ЗАНЯТИЕ 1.3.4
СИСТЕМА АНТИГЕН-АНТИТЕЛО В ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ
Цель: изучить механизмы взаимодействия АГ-АТ, принципы и методы постановки: РА, РПГА, РП.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
-
РА. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
-
РПГА. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
-
РП. Компоненты, механизм, способы постановки, применение.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
использовать реакции иммунитета в диагностике инфекционных болезней.
СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ВЛАДЕТЬ:
методами постановки и оценки результатов серологических реакций
Теоретические аспекты:
Серология - раздел иммунологии, изучающий взаимодействие Аг и Ат в реакциях in vitro.
Серологические методы - совокупность реакций in vitro, основанных на Аг-Ат взаимодействии и направленных на выявление в сыворотке крови и других жидкостях организма Ат, а также Аг в исследуемом материале.
Сероиндикация - обнаружение возбудителя в исследуемом материале (определение рода возбудителя) с поливалентными сыворотками.
Сероидентификация - определение вида возбудителя или отдельных антигенов с монорецепторными сыворотками.
Серодиагностика - обнаружение антител или определение титра антител в сыворотке крови
Схема описания реакции:
-
направление (цель)
-
ингредиенты (компоненты)
-
механизм (схема)
-
способ постановки реакции
-
результат
Работа № 1. Реакция агглютинации (РА)
Цель: Разобрать механизм, освоить различные методы постановки РА в зависимости от цели исследования, интерпретировать результаты реакций.
-
Самостоятельная работа. Определить родовую принадлежность выделенной чистой культуры в ориентировочной РА на стекле с поливалентными сыворотками: сальмонеллезной ABCDE, шигеллезной, иерсиниозной (сероиндикация). Поставить, учесть, оценить результат РА (см. теоретическую справку).
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм:
Постановка:
Результат:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
-
Самостоятельная работа. Определить вид исследуемой культуры в развернутой РА на стекле с моновалентными сыворотками (сероидентификация). Поставить, учесть, оценить результат РА.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм (схема см. выше)
Постановка:
Результат:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
-
Самостоятельная работа. Учесть результат РА с дизентерийным диагностикумом с целью выявления антител в парных сыворотках пациента (серодиагностика). Парные сыворотки - это сыворотки от одного и того же больного, взятые в начале болезни и через одну две недели с целью выявления нарастания титра антител. Сделать вывод.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм (см. выше)
Постановка:
1/100 1/200 1/400 1/800 1/1600 КС КД
Результат:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 2. Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (рнга и рпга синонимы)
Цель: разобрать механизм, освоить метод постановки РПГА в зависимости от цели исследования, интерпретировать результаты реакций.
Самостоятельная работа. Учесть результат РПГА с эритроцитарным сальмонеллезным диагностикумом для определения специфических АТ в парных сыворотках больного.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм:
Постановка:
Результат:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Работа № 3. Реакция преципитации (рп)
Цель: разобрать механизм, освоить метод постановки РП в зависимости от цели исследования, интерпретировать результаты реакций.
Самостоятельная работа. Поставить РП для выявления сибиреязвенного Аг в экстракте из шерсти животного. Оценить результат, сделать вывод.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм:
Постановка:
Постановка:
«К» «О»
Результат:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Самостоятельная работа. Разобрать принцип постановки РП в геле. Сделать вывод.
Направление:
Ингредиенты:
1)
2)
3)
Механизм (см. выше)
Постановка:
Результат:__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Вывод:____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Подпись преподавателя ________________________________________________________
Самостоятельная работа студента во внеурочное время:
Ответить на вопросы
1) Агглютинация-это__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ингредиенты для постановки РА:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________
Феномен реакции _____________________________________________________________
2) Ингредиенты для постановки РПГА:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________
Феномен реакции_____________________________________________________________
3) Реакцию преципитации ставят в том случае, если____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Ингредиенты для постановки РП:
1.___________________________________________________________________________
2.___________________________________________________________________________
3.___________________________________________________________________________
Феномен реакции____________________________________________________________
4) Что изображено на схеме?
Какой материал можно исследовать?
Описать суть метода.
Применение в медицине.
5) Что изображено на схеме?
Какой материал можно исследовать?
Какой метод исследования?
Описать суть метода.
Применение в медицине.
6) Что изображено на схеме?
Какой материал можно исследовать?
Какой метод исследования?
Описать суть метода.
Применение в медицине.
7) Что изображено на схеме?
Какой материал можно исследовать?
Какой метод исследования?
Описать суть метода.
Применение в медицине.
Подпись преподавателя_________________________________________________________
Теоретическая справка
к работе № 1
Реакция агглютинации (РА)
Агглютинация - это склеивание и выпадение в осадок микробов или других клеток под действием антител в присутствии электролита (изотонического раствора хлорида натрия). Группы склеенных бактерий (клеток) называют агглютинатом. Для реакции агглютинации необходимы следующие компоненты:
1. Антитела (агглютинины), которые находятся в сыворотке больного или иммунного животного.
2. Антиген - взвесь живых или убитых микробов, эритроцитов или других клеток.
3. Изотонический (0,9%) раствор хлорида натрия.
Реакцию агглютинации для серодиагностики применяют при брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля), при бруцеллезе (реакция Райта и Хеддлсона), туляремии и т.д. Антителом при этом является сыворотка больного, а антигеном известный микроб. При идентификации микробов или других клеток антигеном служит их взвесь, а антителом - известная иммунная сыворотка. Эту реакцию широко применяют для диагностики кишечных инфекций, коклюша и др.