ТЕХНИКА ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПОСТОЯННЫХ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ ПРЕПАРАТОВ
Кусочки органа 1х1х0,5 см
Микротомирование в криостате |
Фиксирование –формалин |
|
10% (24 часа),Спирт- |
|
формалин и др. фиксаторы |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Фиксирование, окраска и |
|
|
|
Замораживающий |
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
заключение срезов |
|||||
|
микротом |
|
|
|
|
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
Промывка ( проточная вода 24 |
|||
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
часа) |
|||
|
Окраска и |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
заключение |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
срезов |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Обезвоживание и уплотнение |
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
( спирт 50, 70, 90, 100 градусов – |
|
||
|
|
|
|
|
|
|
по 24 часа) |
|
||
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Проводка в парафин
Проводка в целоидин
ПРОВОДКА В ПАРАФИН
АБСОЛЮТНЫЙ СПИРТ
АБСОЛЮТНЫЙ СПИРТ+ПРОМЕЖУТОЧНАЯ СРЕДА (1:1)
ПРОМЕ:ЖУТОЧНАЯ СРЕДА (КСИЛОЛ или ТОЛУОЛ или ХЛОРОФОРМ)
СМЕСЬ ПАРАФИНА С ПРОМЕЖУТОЧНОЙ СРЕДОЙ (1:1) (Термостат, Т=37-40 градусов, 2-4 часа)
ПАРАФИН 1 ( ТЕРМОСТАТ, Т=550-570, 2 часа)
ПАРАФИН 2 ( ТЕРМОСТАТ, Т=550-570, 2 часа)
ОХЛАЖДЕНИЕ В ВОДЕ
Микротомирование – санный и ротационный микротом
Наклейка срезов на предметные стекла (яичный белок)
Сушка срезов (термостат, Т=32-370
Окраска и заключение срезов
ЗАМОРАЖИВАНИЕ
ЗАФИКСИРОВАННЫЕ КУСОЧКИ ОРГАНОВ
ПРОМЫТЬ ПРОТОЧНОЙ ВОДОЙ (24-ЧАСА)
Перенести на столик замораживающего микротома и заморозить при помощи углекислоты
МИКРОТОМИРОВАНИЕ. C НОЖА ПОМЕСТИТЬ В ВОДУ ДЛЯ ОТТАИВАНИЯ
ОКРАСКА И ЗАКЛЮЧЕНИЕ СРЕЗОВ
ОКРАСКА СРЕЗОВ ГЕМАТОКСИЛИН-ЭОЗИНОМ
ПАРАФИНОВЫЕ СРЕЗЫ
Депарафинирование (ксилол, толуол, 5-10 мин.
Спирты нисходящих концентраций для постепенного введения воды в ткань среза: 1000, 960, 700, 500 – по 1-2 мин.
ВОДА ДИСТИЛИРОВАННАЯ
КВАСЦОВЫЙ ГЕМАТОКСИЛИН , 2-5 мин.
ВОДА ДИСТИЛИРОВАННАЯ, 10-15 мин.
ЭОЗИН 1-2 мин.
ВОДА ДИСТИЛИРОВАННАЯ
ОБЕЗВОЖИВАНИЕ
(БЫСТРО)
|
|
|
КАНАДСКИЙ БАЛЬЗАМ |
|
|
ПРОСВЕТЛЕНИЕ |
|||||
|
|
|
|
||
(КСИЛОЛ) |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|||
|
|
НАКРЫТЬ ПОКРОВНЫМ СТЕКЛОМ |
|||
|
|||||
|
|
|
|
|
Подпись студента: Подпись преподавателя:
ДАТА: