БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

Кафедра микробиологии

Отчёт по производственной практике по специализации

студентки 5 курса 3 группы

Королени А.А.

Руководитель практики:

Прокулевич В.А.

Научный руководитель:

кандидат биологических наук, доцент

Фомина О.В.

Минск

2011

Введение

Производственная учебная практика проходила с 14.03.11 по 16.04.11 на базе кафедры микробиологии биологического факультета Белорусского государственного университета.

Целью практики являлось исследование хитиназной и хитозаназной активности коллекции актиномицетов.

Задачи:

1. Освоить методы и методику для выполнения экспериментального задания.

2. Исследовать хитиназную и хитозаназную активности актиномицетов.

Материалы и методы исследования

1. Объекты исследования

В работе были использованы 79 штаммов под порядковыми номерами 1.1-1.79, относящиеся к порядку Actinomycetales, выделенные ранее из почв в районе биологического факультета, памятника природы «Дубрава», дендрария БГУ, почв окрестностей городов Несвиж, Старые Дороги, Брест, Барановичи и деревни Щомыслица.

2. Среды и растворы

Полноценная жидкая питательная среда

Для приготовления жидкой питательной среды брали 15 г питательного бульона на 1 л дистиллированной воды. Автоклавировали 0,5 часа при 1,5 атм.

Овсяный агар (оа)

Овсяная мука 20 г

Дистиллированная вода 1 г

Агар-агар 20 г

Овсяную муку смешивали с дистиллированной водой и кипятили в течение 30 мин при 58 ⁰С, затем разливали по флаконам и добавляли агар-агар.

Устанавливали pH = 7,2

Стерилизовали автоклавированием 30 мин при давлении 1,5 атм.

Солевой концентрат 4х

NH₄Cl 20г

NH₄ NO₃ 4г

Na₂SO₄*10H₂O 8г

K₂HPO₄*3H₂O 15,7г

KH₂PO₄*3H₂O 5,6 г

MgSO₄*7H₂O 0,4г

Вода дистиллированная до 1 литра

Стерилизовали автоклавированием 30 мин при давлении 1,5 атм.

Водный агар

Агар-агар 20г

Вода дистиллированная до 1 литра

Стерилизовали автоклавированием 30 мин часа при давлении 1,5 атм.

Минимальная солевая среда

Водный агар 300 мл

Солевой концентрат 4х 100 мл

Среда с каллоидным хитином/хитозаном

Водный агар 150 мл

Питательный бульон 50 мл

Раствор каллоидного хитина/хитозана 35 мл

Солевой концентрат 4х 50 мл

Стерилизовали автоклавированием 30 мин часа при давлении 1,5 атм.

Раствор каллоидного хитина/хитозана (S.C. Hsu, J.L. Lockwood)

40 грамм хитина/хитозана мелко измельчали и вносили в ёмкость, в которую затем добавляли 400 мл концентрированной соляной кислоты и оставляли на 30-50 минут. После этого суспензию каллоидного хитина/хитозана добавляли в 2 литра воды при 5-10 ⁰С. После этого производили фильтрацию раствора несколько раз до конечного pH – 3,5. При этом сохранялось до 85% каллоидного хитина/хитозана. После производили автоклавирование на 1,5 атмосферы 30 минут.