- •1.Метод ферментативного определения глюкозы в сыворотке крови
- •2. Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом
- •7.Метод ферментативного определения мочевины в сыворотке крови
- •4. Метод ферментативного определения общего холестерина в сыворотке крови.
- •5.Метод ферментативного определения триацилглицеринов в сыворотке крови
- •8. Бензидиновая проба на кровь
- •9. Качественная реакция на сахар в моче
- •10.Качественная р-ция на кетоновые тела в моче
- •11. Качественная реакция на фенилпировиноградную кислоту (проба Фелинга)
- •12.Определение примесей крови в моче методом ’’сухой” химии при помощи тест-полосок фирмы boehRiNger mannheim
- •14.Качественное определение белка в моче (Проба Геллера)
7.Метод ферментативного определения мочевины в сыворотке крови
Принцип метода: Уреаза гидролизует мочевину с образованием аммиака и СО2. Выделенный аммиак с хромогеном и гипохлоритом натрия образует окрашенный продукт хим р-ции, интенсивность окраски которого определяют фотометрически.
Реактивы:
Реактив №1(ферментный реагент), реактив №2(хромоген), реактив №3(натрия гипохлорит)
Стандартный р-р мочевины
Исследуемая сыворотка крови.
Концентрация мочевины рассчитывается по формуле:
Соп=(Еоп*Сст)/Ест
где Соп – концентрация мочевины в исследуем пробе, Еоп – оптическая плотность исследуемой пробы, Сст – концентрация мочевины в стандартной пробе, Ест – оптическая плотность в стандартной пробы
нормальное содержание мочевины:
в сыворотке крови 2,5- 8,3 ммоль/л, в моче – 333,0- 587,7 ммоль/л.
Диагностическое значение: мочевина синтезир в печени,это проодукт общ обезвреживания аммиака. Ее выделение с мочой – главный путь экскреции азота.
Повышение ур мочевины в сыворотке крови наблюдается при заболевании почек: почечная недостаточность, нефрит, рефлекторная анурия, почечно-каменная болезнь.
Уменьшение содерж мочевины в крови наблюд при нарушении мочевинообразовательной ф-ции печени в результате паренхиматозной желтухи, острой дистрофии органа, декомпенсированного цирроза.
З- МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЛЬБУМИНА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ С
БРОМКРЕЗОЛОВЫМ ЗЕЛЕНЫМ
Принцип метода состоит в том, что альбумин с бромкрезоловым зеленым в слабо кислой среде образует окрашенный комплекс синего цвета, интенсивность которого пропорциональна концентрации альбумина.
Реактивы, исследуемый материал:
1.Раствор бромкрезолового зеленого (рабочий реактив).
2.Стандартный раствор альбумина.
3.Исследуемая сыворотка.
Концентрация холестерина рассчитывается по формуле:
Соп=(Еоп*Сст)/Ест,
где Соп – концентрация альбумина в исследуемой пробе, Еоп – оптическая плотность исследуемой пробы, Сст – концентрация альбумина в стандартной пробе, Еоп – оптическая плотность стандартной пробы
Нормальная концентрация альбумина крови - 35-52 г /л
Определение концентрации альбумина в крови имеет очень важное диагностическое значение. Это обусловлено тем, что:
1.альбумин является показателем, характеризующим тяжесть тех заболеваний, которые сопровождаются гипоальбуминемией;
2. альбумин является основным транспортным белком в организме. С альбумином транспортируются: половина всего кальция, свободные жирные кислоты, билирубин, гормоны, лекарственные препараты.
Диагностическое значение: Большее диагностическое значение имеет обнаружение гипоальбуминемии. Клинически проявляется:
-слабостью,
-отеками нижних конечностей. При содержании альбумина в сыворотке крови ниже 30 г/л онкотическое давление снижается настолько, что из сосудистого русла переходит во внесосудистое - образуются на нижних конечностях, скапливается жидкость в серозных полостях (брюшной - асцит, плевральной - плеврит, перикардиальной-перекардит
-судорогами, вследствие гипокальциемии. Комплекс альбумин-кальций является транспортной формой кальция. И возникает ситуация, когда при определении в крови нормальной концентрации кальция, на самом деле из-за гипоальбуминемии отмечается скрытый дефицит кальция
Причины гипоальбуминемии
I) снижение поступления и синтеза вследствие: недостаточного питания, дефектов пищеварения, нарушения абсорбции, заболеваниях печени. Печень является местом синтеза альбумина, поэтому снижение его концентрации может служить тестом для оценки ее функционального состояния, например: гипоальбуминемия при хроническом гепатите и циррозе имеет неблагоприятное прогностическое значение.
2.увеличение потери альбумина при кровотечениях, анафилактическом шоке, альбуминурии (т.е. выделении с мочой), при образовании выпотов в серозные полости, при хронических поносах, при хронических заболеваниях почек (например, при нефротическом синдроме, когда концентрация альбумина в крови может достигать 5 г/л при уровне общего белка 25-30 г/л). В хирургической практике это имеет место при так называемых болезнях оперированного желудка (после гастрэктомии или резекции 2/3 желудка), при кишечной непроходимости, остром панкреатите, холецистите, острых флегмонах, абсцессах легких. Выраженная гипоальбуминемия или ее усугубление в динамике при тяжело протекающих хирургических заболеваниях расценивается как крайне неблагоприятный прогностический фактор. Это объясняется двумя причинами:
Уровень альбумина служит показателем эндогенной интоксикации и чем выраженнее интоксикация, тем ниже уровень альбуминов
Гипоальбуминемия приводит к снижению биологической доступности и длительности нахождения фарм препаратов в часности антибиотиков
3. усиление катаболизма альбуминов наблюдается у больных гипертиреозом, гиперкортизолемией, длительной лихорадкой, обширными травмами. .
Чаще всего изменения содержания альбумина в плазме бывают вторичными, т.е. причиной являются какие-либо заболевания. Первичные нарушения очень редки и представляют собой наследственные заболевания. К ним относится анальбуминемия (т.е. отсутствие альбумина) и двойная альбуминемия (бисальбуминемия) - протекает бессимптомно, при электрофорезе белков сыворотки крови выявляют две фракции альбуминов.
Гиперальбуминемия. Абсолютная гиперальбуминемия практически не встречается. Относительная связана с гипо- или дегидратацией т.е. со снижением объема циркулирующей жидкости