- •«Химия биологическая» для студентов очно-заочной формы обучения
- •Содержание Введение
- •Цели и задачи дисциплины
- •2. Организация работы студента на лабораторно-практических занятиях
- •3. Система рейтинговой оценки
- •Система итоговой оценки знаний
- •4. Рекомендуемая литература
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •I. Общие требования к поведению студентов в аудитории
- •II. Работа с веществами и растворами
- •III. Обращение с нагревательными приборами
- •Занятие № 1. «Химические свойства биогенных молекул»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 2. «Ферментный катализ»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 3. «Обмен веществ и энергии»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 4. «Обмен липидов»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 5. «Белковый обмен. Биохимическая детоксикация»
- •Экспериментальная работа.
- •Занятие № 6. «Гормональная регуляция обмена веществ»
- •Экспериментальная работа.
- •Физиологические показатели обмена веществ у домашних и сельскохозяйственных животных.
- •Вопросы итоговой аттестации
- •Савчук Светлана Васильевна
- •Саковцева Татьяна Владимировна
- •Ксенофонтова Анжелика Александровна
- •Химия биологическая
Занятие № 6. «Гормональная регуляция обмена веществ»
Цель занятия: изучить качественные реакции на некоторые гормоны.
Экспериментальная работа.
Опыт 1. Влияние физической нагрузки на содержание глюкозы в крови.
Концентрация глюкозы в крови контролируется центральной нервной системой и железами внутренней секреции. Поэтому в здоровом организме возможны лишь кратковременные колебания уровня глюкозы в крови. Так, гипергликемия наблюдается при сильном эмоциональном возбуждении (испуг, радость, страх, плач и т.д.), стрессовых реакциях, болевых приступах. Умеренная гиперглюкоземия возникает после физической нагрузки.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Скарификатор стерильный.
Реактивы. 1. Тест-набор для определения глюкозы.
Техника безопасности: соблюдайте правила взятия крови у испытуемого, используя стерильные материалы и микропипетки. Не нарушайте правила техники безопасности при определении количества глюкозы ортотолуидиновым методом (см. работу 7).
У испытуемого (добровольца) возьмите из пальца 0,1 мл крови.
Определите количество глюкозы в крови ортотолуидиновым методом (см. занятие 7).
Затем он выполняет физические упражнения (например, 50-60 приседаний), и через 15-20 минут у него снова возьмите 0,1 мл крови из пальца для анализа.
Рассчитайте количество глюкозы в крови до и после физической нагрузки (расчет смотрите в занятии 7). Сравните полученные результаты и объясните причину гипергликемии после физической нагрузки.
Опыт 2. Качественная реакция на адреналин.
Метод основан на способности пирокатехиновой группировки адреналина образовывать с FeCl3 комплексное соединение изумрудно-зеленого цвета.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Стеклянная воронка.
4. Фильтр.
5. Ступка с пестиком.
6. Водяная баня.
Реактивы. 1. Поджелудочная железа, или 0,1%-ный раствор адреналина.
2. Хлорид железа (III), 1%-ный раствор.
3. Аммиак, концентрированный раствор.
Подготовка проб.
Надпочечники КРС или свиней измельчают и экстрагируют адреналин дистиллированной водой, подкисленной лимонной или щавелевой кислотой из расчета на 1 кг надпочечников 1,5 литра дистиллированной воды и 9-10 г кислоты. После двух часов экстракции массу подогревают до 90-95оС для коагуляции белков, которые отделяют фильтрованием или центрифугированием. Фильтрат или надосадочную жидкость используют для качественного определения адреналина.
В пробирку налейте 10 капель 0,1%-ного раствора адреналина и добавьте 1 каплю 1%-ного раствора FeCl3. Наблюдайте за появлением характерного окрашивания.
Добавьте 1 каплю концентрированного раствора аммиака. Наблюдайте за изменением окрашивания.
Объясните полученные результаты. Какие биохимические процессы в организме запускает адреналин?
Опыт 3. Качественные реакции инсулина поджелудочной железы.
Приборы. 1. Штатив с пробирками.
2. Набор пипеток.
3. Стеклянная воронка.
4. Фильтр.
5. Ступка с пестиком.
6. Водяная баня.
Реактивы. 1. Поджелудочная железа.
2. Ацетон подкисленный.
3. Сульфат меди, 2%-ный раствор.
4. Гидроксид натрия, 10%-ный раствор.
5. Азотная кислота, концентрированная.
6. Ацетат свинца, 0,5%-ный раствор.
Свежую или замороженную поджелудочную железу КРС или свиней тщательно измельчите, и экстрагируйте подкисленным этанолом (ацетоном) (в соотношении 1:10) на холоде 10 минут.
Полученный экстракт профильтруйте.
С фильтратом проведите биуретовую реакцию, ксантопротеиновую реакцию, реакцию Фоля.
Биуретовая реакция.
В пробирку поместите 5 капель фильтрата. Добавьте равный объем 10%-ного раствора гидроксида натрия, а затем 2-3 капли 2%-ного раствора сульфата меди (II). Красно-фиолетовое окрашивание свидетельствует о положительной реакции.
Ксантопротеиновая реакция.
В пробирку поместите 5 капель фильтрата. Добавьте 3 капли концентрированной азотной кислоты и нагрейте на водяной бане. Желтое окрашивание свидетельствует о положительной реакции.
Реакция Фоля.
В пробирку налейте 1-2 мл фильтрата. Добавьте равный объем раствора гидроксида натрия, нагрейте до кипения и прибавьте 1-2 капли 0,5%-ного раствора ацетата свинца. Потемнение раствора свидетельствует о положительной реакции.
На основании полученных результатов сделайте вывод о строении инсулина. На какие биохимические процессы и как влияет инсулин?
Задание 1. Заполните таблицу, обобщающую сведения о влиянии гормонов на обмен углеводов.
Название гормона |
Место синтеза гормона |
Химическая природа гормона |
Ткани-мишени |
Влияние на процессы обмена углеводов |
Влияние на концентрацию глюкозы в крови |
Инсулин |
|
|
|
|
|
Адреналин |
|
|
|
|
|
Глюкагон |
|
|
|
|
|
Кортизол |
|
|
|
|
|
Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________
Приложение 1