- •Введение
- •Методы прижизненной диагностики гельминтозов
- •I. Гельминтоскопия
- •Макроскопическое исследование
- •2. Микроскопическое исследование:
- •II. Гельминтоовоскопия
- •1. Метод нативного мазка.
- •2. Метод последовательного промывания (метод осаждения).
- •3. Флотационные методы
- •Метод Щербовича.
- •4. Методика диагностики описторхоза плотоядных( метод Котельникова)
- •5. Метод седиментации с последовательным промыванием.
- •6. Метод седиментации с целлофановыми пленками (по г.А. Котельниковому и в.М. Хренову).
- •7. Метод соскоба с перианальных складок.
- •III. Количественные гельминтоовоскопические исследования.
- •1. Метод Столла.
- •2. Метод Акбаева.
- •IV. Гельминтоларвоскопия
- •1. Метод Бермана и Орлова.
- •2. Метод Вайда.
- •3. Метод культивирования личинок.
- •V. Культивирование яиц некоторых гельминтов и принудительное получение личинок для учебных целей
- •1. Получение онкосфер мониезий.
- •2. Культивирование яиц фасциол и получение мирацидиев.
- •3. Культивирование яиц параскарид лошадей и получение личинок
- •ViСпециальные диагностические исследования
- •1. Исследование мочи.
- •2. Исследование молока для выявления личинок нематод.
- •VII. Методы гельминтоларвоскопии тканей
- •VIII. Иммунобиологическая диагностика
- •IX. Диагностическая дегельминтизация
- •Рекомендуемая литература
- •Содержание
2. Метод Акбаева.
Данная методика подсчета яиц и мертвых личинок гельминтов -наиболее проста и достаточно точна. Для этой цели легко изготовляется сетка из фотопленки после рентгеновских снимков. Для приготовления сетки нужны офицерская линейка, циркуль или обыкновенные иглы и лезвие безопасной бритвы. Сначала с пленки смывают эмульсию, затем четырехугольник линейки размером 40×17 мм размещают на куске пленки, иглой наносят едва заметные точки на расстоянии 1,6 мм друг от друга, с помощью линейки лезвием чертим 11 горизонтальных и 26 вертикальных линий, которые иглой нумеруют по краю сетки.
Пленку с сеткой вырезают по размеру предметного стекла и приклеивают канадским бальзамом начерченной сеткой вверх. После высыхания бальзама сетка готова к длительному употреблению. После энергичного встряхивания из осадка пипеткой с отпиленным кончиком набирают 0,1 мл взвеси и наносят на сетку. Взвесь накрывают тонким предметным стеклом (толщина 1мм), укорочена 1 см. Обнаруженное количество яиц и личинок умножают на весь объем, осадка в миллиметрах, что составляет количественное выражение изучаемой массы фекалий.
IV. Гельминтоларвоскопия
Гельминтоларвоскопия (от латинского larva-личинка) - это комплекс приемов и исследований проб фекалий, тканей и органов с целью обнаружения личинок и установления по ним возбудителей болезни.
Данный метод может быть применен для диагностики тех гельминтов, при которых в организме животных паразитируют личинки (личинки аскарид в легких при остром аскаридозе, личинки стронгилит в подслизистой желудка и кишечника), микроонхоцерки (в коже крупного рогатого скота) либо выделяются наружу с фекалиями (при диктиокаулезе и мюллериозе), слезой (при телязиозе), молоком (при стронгилондозе, неоскаридозе). Принципы заключаются в том, что личинки нематод, обладая свойством термотаксиса, в теплой воде (37-38о С) быстрее освобождаются из толщи фекалий или ткани и падают на дно посуды.
1. Метод Бермана и Орлова.
Впервые метод был предложен Берманом для выявления личинок свободноживущих нематод. Позже этот метод использовал И.В. Орлов для диагностики диктеокаулезов животных. Метод Бермана и Орлова применяют для диагностики легочных и кишечных (после выхода из яиц) нематодозов и т.д.
Для этого пробы фекалий (10-20 г) помещают на сетку или марлю, не туго натянутую на верхний край воронки, которая прикрепляется к штативу. На конец воронки надевают резиновую трубку с пробиркой. Затем в воронку наливают воду (37-38о С) так, чтобы масса фекалий находилась в воде, и оставляют при комнатной температуре на 3-6 часов (фекалии овец) и на 6-12 часов (фекалии лошадей и КРС). По истечению времени резиновую трубку осторожно отсоединяют от воронки, сливают воду из каждой пробирки до осадка, а осадок микроскопируют.
Упрощенная модификация метода Бермана (по Щильникову).
В стаканчики с водой кладут пробы, завернутые в марлевые салфетки. Через 3-6 часов пробы вынимают, жидкость отстаивают 10-15 мин, после чего стаканчики наклоняют и из них пипеткой отсасывают прозрачный слой воды, пока не начнет всасываться осадок. Затем капли осадка пипеткой наносят на предметное стекло для микроскопии. Пипетку после взятия каждой пробы тщательно промывают водой в двух банках (воду в банках меняют после исследования 50 проб).