Федеральное агенство по образованИю

Белгородский государственный университет

Медицинский факультет

Лабораторный практикум по биологической химии

учебные указания к проведению лабораторных работ

по биологической химии для студентов второго курса

медицинского факультета

по специальностям: 060101 - Лечебное дело и 060103 - Педиатрия

БЕЛГОРОД 2006г

«___»___________20 г.

Напечатаны по решению редакционно-издательского совета университета

Составители:

Е.А.Шенцева, кандидат биологических наук,

Л.Р.Закирова, кандидат биологических наук.

Предисловие

Настоящие методические указания к проведению лабораторных работ по биологической химии написано сотрудниками кафедры биохимии и фармакологии Белгородского государственного университета доцентом Е.А.Шенцевой и старшим преподавателем Л.Р.Закировой. Методические указания составлены в полном соответствии с программой курса биологической химии, рекомендованной для студентов медицинских ВУЗов (Москва, 2000г.)

Методические указания содержат описание лабораторных работ по курсу биологической химии, выполняемых студентами II курса медицинского факультета на лабораторно-практических занятиях. В каждой лабораторной работе излагается краткая информация по изучаемой теме, принцип метода, ход эксперимента, советы по оформлению результатов и контрольные вопросы для закрепления изученного материала. Методические указания призваны помочь студенту овладеть на лабораторно-практических занятиях современными методами экспериментальных исследований, закрепить теоретические знания, приобретенные на лекциях, анализировать полученные результаты.

В основу методических указаний положен многолетний опыт проведения курса биологической химии на лабораторно-практических занятиях на кафедре биохимии и фармакологии Белгородского государственного университета.

Сотрудники кафедры будут признательны всем, кто пожелает высказать свои замечания, полезные советы и пожелания относительно содержания методических указаний.

Оглавление

биохимия простых белков 8

Лабораторная работа №1 8

Качественные цветные реакции на функциональные группы белков и аминокислот 8

Лабораторная работа №2 13

Реакции осаждения белков 13

биохимия Сложных белков (протеинов) 17

Лабораторная работа №3 18

Геминовая проба Тейхмана 18

Лабораторная работа №4 19

Выделение казеиногена из молока и открытие в нем фосфата 19

Лабораторная работа №5 20

Выделение муцина из слюны и открытие в нем углеводного компонента 20

биохимия ФЕРМЕНТов 21

Лабораторная работа №6 22

Количественное определение активности амилазы (по Вольгемуту) 22

Лабораторная работа №7 23

Специфичность действия амилазы слюны 23

Лабораторная работа №8 24

Влияние температуры на активность α-амилазы слюны 24

Лабораторная работа №9 25

Определение оптимума рН для действия α-амилазы слюны 25

Лабораторная работа №10 26

Влияние активаторов и ингибиторов на активность α-амилазы слюны 26

биохимия нуклеиновых кислот 27

Лабораторная работа №11 27

Кислотный гидролиз нуклеопротеинов дрожжей и определение состава нуклеиновых кислот 27

Изучение реакций окисления 28

Лабораторная работа №12 29

Открытие альдегиддегидрогеназы в молоке 29

Лабораторная работа №13 29

Обнаружение каталазы крови 29

Лабораторная работа №14 30

Открытие пероксидазы 30

Лабораторная работа №15 31

Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода 31

Обмен углеводов 32

Лабораторная работа №16 32

Определение глюкозы в крови (набором реактивов «Глюкоза-ФКД») 32

Биохимия липидов 34

Лабораторная работа №17 34

Эмульгирование триацилглицеридов желчными кислотами 34

Лабораторная работа №18 35

Качественная реакция Петтенкоффера на желчные кислоты 35

Лабораторная работа №19 35

Определение содержания β-липопротеинов (липопротеинов низкой плотности) в плазме крови 35

Лабораторная работа №20 36

Качественные реакции на холестерол 36

биохимия белков 38

Лабораторная работа №21 38

Качественный анализ желудочного сока 38

Лабораторная работа №22 39

Определение активности аспартатаминотрансферазы( аланинаминотрансферазы) по методу Райтмана-Френкеля(набором реагентов) 39

Лабораторная работа №23 41

Определение мочевины в крови по реакции с диацетилмонооксимом (набором реагентов) 41

биохимия гормонов 43

Лабораторная работа №24 43

Качественная реакция на адреналин 43

Лабораторная работа №25 44

Обнаружение йодтиронинов 44

Витамины 45

Лабораторная работа №27 45

Качественные реакции на витамины 45

Биохимия печени 51

Лабораторная работа №27 52

Качественное определение «прямого» и «непрямого» билирубина в сыворотке крови 52

Лабораторная работа №28 52

Количественное определение содержания билирубина и его фракций в сыворотке крови 52

Лабораторная работа №29 54

Тимоловая проба (проба коллоидоустойчивости) 54

Биохимия крови 56

Лабораторная работа №30 56

Определение общего белка в сыворотке крови биуретовым методом (набором реагентов) 56

БИОХИМИЯ мочи 58

Лабораторная работа №31 58

Качественные реакции на белок в моче 58

Определение глюкозы в моче 60

Качественные реакции на кровяные пигменты в моче 60

Качественная реакция на желчные пигменты в моче 61

Качественные реакции на ацетон и ацетоуксусную кислоту в моче 62

Качественная реакция на индикан в моче 63

Приложение 65

Техника безопасности при работе в биохимических лабораториях 65

Способы взятия крови 65

Множители и приставки, применяемые для обозначений кратных и дольных единиц 66

Фотоколориметрия 66

Разделение белков сыворотки методом электрофореза на бумаге 67

Метод сахарной нагрузки 68

Количественное определение кислотности желудочного сока 70

Экспресс-методы обнаружения патологических компонентов мочи с помощью комбинированных тест-полосок 71