Проба Бюрне, компоненты, постановка, учет результатов.

Используют для выявления состояния ГЗТ к аллергенам бруцелл у больных, переболевших бруцеллезом. Ставят с 15-20 дня заболевания. Бруцеллин в дозе 0,1 мл вводят строго внутрикожно в среднюю треть ладонной поверхности предплечья. Через 6—12 часов на месте инъекции появляется болезненный отек и покраснение, которые достигают максимального развития через 24 и 48 часов, после чего постепенно угасают.

Учет: 1) отрицательная реакция (—) — полное отсутствие местных изменений; 2) сомнительная реакция (±) — наличие асимметрии кожной складки по сравнению с контрольной; 3) слабо положительная ( + )—наличие слабо выраженного отека и красноты диаметром 2—3 см; 4) положительная реакция ( + + )—наличие отечности диаметром 4—5 см, иногда с аденитом; 5) резко положительная (+ + + ) —при отеке 6—8 см с аденитом.

Серодиагностика бруцеллеза.

Реакция Райта: ставят в начале 2-й недели болезни. Реакцию ставят не менее чем в пяти разведениях (1:50, 1:100, 1:200, 1:400 и 1:800) в объеме 1 мл каждое. В качестве антигена применяют единый бруцеллезный дианостикум. Перед употреблением диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физиологическим раствором. Учет реакции производят через 24 часа путем сравнения степени просветления в опытных пробирках с соответствующим стандартом мутности, который готовят следующим образом. В 4 пробирки последовательно наливают 1, 2, 3 и 4 мл разведенного диагностикума, затем в том же порядке добавляют 3, 2 и 1 мл карболизированного физиологического раствора, в последнюю пробирку ничего не добавляют. После взбалтывания содержимого берут по 0,5 мл антигена каждой концентрации и 0,5 мл карболизированного физиологического раствора. Таким образом получают 4 пробирки стандарта мутности с различной степенью просветления (75% — 3—, 50% — 2 — и 25% — 1 — и отсутствие просветления), которые вместе с опытными пробирками помещают в термостат при t° 37° на 24 часа, после чего производят учет реакции. Диагностическим титром исследуемой  сыворотки считается 50% агглютинации (2+).

Реакция Хеддльсона: стеклянную пластинку делят на 6 квадратов и наносят неразведенную испытуемую сыворотку в количествах от 0,08 до 0,01 мл и добавляют единый бруцеллезный диагностикум (по 0,03), кроме последней (5), в которую вносят 0,03 мл ИХН (контроль сыворотки). В 6-м квадрате находится 0,03 мл АГ и 0,03 мл ИХН (контроль диагностикума). Капли смешивают стеклянной палочкой. Учет: отсутствие агглютинации во всех дозах – отриц, наличие в 1 – сомнительная, во 2 – слабоположительная, в 3 и 4 – положительная, везде – резко положительная.

+проводят РИФ, РПГА, ИФА, РСК.

Методы микробиологической диагностики туляремии. Характеристика перечисленных методов.

Серологический метод: РА с туляремийным корпускулярным диагностикумом. Сыворотку разводят в ИХН от 1:25 до 1:400. В каждую пробирку с 0,5 мл разведенной сыворотки добавляют 0,5 мл диагностикума. Пробирки в термостат на 2ч. Предварительно учитывают результат через 2 ч, окончательно – после пребывания при комнатной температуре через 18-20 ч . Положит – обнаружение агглютининов

+РНГА с сывороткой больного и туляремийным эритроцитарным диагностикумом.

+ИФА

Аллергическая проба: внутрикожный тулярин вводят 0,1 мл внутрь кожи ладонной части предплечья. Результат учитывают через 24-48 ч. Наличие инфильтрата и гиперемии диаметром более 1 см рассматривается как положительная реакция.

Биологический: материал – кровь, пунктат из бубона, соскоб из язвы, налет из зева, мокрота. Материал вводят 3-5 мышам или 2 морским свинкам подкожно, накожно, внутрибрюшинно и через рот. Если животные на протяжении 7-15 дней не погибают, их забивают и вскрывают. При туляремии обнаруживают соответствующие патологоанатомические изменения. Кровь, костный мозг, участки лимфатических узлов сеют на среды: желточную, глюкозоцистиновый агар с кровью и антибиотиками. Выделенную ЧК идентифицируют по морфологическим, антигенным и биологическим свойствам, определяют чувствительность к антибиотикам.

Вопрос №21. Реакция Асколи. Компоненты, постановка, учет результатов.

Исследуемым материалом могут служить: трупный материал животных,кожа и изделия из нее, шерсть.

Исследуемый материал измельчают, заливают 10-20 кратным объемом ИХН и кипятят в течение 10-45 минут и выдерживают 16-20 ч при температуре 6-14. Затем жидкость фильтруют и полученный экстракт в узкой пробирке осторожно наслаивают на преципитирующую сибиреязвенную сыворотку, которую получают из крови животных, гипериммунизированных вакциной или убитой культурой возбудителя.

Параллельно ставят контроли вытяжки и преципитирующей сыворотки, с заведомо положительной и отрицательной пробой, с нормальной лошадиной сывороткой.

На границе соприкосновения 2 жидкостей в течение 1-5 минут появляется кольцо белого цвета (преципитат) , что расценивают как положительную реакцию. При появлении преципитата позже 10 мин реакцию считают неспецифической.