Тема:

ВВЕДЕНИЕ В ЧАСТНУЮ МЕДИЦИНСКУЮ МИКРОБИОЛОГИЮ. ПИОГЕННЫЕ КОККИ.

(слайд 1)

Лекция по медицинской микробиологии для студентов II курса лечебного факультета

1. Частная медицинская микробиология. Объекты исследования и задачи.

2. Систематическое положение и классификация патогенных для человека кокков.

3. Стафилококки: биологические свойства и факторы патогенности. Стафилококковые инфекции и их микробиологическая диагностика.

4. Стрептококки и энтерококки: общая характеристика, роль в патологии человека, микробиологическая диагностика заболеваний. (слайд 2)

Задачи частной медицинской микробиологии: (слайд 3)

1. Изучение биологических свойств возбудителей инфекционных заболеваний человека (основных).

2. Изучение их взаимодействия с макроорганизмом и механизмов развития инфекционного процесса.

3. Изучение механизмов развития невосприимчивости к инфекционному заболеванию.

4. Освоение методов микробиологической диагностики, специфической профилактики и терапии инфекционных заболеваний.

Информацию о микробиологии любого инфекционного заболевания следует излагать по следующей схеме (слайд 4):

1. Характеристика заболевания.

2. Таксономия возбудителя заболевания.

3. Морфология и тинкториальные свойства.

4. Биологические свойства.

5. Ферментативная активность.

6. (слайд 5) Антигены.

7. Факторы патогенности.

8. Экология и распространение.

9. Эпидемиология, патогенез, клиника заболевания (особенности).

10. Лабораторная диагностика – методы.

11. Специфическая профилактика и терапия.

Гнойно-септические инфекции (ГСИ) – (слайд 6) полиэтиологические заболевания, характеризующиеся переходом местных нагноительных воспалительных процессов в генерализованной инфекции – сепсис (септицемию).

ОСНОВНЫЕ ВОЗБУДИТЕЛИ ГСИ (слайд 7)

Бактерии Грибы

(р. Candida и др.)

А эробы и факультативные Облигаторные анаэробы

а наэробы (р.Clostridium,р.Bacteroides)

Грамположительные кокки Грамотрицательные палочки

(р.Staphylococcus, р.Streptococcus) (многие роды семейства

Еnterobacteriaceae,p.Pseudomonas,

p.Acinetobacter и др.)

В 70-80% возбудителями ГСИ (слайд 8) являются пиогенные кокки.

ПИОГЕННЫЕ (ГНОЕРОДНЫЕ) КОККИ (слайд 9)

ПИОГЕННЫЕ (ГНОЕРОДНЫЕ) КОККИ – микроорганизмы разных таксономических групп, объединенных, прежде всего, по морфологическому признаку:

1) имеют шарообразную или близкую к ней форму;

2) все они могут быть возбудителями нагноительно-воспалительных процессов и сепсиса (септицемии), т. е. ГСИ.

ПИОГЕННЫЕ КОККИ (слайд 10) ВХОДЯТ В СЛЕДУЮЩИЕ СЕМЕЙСТВА

• MICROCOCCACEAE

• STREPTOCOCCACEAE

• PEPTOCOCCACEAE

• NEISSERIACEAE

СТАФИЛОКОККИ (слайд 11).

Таксономия: (слайд 12)

Царство: Procaryota;

Отдел: Firmicutes;

Семейство:Micrococcaceae;

Род Staphylococcys (типовой), Micrococcus, Planococcus, Stomatococcus.

Род Staphylococcys включает около 30 видов. Доминируют 3 вида: St. aureus, St. epidermidis, St. saprophyticus.

Морфология и биологические свойства.

Морфология (слайд 13): Staphyle – виноградная гроздь. Шарообразной формы, диаметр 0,6 – 1 мкм, неподвижный, спор не имеет, капсула формируется лишь в условиях организма (индуцибельный фактор). Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грам+.

Культуральные свойства (по схеме): хемоорганотроф, по типу дыхания - факультативный анаэроб, не прихотлив к питательным средам и условиям культивирования. Растет на простых питательных средах: МПБ – диффузное помутнение, МПА – колонии диаметром 2-4 мм, пигментированные (золотистого, лимонно-желтого или белого цвета). Пигмент – каротиноид, не растворим в воде, растворим в спирту, бензине, хлороформе. Синтезируется лучше на свету, при комнатной температуре, дополнительной аэрации на плотных питательных средах с молоком, картофелем или глицерином.

