- •Билет 1 Современная аналитическая химия. Классификации биологических объектов. Методология получения биологического материала и экстракции биологических молекул и субклеточных структур
- •Принципы ямр-спектрометрии
- •Билет 2 Основные типы ямр-спектрометров
- •Билет 3 Центрифуги и их роторы.
- •Билет 4 Методы центрифугирования для разделения клеток, субклеточных структур и биологических молекул
- •Билет 5 Мембранные технологии разделения биологического материала
- •Билет 6 Хроматография. Классификация методов хроматографии
- •Основные методы рентгеновского анализа биологического материала
- •Билет 7 Общая схема и основные элементы конструкции газовых хроматографов
- •Современная рентгеновская томография
- •Билет 8 Общая схема и основные элементы конструкции жидкостных хроматографов
- •Билет 9 Основные хроматографические методы разделения и анализа биологических веществ
- •Масс-спектрометрия (идентификация молекулы по ее осколкам). Основные типы конструкции масс-спектрометров
- •Билет 10 Основные электрофоретические методы разделения и анализы биологических объектов
- •Основные способы ионизации молекул для их масс-спектрометрического анализа
- •Билет 11 Спектрометрия и классификация методов спектрометрии
- •Масс-спектрометрия биологических объектов
- •Билет 12 Спектрометрия видимого и ультрафиолетового спектра. Общая схема и основные элементы конструкции спектрофотометров для измерений в видимом и ультрафиолетовом диапазонах спектра
- •Изотопные и радиоизотопные методы в биохимии и биофизике
- •Билет 13 Спектрофлюоресцентные методы анализа. Общая схема и основные элементы конструкции спектрофлюориметров.
- •Биофизические основы современных методов анализа первичной структуры нуклеиновых и белковых молекул
- •Билет 14
- •Принципы микроскопии сверхвысокого разрешения
- •Билет 15 Фурье- спектрометрия. Основные типы ик-Фурье-спектрометров
- •Методы электронной микроскопии
- •Билет 16 Спектрометрия комбинационного рассеивания (Раман спектрометрия)
- •Оптические методы анализа клеточной и субклеточной структуры
- •Билет 17 Принципы эпр-спектромерии
- •Билет 18 Проблемы измерения и анализа в современных биохимических, молекулярно-биологических, медицинских и биотехнологических исследованиях
Билет 6 Хроматография. Классификация методов хроматографии
Хроматография («хромо» цвет, «графо» пишу)– это метод разделения и определения веществ, основанный на распределении компонентов между двумя фазами – подвижной и неподвижной. Неподвижной (стационарной) фазой служит твердое пористое вещество (часто его называют сорбентом) или пленка жидкости, нанесенная на твердое вещество. Подвижная фаза представляет собой жидкость или газ, протекающий через неподвижную фазу, иногда
под давлением. Различия в силе взаимодействия компонентов пробы с неподвижной фазой приводят к тому, что при достаточно большом времени движения компоненты разделяются. Предложена в 1906 г. М. С. Цветом, русским ботаником. Он использовал колоночную хроматографию для разделения цветных компонентов экстрагированных из листьев растений.
Классификация в соответствии с агрегатным состоянием: (табл)
Классификация по принципу:
элюционная |
через слой сорбента проходит элюент и периодически в слой сорбента вводится разделяемая смесь веществ. Происходит деление исходной смеси на чистые вещества, располагающиеся отдельными зонами на сорбенте, между которыми находятся зоны элюента |
фронтальная |
в слой сорбента непрерывно вводится разделяемая смесь, состоящая из газа-носителя и разделяемых компонентов. после начала процесса наименее сорбируемый компонент опережает остальные и выходит в виде зоны чистого вещества, а за ним в порядке сорбируемости располагаются зоны смесей компонентов. |
вытеснительная |
в сорбент вводится разделяемая смесь, а затем поток газа-носителя, содержащего вытеснитель (элюент), при движении которого смесь через некоторый период времени разделится на зоны чистых веществ, между которыми окажутся зоны их смеси |
Классификация по форме устройства:
Колоночная |
сорбентом заполняют специальные трубки — колонки, а подвижная фаза движется внутри колонки благодаря перепаду давления. |
Линейная плоскостная тонкослойная |
перемещение подвижной фазы происходит благодаря капиллярным силам.подразделяется на тонкослойную (тонкий слой гранулированного сорбента или пористая плёнка наносится на стеклянную или металлическую пластинки) и бумажную (используют специальную хроматографическую бумагу). |
Радиальная плоскостная |
заключается в том, что в центр пластинки наносится исследуемое вещество и туда же подается система, которая движется от центра к краю пластинки.1 |
Циклическая |
|
Классификация по природе взаимодействия, обусловливающего распределение компонентов между элюентом и неподвижной фазой:
адсорбционную |
основана на различии сорбируемости разделяемых веществ адсорбентом (твёрдое тело с развитой поверхностью); |
распределительную |
на разной растворимости компонентов смеси в неподвижной фазе (высококипящая жидкость, нанесённая на твёрдый макропористый носитель) и элюенте |
ионообменную |
на различии констант ионообменного равновесия между неподвижной фазой (ионитом) и компонентами разделяемой смеси |
эксклюзионную (молекулярно-ситовую) |
на разной проницаемости молекул компонентов в неподвижную фазу (высокопористый неионогенный гель) подразделяется на гель-проникающую (ГПХ), в которой элюент — неводный растворитель, и гель-фильтрацию, где элюент — вода. |
осадочную |
на различной способности разделяемых компонентов выпадать в осадок на твёрдой неподвижной фазе. |