8. Оценка результатов фаготипирования стафилококка

Результаты фаготипирования регистрируют с учетом степени лизиса по четырехкрестной системе: + + + + сливной (полный) лизис +++ полусливной (незначительный) лизис, рост культуры в зоне лизиса + + наличие в месте нанесения капли фага свыше 50 колоний фага (пятен лизиса) + от 20 до 50 колоний фага ± менее 20 колоний фага — полное отсутствие лизиса Для упрощения схемы учета степеней лизиса обозначения +'+ + +, + ++ и ++ относят к «сильным реакциям» и выражают + +. Штаммы стафилококка считаются типирован-ными, если хотя бы один фаг вызвал явления лизиса на + - К Более слабые степени лизиса не учитывают. Следовательно, если при первичном типировании штамма (1 ТР) один или несколько фагов дали лизис на +, такие штаммы следует типировать повторно 100 ТР. Если при повторном типировании штамма имеет место лизис на +, такие штаммы считают нетипируемыми.

При регистрации результатов типирования против каждого исследованного штамма записывают: номер фага, давшего лизис на ++, а также степень разведения фага (1 ТР и 100 ТР). В скобках можно отметить номер фагов, давших лизис на + или ±. Учет такого лизиса, не являясь достаточно показательным для характеристики штамма, может, однако, помочь установлению идентичности нескольких штаммов, что «меет значение при эпидемиологическом обследовании. Штаммы стафилококков лизируются чаще всего не одним, а несколькими фагами, что дает для каждого штамма характерную фагомозаику. В зависимости от фагов штаммы стафилококков могут относиться к какой-либо одной (I, II, Ш или IV) группе или к смешанным группам (например, I и III). Определение энтеротоксина стафилококков. Штаммы стафилококков, выделенные при пищевых отравлениях, испытывают на наличие энтеротоксина следующим образом. Одну петлю суточной агаровой культуры стафилококка вносят в колбу, содержащую 50 мл питательной среды, предназначенной специально для накопления стафилококкового энтеротоксина (рец. 64). Колбу помещают в эксикатор, в котором воздух замещен 20% углекислотой.

Для этого на дно сосуда емкостью 2 л насыпают 2 г двууглекислой соды. Крышку эксикатора смещают по ранту, смазанному смесью вазелина с ланолином в отношении 1 : 1 так, чтобы осталась небольшая щель, через которую можно ввести пипетку и влить в соду 17 мл 10% серной кислоты. После этого крышку плотно притирают к эксикатору. Посевы инкубируют в термостате при 37°С, ежедневно насыщая среду эксикатора новой порцией углекислоты. На 4-й день колбу с засеянной средой вынимают из термостата и содержимое ее фильтруют через мембранные фильтры № 3 или 4 (см. с. 24). Полученный фильтрат в количестве 10—15 мл смешивают с равным количеством теплого молока и скармливают котятам 4—8-недельного возраста с массой тела 350—600 г. При наличии энтеротоксина в исследуемом фильтрате спустя несколько минут после приема его котята начинают проявлять беспокойство, а через 1—3 ч возникают симптомы гастроэнтерита: многократный понос с выделением испражнений слизистого характера, в редких случаях с примесью крови, рвота. Понос, являясь обязательным симптомом стафилококковой интоксикации, продолжается иногда в течение 2—3 дней; в тяжелых случаях котята погибают. Определение стафилококкового антитоксина в сыворотке - крови. Многие заболевания стафилококковой этиологии, особенно с глубокой локализацией патологического очага (остеомиелиты, септикопиемические процессы), сопровождаются постоянным поступлением больших количеств стафилококкового антигена в русло крови, стимулируя тем самым формирование специфических антител, одним из которых является стафилококковый антитоксин, нейтрализующий гемолитические свойства стафилококкового токсина. У здоровых людей, так же как у лиц, перенесших стафилококковую инфекцию кожных покровов или гнойное хирургическое заболевание, титр стафилококкового антитоксина не превышает 2 АЕ.