Контрольные вопросы.

1. 1.Каковы основные химические различия ДНК из разных биологических объектов?

2. Как происходит ферментативный гидролиз ДНК и какими способами можно его подавить?

3. На каких принципах основано разделение ДНК и белков?

4. С чем связано выращивание проростков пшеницы в темноте? Почему выгодно использовать для выделения ДНК проростки пшеницы, а не зрелые растения?

5. С чем связано основное отличие способов выделения ДНК из растительных и животных тканей?

6. Способы разрушения клнток.

7. Что такое солюбилизация белков? Принцип работы детергентов.

8. Для чего используют лизирующий буфер. Что такое буферная емкость? Две основные буферные системы в живых организмах.

9. Почему операции после нагревания лизатов необходимо проводить на холоде?

10. 10.Почему ДНК переосаждается этанолом?

11. 11.Почему раствор ДНК хранят в 1 SSС, а не в дистиллированной воде или 0,01 SSС?

12. Что такое ПАВ?

13. Что такое ионная сила, ее зависимость от концентрации и заряда ионов?

14. Размер и энергия ковалентных связей: одинарная, двойная и тройная углеродная связь. Сопоставление с размерами атомов углерода, водорода, азота, кислорода.

15. Виды и энергия (в эв) связей в биологических молекулах. Сравнение с тепловой энергией при 25 ºС.

16. Размеры, количество и тип ДНК в клетках млекопитающих и растений.

17. Характерный размер и функции хлоропластов растений.

18. Характерный размер и функции митохондрий млекопитающих. Сопоставление с размером клеточного ядра и самой клетки. Размер других внутриклеточных органелл.

19. Состав, функции и размер внутриклеточных органелл и цитоскелета клеток.

20. Внутриклеточная и межклеточная сигнализация. Два основных внутриклеточных посредника.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Б.Албертс и др. Молекулярная биология клетки. В 3-х тт. Изд-во Мир, 1994.

2. Патрушев Л.И. Экспрессия генов. М., Наука, 2000.

3. Ченцов Ю.С. Общая цитология. Изд-во МГУ, 1995.

4. Льюин Б. Гены. Изд-во Мир, 1987.

5. Сингер М, Берг П. Гены и геномы. . Изд-во Мир, 1998.

6. А.Ленинжер "Основы биохимии", Мир, 1985.

Дополнение к лабораторной работе № 9 “Реакция Белоусова - Жаботинского”. Качественные периодические реакции.

Йодные часы.

1. Раствор коммерческий 50%-ный раствор перекиси водорода - Н₂О₂. Брать 1 мл.

2. 2,5 мл раствора №2. (Для приготовления 100 мл раствора в 50-60 мл воды влить 1,1 мл конц. Н₂SО₄и добавить 4,28 г КIО₃. Подогреть до растворения соли. Охладить и долить воды до 100 мл.)

3. Смешать 200 – 400 мкл раствора крахмала - 4 мг/мл с 2,4 мл малоновой кислоты (11,7 г/250 мл) и 2 мл раствора сульфата марганца (1,142 г MnSO₄·H₂Oв 100 воды).

Проведение: В стакан отмерить пп.2, а затем одновременно влить растворы по пп.1 и 3, при энергичном перемешивании. Наблюдается порядка 32 колебаний.

Реакция Белоусова – Жаботинского.

1. Стандартный раствор. (К 9,6 г сульфата церия (III) – Се₂(SО₄)₃·8Н₂О добавить около 100 мл воды и 15 мл конц. Н₂SО₄и 11,7 г малоновой кислоты. Смесь перемешивать при нагревании до полного растворения осадка в течении 4 – 5 часов. Постепенно довести объем до 250 мл.)

2. Раствор окислителя. (Навеску 300 мг КВrO₃растворить в 2,5 мл воды при нагревании. Добавить около 400 мкл раствора индикатора – комплекса железа с фенантролином.) (1 г о-фенантролина, 5 мл серной кислоты (1:3) и 0,8 г соли Мора в 50 мл воды).Окисленнаяформа индикатора обладает бледно-голубой окраской, аокисленная– красная

Проведение: В стакан отмерить 5 мл стандартного раствора, а затем влить при энергичном перемешивании быстро охлажденный раствор окислителя, пока не выпал осадок КВrO₃.

Пальцы: В чашку Петри диаметром 12 см вылить 7,5 мл ранее смешанного раствора.