13.6. Возбудитель туляремии

Возбудитель впервые был обнаружен Ч. Мак-Коем и Ш. Чепиным в 1921 г. при изучении чумоподобного заболевания у сусликов в местности Туляре в Калифорнии и назван Bacterium tularensis. В 1921 г. Э. Френсис доказал, что этот возбудитель патогенен для человека. В итоге род получил название Francisella., а вид – F. tularensis.

Классификация

Семейство Francisellaceae, род Francisella, виды F. tularensis, F. philomiragia (патогенность для людей не доказана).

Морфология

Мелкие, полиморфные, грамотрицательные биполярно окрашиваемые коккобактерии, неподвижны, не имеют спор, есть тонкая слизистая капсулоподобная оболочка.

Культуральные свойства

Очень требовательны к условиям культивирования, растут на яичных или на агаровых средах. Используют кровяной агар с глюкозой и цистеином, рост медленный, скудный (через 3-7 дней). Колонии нежные, блестящие, бесцветные (S-формы). На жидких средах – скудный поверхностный рост. Лучше культивируются в организме морских свинок и кроликов.

Биохимические свойства

Аэробы, метаболизм окислительный.

Ферментируют глюкозу, мальтозу до кислоты. Белки разлагают до сероводорода. Имеют ферменты глутаминазу, аспарагиназу, цитруллинуреидазу.

Выделяют каталазу, оксидазу не продуцируют.

Антигенная структура различна у S- и R-форм туляремийного возбудителя. S-формы имеют 2 антигена: О-АГ – соматический и Vi-АГ – поверхностный, который выявляется у свежевыделенных культур и обеспечивает вирулентность. У R-форм присутствует только О-антиген. В О-антигене возбудителя туляремии есть общие субстанции с антигенами бруцелл, что может приводить к перекрестным реакциям.

Географические расы (подвиды) возбудителей туляремии:

1. Голарктическая – встречается в странах северного полушария. Не имеет фермента цитруллинуреидазы, не ферментирует глицерин, слабо патогенна для кроликов.

2. Среднеазиатская – слабо патогенна для кроликов, имеет цитруллинуреидазу, ферментирует глицерин.

3. Американская – высокопатогенна для кроликов, выделяет цитруллинуреидазу, ферментирует глицерин.

Факторы вирулентности

Факторы вирулентности возбудителей туляремии до конца не изучены. Считается, что ведущими в патогенезе являются структуры, ответственные за выживание бактерий при фагоцитозе и развитие реакций гиперчувствительности.

Возбудители туляремии имеют капсулу, которая обладает протективным действием. Липополисахаридный эндотоксин так же, как и у бруцелл, не способен вызывать активную продукцию провоспалительных цитокинов.

Отсюда фагоцитоз носит незавершённый характер, возбудители размножаются в фагоцитах, подавляют их киллерный эффект, препятствуя слиянию фагосомы с лизосомами.

Бактерии выделяют нейраминидазу, что способствует адгезии.

Имеются рецепторы для взаимодействия с Fс-фрагментами IgA. Это способствует нарушению активности комплемента и тормозит опсонизацию.

Аллергены клеточной стенки вызывают ГЧЗТ.

Резистентность

Возбудители проявляют заметную устойчивость в окружающей среде. В воде при 4⁰С сохраняются 4 месяца, при температуре 20⁰С – 2 месяца. Чувствительны к повышенным температурам (60-80⁰), к основным дезинфицирующим веществам (карболовой кислоте, лизолу), к антибиотикам.

Патогенез и характеристика заболевания

Туляремия – зоонозное природно-очаговое особо опасное заболевание, протекающее с явлениями лимфаденита, лихорадкой, интоксикацией с последующей генерализацией и поражением внутренних органов.

Источниками инфекции являются еcтественные хозяева возбудителя – грызуны, хомяки, зайцы, домашние мыши, крысы, животные.

Основные пути передачи: контактный – при контакте с больными животными или их трупами; алиментарный – через воду и продукты, инфицированные возбудителем. Возможна передача клещами, комарами, которые являются переносчиками. От больного человека возможно заражение только при вторичной бубонной форме.