Пигментообразование: у St. aureus пигмент золотистый, у St. saprophyticus – лимонно-желтый, St. epidermidis – лимонно-желтый или белый.

Температурный диапазон роста 6 – 46⁰ С, оптимальная - 35 – 37⁰ С, рН 4,2 - 9,3, оптимум 7,2.

Галотолерантный (устойчив к высоким концентрациям солей), большинство штаммов растет в присутствии 15% NaCl, сахарозы – до 40%, желчных кислот – до 40%.

Питательные среды для культивирования стафилококков (слайд 14)

1. МПА, МПБ;

2. Кровяной МПА с 5% бараньих или кроличьих эритроцитов – альфа-гемолиз;

3. Солевой МПБ – накопительная среда ( МПБ+ 7-10 % NaCl);

4. Желточно-солевой агар – дополнительно содержит суспензию желтка куриного яйца (для определения лецитовителазы).

Биохимические свойства: (слайд 15)

Семейство Micrococcaceae оксидаза(-), каталаза(+) - признак дифференциации от семейства Streptococcaceae; последнее оксидаза(-), каталаза(-).

Сахаролитические гидролазы: лактоза, глюкоза, маннит, мальтоза, сахароза - ферментация до кислоты без газа.

Примечание: стафилококк глюкозу и маннит ферментирует как в аэробных, так и в анаэробных условиях (отличие от стрептококка); NH3+, H2S-, индол +, восстанавливает нитраты в нитриты, разжижает желатин воронкообразно.

Липолитические ферменты: фосфотаза, лецитовителаза.

Факторы вирулентности стафилококков: (слайд 16)

1. Структурные компоненты: микрокапсула, компоненты клеточной стенки - протеин А, тейхоевые кислоты, пептидогликан.

2. Ферменты агрессии: плазмокоагулаза, лецитиназа, гиалуронидаза, муромидаза, фибринолизин и др.

3. Токсины: гемолизины, лейкоцидин, эксфолиативный токсин, токсин синдрома токсического шока, энтеротоксин.

Возникновение пищевых отравлений стафилококковой природы связано с действием термостабильных энтеротоксинов (100⁰С-30 мин.), продуцируемых золотистыми стафилококками.

Экология и распространение. Стафилококки являются представителями микрофлоры кожи, слизистых полости рта, носоглотки, кишечника. Они постоянно выделяются из организма человека и могут быть обнаружены на предметах обихода, в воде, воздухе, почве.

Особую опасность представляет S. aureus как потенциально патогенный для человека микроорганизм.

Источник стафилококковой инфекции: больной человек, носитель.

Механизмы и пути передачи: воздушно-капельный, контактный, алиментарный, инъекционный.

Вызываемые заболевания. Стафилококки способны поражать практически все ткани организма и вызывать гнойно-воспалительные процессы различной локализации, раневую инфекцию, пищевые интоксикации.

При генерализации местных процессов возникает сепсис, септицемия (септикопиемия).

S. aureus может быть возбудителем внутрибольничных инфекций.

(слайд 17, слайд 18, слайд 19)

Микробиологическая диагностика.

Исследуемый материал: гной, слизь, мокрота, кровь, моча, ликвор и др.

I. Бактериоскопический метод. (слайд 20)

Микроскопия мазков, окрашенных по Граму – грамположительные кокки, в виде виноградных гроздей.

II. Бактериологический метод.

Этапы метода:

1. Посев на солевой бульон (среда накопления).

2. Посев на кровяной МПА – золотистые колонии с зоной α-гемолиза; ЖСА – колонии с радужным ореолом (положительная проба на лецитовиттеллазу). (слайд 21 - КА, слайд 22 - ЖСА)

3. Откол подозрительных колоний на косячок МПА с целью выделения чистой культуры.

4. Проверка чистоты выделенной культуры – микроскопия мазков, окрашенных по Граму (однородная популяция грамположительных гроздевидных кокков).

5. Постановка диагностических тестов: оксидаза (-), каталаза (+) – семейство Micrococcaceae; аэробное и анаэробное сбраживание глюкозы – род Staphylococcus; реакция на плазмокоагулазу (+/-), лецитовиттеллазу (+) – только у S. aureus.

