излишек щелочи вызывает помутнение раствора | |
Дистил. вода Реактив Несслера |
8,0 2,0 |
8,0 2,0 |
|
Измеряют оптическую плотность опытной и стандартной проб против воды при 540 нм (зеленый светофильтр) |
Расчет
Концентрация остаточного азота, ммоль/л = , где
Еоп и Ест– оптическая плотность опытной и стандартной проб, Сст– концентрация стандартного раствора
Клинико‑диагностическое значение
Остаточный азот является показателем состояния белкового обмена.
Увеличение фракций остаточного азота (гиперазотемия) по своему характеру может быть абсолютной, связанной с действительным накоплением этих компонентов в крови, и относительной, связанной с дегидратацией. В свою очередь, абсолютная гиперазотемия может быть ретенционная (почечного и внепочечного происхождения) и продукционная:
ретенционная азотемия возникает в результате задержки выведения азотсодержащих веществ и различается на азотемии почечногопроисхождения (заболевания клубочков – нефриты, туберкулез почек, нефросклероз и др.) ивнепочечногопроисхождения. Внепочечные гиперазотемии подразделяются на надпочечные (результат нарушения гемодинамики и падения фильтрационного давления при сердечно-сосудистой недостаточности, снижении артериального давления) и подпочечные (при гипертрофии или аденоме простаты, почечно-каменной болезни);
продукционная азотемия выявляется при всех состояниях, связанных с увеличением распада белков, от ретенционной ее отличает повышение содержания аминокислот в крови, а также одновременное накопление азотистых компонентов в крови и моче.
Уменьшение концентрации остаточного азота возникает при снижении содержания мочевины, аминокислот или других фракций.