- •240902.65 “Пищевая биотехнология”, 110901.65 “Водные биоресурсы и аквакультура”, 080401.65 “Товароведение и экспертиза товаров",
- •260100.62 “Технология продуктов питания”.
- •Часть III
- •Содержание
- •Основные правила безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Правила техники безопасности при работе с кислотами и щелочами
- •Техника безопасности при работе с легковоспламеняющимися жидкостями
- •Меры безопасности при утечке газа и тушении локального пожара и горящей одежды
- •Оказание первой медицинской помощи при ожогах и отравлениях химическими веществами
- •I. Углеводы
- •Моносахариды
- •Лабораторная работа № 1 Методы количественного определения сахаров
- •1. Метод Фелинга
- •2. Количественное определение сахара при помощи красной кровяной соли (йодометрический метод)
- •Тетратионат натрия
- •Ход работы
- •Пример расчета.
- •0,00459 Г сахара – 2 г раствора,
- •II липиды
- •Прогоркание жиров
- •1. Окисление жирных кислот
- •2. Йодное число.
- •Определение йодного числа с помощью солянокислого раствора хлористого йода
- •0,0127 - Количество г иода, эквивалентное 1 мл 0,1n раствора Na2s203;
- •3. Кислотное число
- •4. Число омыления и эфирное число жира.
- •Пример расчета
- •III. Исследование состава и свойств молока
- •1. Осаждение казеина
- •2. Молочные альбумины и глобулины
- •IV. Мышечная ткань.
- •1. Фракционирование белков мышечной ткани
- •1.3. Получение коллагена мышечной ткани
- •2. Экстрактивные вещества
1. Осаждение казеина
Оборудование и реактивы. Колбочки или стаканы. Воронки с фильтром. Уксусная кислота, 0,1% -ный раствор. Едкий натрий, 1%-ный раствор. Сода, водный раствор.
Ход работы
25—30 мл молока разбавляют в стакане или колбе 3—4 объёмами воды и к жидкости прибавляют по каплям при помешивании 0,1%-ную уксусную кислоту до прекращения выделениях хлопьевидного белого осадка казеина, захватывающего с собой также и жиры. Прибавлять кислоту надо очень осторожно, так как в избытке кислоты казеин легко растворяется.
Осадок отфильтровывают, тщательно промывают на фильтре 2—3 раза водой. Осадок и фильтрат вместе с промывными водами сохраняют для дальнейшей работы.
Небольшую часть осадка (казеин + жир) обрабатывают 1 %-ным раствором едкого натрия или раствором соды: казеин растворяется, жир остается во взвешенном состоянии. Жидкость фильтруют через влажный фильтр. Жир задерживается на фильтре. С фильтратом проводят реакции на белки (цветные и осаждение).
2. Молочные альбумины и глобулины
Фильтрат от первого осадка, имеющий кислую реакцию от прибавленной уксусной кислоты при осаждении казеина, смешивают с насыщенным раствором хлористого натрия и кипятят. Происходит осаждение молочных альбумина и глобулина. Содержимое фильтруют. Осадок промывают, растворяют в дистиллированной воде и проводят с ним цветные реакции на белки.
3. Высаливание белков молока
Оборудование и реактивы. Штатив с пробирками. Воронки с фильтром. Сернокислый аммоний, насыщенный раствор. Сернокислый аммоний (кристал.). Сулема водный раствор.
К молоку прибавляют равный объём насыщенного раствора сернокислого аммония. При этом происходит осаждение казеина и молочного глобулина. Осадок отфильтровывают и насыщают фильтрат порошком сернокислого аммония, выпадает молочный альбумин
4. Осаждение белков молока солями тяжелых металлов
К раствору сулемы прибавляют немного молока. При этом осаждаются белки молока. На этом свойстве основано применение молока в качестве противоядия при отравлении солями тяжёлых металлов. Сулему (HgCl2) можно заменить солями кадмия, железа, свинца и др.
IV. Мышечная ткань.
Мышечная ткань составляет свыше 40% веса тела животных. Поперечнополосатые мышцы обеспечивают перемещение тела в пространстве и выполнение механической работы.
Главной составной частью мышц являются белки, которые подразделяют на саркоплазматические, миофибриллярные, белки стромы, миоглобин и др. К саркоплазматическим белкам относятся белки миогеновой группы, обладающие альдолазной активностью. Кроме альдолазы из саркоплазматических белков выделены миоальбумин, миоглобулин и др.
Миофибриллярные белки обеспечивают сокращение мышц. Это актин и миозин. Миозин и актин могут соединяться, а в присутствии аденозинтрифосфорной кислоты сокращаться, производя работу.
АТФ + расслабленный актомиозин + Н20 →АДФ + сокращенный актомиозин + Н3РО4.
Энергия, накопленная в макроэргических связях АТФ, при этом используется в мышцах для производства работы. Эта реакция и является тем звеном, в котором энергия химического процесса превращается в механическую.
Миоглобин находится в красных мышцах. Он обладает способносгыо, подобно гемоглобину, связывать и отдавать кислород, поэтому способствует оснащению мышц кислородом.
Основным углеводом мышц является гликоген, содержание которого в мышцах в среднем составляет 0,5—2,0 %. В мышцах обнаружены нейтральные жиры, фосфатиды, гликолипиды, стерины и стериды
Азотистые экстрактивные вещества мышц весьма разнообразны. К ним относятся: АМФ, АДФ, АТФ, нуклеотиды, креатин - фосфат, карнозин, карнитин, полипептиды, аминокислоты и др.
На долю минеральных веществ мышечной ткани приходится 1—1,5 %. Это преимущественно соли натрия, калия, кальция, магния и др. В мышщх содержится также фосфор и сера и в небольших количествах металлы — железо, медь, никель, цинк, марганец и др.
Белки мышц можно разделить электрофорезом и с помощью экстракции водными и солевыми растворами.
Мясо, являющееся важнейшим продуктом питания человека, представляет собою комплекс различных тканей. В состав мяса входят мышечная, соединительная, жировая и костная ткани.
Лабораторная работа №4
Белки и экстрактивные вещества мышечной ткани