6. Дифференцировка видов

Дифференцировка видов стафилоккоков (слайд 23)

Признак	виды
	S. aureus	S. epidermidis	S. saprophyticus
Плазмокоагулаза	+	-	-
Анаэробное сбраживание маннита	+	-	-
Окисление маннита	+	-	+
Чувствительность к новобиоцину	чувств.	нет	нет

(слайд 24) - РПК.

(слайд 25) – типы гемолиза.

(слайд 26) - St. epidermidis (гем. -) и St. aureus (гем. +)

(слайд 27) - окисление маннита

(слайд 28) – тест с новобиоцином

7. Внутривидовая дифференцировка. Определение антибиотикограммы и фаготипирование.

Иммунитет. Антимикробный, антитоксический, ненапряженный, непродолжительный, связан как с клеточными, так и гуморальными факторами.

Специфическая профилактика и терапия. Профилактика стафилоккоковых инфекций направлена на выявление микробоносителей золотистых стафилоккоков, главным образом, среди персонала хирургических отделений больниц и родовспомогательных учреждений и их санации. Для профилактики стафилоккоковых осложнений проводят активную иммунизацию стафилоккоковым анатоксином больных, накануне плановых хирургических операций, или беременных в конце беременности.

Для специфической терапии септических инфекци используют донорский антистафилоккоковый иммуноглобулин или антистафилоккоковую плазму.

При хронических инфекциях применяют стафилоккоковый анатоксин и/или стафилоккоковую аутовакцину с целью создания антитоксического и антимикробного иммунета.

Антибиотикотерапия стафилоккоковых инфекций проводится под контролем антибиотикограммы.

Пиогенные кокки. Стрептококк. (слайд 29)

Таксономия и классификация (слайд 30)

Царство: Procaryota;

Отдел: Firmicutes;

Семейство: Streptococcaceae;

Род: Streptococcus;

Виды: группа А – S. pyogenes; группа В – S. agalactiae; группа С – S. equisimilis; группа D (энтерококки) – S. faecalis, S. faecium, S. durans; группа G – S. anginosus. Не имеет группового антигена – S. salivarius, S. mitis, S. mutans, S. pneumoniae и др.

Морфология и тинкториальные свойства (слайд 31) Стрептокккоки овоидной формы, диаметр клетки около 1 мкм., неподвижны, аспорогенны, имеют капсулу. (слайд 32) S. pneumoniae в организме образует полисахаридную макрокапсулу.

В мазке располагаются в виде цепочек кокков.

Хорошо окрашиваются анилиновыми красителями, грамположительны.

Биологические свойства. Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. Требовательны к питательным средам. Мезофиллы.

Среды для культивирования: (слайд 33) сахарный МПБ, сахарный МПА, кровяной МПА, сывороточный МПА и сывороточный МПБ. На жидких питательных средах дают придонный или пристеночный рост; на кровяном МПА – мелкие, непигментированные колонии с зоной полного гемолиза (β- гемолиз у S. pyogenes) (слайд 34 – типы гемолиза); на 10% ЖСА роста не дают (отличие от стафилококка).

Биохимические свойства. Каталазоотрицательны. Оксидазоотрицательны. Ферментируют углеводы короткого пестрого ряда Гисса до кислоты; глюкозу и маннит – только в анаэробных условиях (отличие от стафилококка); не ферментируют инулин (отличие от пневмококка).

Антигены (классификация). (слайд 35) Классификация стрептококков по антигенной структуре разработана Р. Лэнсфилд. П полисахариду клеточной стенки (субстанция S) стрептококки разделяют на 20 серологических групп, обозначаемых заглавными буквами латинского алфавита от А до V. Внутри серогрупп по специфичности белковых антигенов М, Р и Т выделяют серовары. Серовары обозначают цифрами.

Классификация стрептококков по антигенной структуре

Группы стрептококков	Основные виды	Гемолиз	Серогруппы по Лэнсфилд	Вызываемые заболевания
Стрептококки группы А	S. pyogenes	β	A	тонзиллиты, скарлатина, рожа, ГСИ, ревматизм, гломерулонефрит
Стрептококки группы В	S. agalactiae	α/β	B	сепсис новорожденных, менингиты
Энтерококки	S. faecalis S. faecium	γ (нет гемолиза)	D	эндокардиты, ГСИ, пищевые токсикоинфекции
Пневмококки	S. pneumoniae	α	-	пневмонии, менингиты
Зеленящие стрептококки	S. sanguis S. mitis S. salivarius S. mutans	α	-	ГСИ (относительно редко) кариес

(слайд 36)