Стимулирование выхода зооспор из репродуктивной ткани маточных слоевищ

Стимулирование слоевищ, а следовательно и оспоривание, можно проводить двумя способами: раздельным и смешанным.

Раздельный. Маточные слоевища, отобранные и подготовленные, подсыхают 0,5-1 ч на воздухе, заворачивают (каждое в отдельности) рулоном в виде слоеного пирога в газетную бумагу, складывают в картонные ящики, последние закрывают картонными крышками или другим гигроскопическим материалом и ставят в темное место до 0,5 – 1 сут.

Количество рулонов в одном ящике должно быть таким, чтобы они сильно не давили друг на друга (специальные требования на размеры ящиков не существуют).

Температура воздуха в помещении, где проводят операции по стимулированию выхода зооспор из спорангиев репродуктивной ткани слоевищ, не ниже 10 и не выше 18 °С, оптимальные интервалы от 12 до 17 °С, влажность – около 85 %.

Смешанный. Маточные слоевища после промывки подсушивают на воздухе в тени под навесом или в помещении в течение 8-10 ч. Оптимальными условиями для подсушки являются температура воздуха 14-17 °С, влажность – около 85 %. На слоевища не должны попадать прямые солнечные лучи. Для ускорения подсушки в помещении можно сделать «сквозняк».

Получение зооспор. Критерии качества зооспор.

Завернутые в бумагу маточные слоевища, выдержанные в течение 0,5-1 суток, вынимают из ящиков и тщательно очищают от прилипшей бумаги.

Для контроля за интенсивностью выхода зооспор из каждой партии отбирают 10 слоевищ, на спороносную ткань которых в трех местах наносят каплю морской воды с температурой 12-16 °С. Каплю воды пипеткой переносят на предметное стекло и помещают под микроскоп (ув. 120). Если в поле зрения микроскопа находится 10 зооспор, то стимулирование (подсушку) слоевищ продолжают. При 20-30 зооспорах в поле зрения микроскопа – маточные слоевища готовы для оспоривания.

При температуре воды 16 °С массовый выход зооспор в воду начинается через 30-60 мин., а при более низких температурах через более или менее продолжительное время в зависимости от их конкретных значений. В целом же оптимум лежит в пределах от 12 до 17 °С. Хорошими считаются зооспоры, которые вышли из спорангиев за короткое время пребывания маточных слоевищ в емкостях с водой, при просмотре под микроскопом проявляют высокую двигательную активность. Если зооспоры в большинстве своем не обладают такой двигательной активностью, то это означает, что маточные слоевища были недоброкачественными (недозрелыми, передержанными, содержащимися в неблагоприятных ус­ловиях и т.д.), и в таких случаях зооспоры бракуют.

Оспоривание посадочно-выростных субстратов

Для оспоривания пригодны емкости размером от 1-1,5 до 5-8 м³, изготовленные из нетоксичных материалов; деревянные лодки, брезентовые чаны, стеклопластиковые ванны и др. Емкости должны быть чистыми и не протекать, чтобы поводцы постоянно находились в воде и не осушались.

Смешанный способ. Закладку поводцов и маточных слоевищ в емкости рекомендуется проводить в 18-19 ч. При закладке на дно емкости первый ряд делается из слоевищ, второй – из поводцов и так до 5-6 слоев. Последний слой, верхний, также делается из слоевищ.

После закладки получившийся "пирог' заливают морской водой. Желательно забор воды осуществлять как можно дальше в море для обеспечения ее чистоты. Уровень воды в емкости над слоевищами устанавливается в 10-15 см. Для контроля за оседанием зооспор на поводцы в каждом слое закладывается 2-3 предметных стекла, которые утром просматривают под микроскопом (ув.120). Если в поле зрения микроскопа обнаруживают 10-20 осевших (круглых) зооспор, оспоривание считают хорошим. Субстрат и маточные слоевища в емкостях находятся в течение 10 ч, т.е. в течение ночи. Если оспоривание проводилось в не помещения, емкости закрывают брезентом во избежание попадания пресной воды, в случае дождя. На рассвете следующего дня поводцы вывозят в море и размещают на плантации на глубине 2 м. Там к одному концу поводца привязывают грузик в 300 г, а другой конец привязывают к горизонтальному канату через 50 см. при таком методе оспоривания расход слоевищ 10-15 на 100 поводцов при 60% покрытия слоевищ.

Раздельное оспоривание. Этот способ оспоривания считают более совершенным, поскольку при нем регулируется концентрация споровой суспензии, уменьшается расход маточных слоевищ, достигается получение наиболее жизнеспособной рассады.

Осуществляется он следующим образом: простимулированные слоевища помещают в заранее приготовленные емкости с чистой морской водой, температура 15-16 °С. Через 30-60 мин. начинается массовый выход зоо­спор. Через 1 ч после этого (всего после 1,5 - 2 ч после помещения слоевищ в воду) слоевища вынимают из емкостей, споровую суспензию про­цеживают через двойной слой марли. Таким образом, получают маточную исходную концентрацию споровой суспензии, содержащую наиболее зрелые и активные, вышедшие за короткий промежуток времени зооспоры, при прорастании которых получается жизнеспособная здоровая рассада. Зооспор в поле зрения микроскопа (при ув.120) в маточной суспензии насчитывают до 100-120. Поэтому маточную суспензию разбавляют морской водой (температура 15-16 °С) до концентрации 5-10 зооспор в поле зрения микроскопа (ув.120). В разбавленную рабочую суспензию помещают поводцы на 8-10 ч, закладывают контрольные стекла. Оседание зооспор на стеклах через 8-10 ч должно быть 10-15 в поле зрения микроскопа при ув.120. По истечении 8-10 ч поводцы извлекают из емкостей, перевозят на плантацию и подвязывают к канатам как обычно. Расход маточных слоевищ при раздельном оспоривании: 4 слоевища (покрытых спороносной тканью на 70% и более) на 100 поводцов.