VII. Методы гельминтоларвоскопии тканей

1. Исследование крови по Фюллеборну.

Из яремной вены берут кровь в пробирку и отстаивают. Полученную сыворотку центрифугируют 10 мин, затем осадок каплями исследуют под микроскопом.

2. Исследование крови по Куликову.

Из яремной вены набирают 20 мл крови и добавляют 2 мл 3,8 %-го водного раствора лимоннокислого натрия и отстаивают в течении 20-25 мин. При отстаивании образуются три слоя: нижний - осевшие эритроциты, средний - лейкоциты и личинки нематод и верхний – сыворотка. Тонкой пипеткой берут содержимое среднего слоя, наносят его каплями на предметное стекло, накрывают покровным и просматривают под микроскопом.

3. Исследование кожи крупного рогатого скота по Стюарду (с дополнениями по М.П. Гнединой).

На 1 см² брюшной стенки животного удаляют волосы, а место это дезинфицируют. Затем пинцетом оттягивают кожу и отрезают кривыми ножницами поверхностный слой его объемом 3×3×2 мм. Кусочек кожи помещают на предметное стекло в каплю физиологического раствора и тщательно расщепляют препаровальными иглами. Частицы удаляют, а жидкость исследуют под микроскопом.

4. Исследование кожи лошадей по Р.С. Чеботареву.

На холке, плече, передних конечностях выбривают участок кожи размером 5 см² и дезинфицируют его спиртом. После этого кожу захватывают в складку и бритвой или ножницами отрезают кусочек толщиной 3-4 мм и площадью 2-3 см³. Срезы помещают в пробирку, заливают 2-3 мл физиологического раствора (можно смешанного пополам с сывороткой) и оставляют на несколько часов в термостате при 36-37^о С или при комнатной температуре. Затем содержимое пробирки выливают на часовое стекло и исследуют под микроскопом с целью обнаружения личинок онхоцерк.

VIII. Иммунобиологическая диагностика

Иммунологические методы диагностики гельминтозов, безусловно, к прогрессивным разработкам. Тем не менее, в условиях производства они не налили широкого применения. Объективных причин много, и они связаны с большой трудоемкостью и низкой эффективностью. К данному времени отсутствуют совершенные разработки биотехнологии приготовления чистых и специфичных антигенов, применение которых превысило бы результативность реакций.

Несмотря на это, при отдельных заболеваниях существуют многие разновидности серологических исследований, дающих положительные результаты. Появление иммуноферментных методов диагностики в медицине и ветеринарии сделало реальным осуществление поиска антигена и антител в биологических жидкостях при различных гельминтозах. Иммуноферментный метод имеет ряд преимуществ по сравнению с РНГА, РИД, РГА и др., превосходит их по чувствительности в 100 раз и более.

В ветеринарной практике разработан простой аллергический метод диагностики эхинококкоза (реакция Кацони) и ценуроза рогатого скота.

В качестве антигена используют стерильно полученную жидкость из соответствующего пузыря. Принцип состоит в том, что у больных сенсибилизированных животных в месте введения (внутрикожно) антигена в течение 6-7 ч, возникает аллергическая реакция различной степени, оцениваемая как положительная, сомнительная или отрицательная.

Серьезное внимание уделяют разработке серологических реакций, при которых в качестве антигена используют живых личинок нематод, трематод и цестод, внося их в сыворотку крови больных животных. По данному принципу ставят реакции микропреципитации и сколексопреципитации, в результате которых преципитины в течении 24 ч концентрируются вокруг ротового (на хоботке или сколексе) и полового отверстий личинок гельминтов.