Инфекционная доза при туляремии минимальна, особенно при ингаляционном заражении (10-50 микробных клеток).

Входные ворота: кожа, конъюнктива глаз, слизистая ротовой полости, носа, пищеварительного тракта. Возбудитель обладает высокой инвазивностью, поэтому возможно его проникновение через неповрежденную кожу.

Инкубационный период обычно составляет всего 3-6 дней.

Заболевание начинается остро, с озноба и лихорадки. У входных ворот часто появляется местная реакция в виде язвы.

Далее возбудитель попадает в лимфу, лимфатические узлы, проникает в фагоциты и размножается в них, после чего поступает в кровь. Макрофаги служат резервуаром бактерий и средством их распространения.

В очагах скопления возбудителя образуются специфические туляремийные гранулёмы, т.е. первичные бубоны. При дальнейшем распространении возбудителя могут появляться вторичные бубоны. Бактерицидные факторы крови действуют на возбудителя, он разрушается, высвобождается эндотоксин, который способствует появлению реактивных проявлений со стороны внутренних органов и тканей, развивается ГЧЗТ.

Клинические формы: бубонная (ангинозно-бубонная, глазобубонная, язвенно-бубонная); легочная форма – результат гематогенного заноса возбудителя или при заражении от больного человека воздушно-капельным путём; генерализованная форма – чаще при заражении алиментарным путём, её называют ещё тифоидной туляремией; абортивная или желудочно-кишечная форма – язвенные очаги в желудочно-кишечном тракте и специфическое воспаление брыжеечных лимфатических узлов, лихорадка, диарея, возможны желудочно-кишечные кровотечения.

Наиболее опасными являются легочная и генерализованная формы болезни, летальность при которых составляет 30-60%. При наиболее частых локальных формах летальность не превышает 3%.

В связи с устойчивостью во внешней среде, высокой инвазивной способностью, минимальной инфекционной дозой с развитием тяжелой генерализованной инфекции, туляремийные возбудители могут являться потенциальным средством биотерроризма, а само заболевание относится к особо опасным инфекциям.

Иммунитет

Иммунный ответ при заболевании развивается преимущественно по клеточному типу, ведущую роль в защите играют сенсибилизированные Т-лимфоциты и макрофаги.

Лабораторная диагностика

Основным методом при установлении диагноза туляремии является серологическая диагностика. Начиная со второй недели заболевания ставят реакцию агглютинации или РПГА. Диагностический титр 1:100-1:200. Необходимо проверять титр антител в динамике в реакции с парными сыворотками.

Применяют аллергический метод – пробу с аллергеном тулярином (взвесь возбудителя, убитого нагреванием при температуре 70⁰С, вводят 0,1 мл – 100 млн микробных тел). Реакция положительна с 3-4 дня заболевания (ГЧЗТ).

Для выявления антигена в исследуемом материале используют РИФ, ИФА, реакцию преципитации.

Бактериологический метод проводят в специализированных лабораториях с соблюдением мер биобезопасности, так как франциселлы относятся ко II группе патогенности микроорганизмов.

Первые генерации возбудителя растут очень медленно и скудно, поэтому лучше использовать биобактериологический метод. При этом заражают морских свинок или белых мышей, через 10-15 дней они гибнут. Трупный материал засевают на кровяной агар с глюкозой и цистином или на яичные среды. Наблюдается рост через 2-3 недели. Идентификацию культуры проводят по биохимическим, антигенным и культуральным свойствам. Выделить возбудителя можно и в желточном мешке куриного эмбриона. Идентификацию проводят в РИФ со специфическими сыворотками.

Лечение

Препаратами выбора в лечении туляремии являются антибиотики группы аминогликозидов (гентамицин, амикацин) или фторхинолоны.

Профилактика

Специфическую профилактику проводят живой вакциной Б.Я. Эльберта и Н.А. Гайского в эндемических районах лицам из группы риска (например, сотрудникам специализированных лабораторий). Длительность иммунитета составляет 1-2 года.

Неспецифическая профилактика включает меры по дератизации в эндемических районах, санитарный контроль за водными источниками, продовольственными складами, санитарно-просветительную работу среди населения.