культивирование отобранного материала на питательной среде в присутствии ФГА (фитогемагглютинин) в течение 3 суток в термостате при температуре 37 градусов.
разрушение веретена деления добавлением колхицина, чтобы остановить митоз на стадии метафазы.
нанесение взвеси культуры на предметные стекла и подвергают гипотоническому шоку, происходит рассосредоточение хромосом.
фиксация препарата смесью этанола и уксусной кислоты.
окрашивание (рутинное – сплошное, дифференциальное – каждая хромосома приобретает определенный индивидуальный рисунок).
фотографирование и вырезка.
составление идиограммы. Идиограмма
– системное расположение хромосом в порядке убывания их размеров с учетом их формы.
идентификация полученной идиограммы с эталоном (Денверская номенклатура при рутинном окрашивании).
Денверская классификация хромосом предложена в 1960 году. По этой классификации все хромосомы делят на 7 групп.
Критерии: размер и форма.
1 (А) – 1-3 пары, самые крупные по размерам, 1 пара – метацентрическая, 2 и 3 пары – субметацентрические.
2 (В) – 4-5 пары. Крупные, субметацентрические.
3 (С) – 6-12 пары. Самая многочисленная группа. Средние размеры, субметацентрические. К группе относят Х хромосомы.
4 (D) – 13-15 пары. Средние размеры, акроцентрические, спутничные.
5 (Е) – 16-18 пары. Относительно маленькие, субмета- и метацентрические.
6 (F) – 19-20 пары. Маленькие, метацентрические.
7 (G) – 21-22 пары, самые маленькие, акроцентричные, спутничные + У хромосома.
Leland H.
Hartwell
(Fred Hutchinson
Cancer Research
Center, Seattle, WA,
USA)
R. Timothy Hunt
(Imperial Cancer
Research Fund,
London, United
Kingdom)
Sir Paul M.
Nurse
(Imperial Cancer
Research Fund,
London, United
Kingdom)