- •Общая микробиология, вирусология и иммунология
- •Тема 1: Правила работы в микробиологической лаборатории. Мир микробов.
- •I. Вопросы для самоподготовки:
- •II. Базовый текст
- •1. Правила работы в учебной бактериологической лаборатории
- •2. Мир микробов. Особенности строения про- и эукариотической клетки
- •3. Систематика и номенклатура микроорганизмов
- •4. Морфология и ультраструктура бактериальной клетки
- •6. Микроскопический метод диагностики инфекционных заболеваний
- •7. Простые и сложные методы окраски
- •8. Механизмы окрасок по Граму и Цилю-Нильсену
- •III. План практической работы
- •IV. Примеры ситуационных задач
- •Тема 2: Специальные методы окраски. Устройство биологического микроскопа. Виды микроскопии. Порядок проведения иммерсионной микроскопии
- •2. Методы окраски отдельных групп про- и эукариот
- •3. Изучение подвижности микроорганизмов
- •4. Виды микроскопии
- •5. Устройство биологического микроскопа
- •6. Порядок проведения иммерсионной микроскопии
- •III. План практической работы
- •IV. Примеры ситуационных задач
- •Тема 3: Морфология и ультраструктура отдельных групп микроорганизмов: риккетсий, хламидий, микоплазм, актиномицет, спирохет, грибов, простейших
- •I. Вопросы для самоподготовки:
- •4. Спирохеты
- •5. Грибы
- •6. Простейшие
- •III. План практической работы
- •IV. Примеры ситуационных задач
- •Тема 1: Питательные среды. Стерилизация, асептика, антисептика,
- •I. Вопросы для самоподготовки:
- •II. Базовый текст
- •2. Классификация питательных сред
- •3. Асептика и антисептика
- •4. Дезинфекция, методы и контроль эффективности дезинфекции
- •6. Методы определения эффективности стерилизации
- •8. Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •9. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний
- •10. Техника посева микроорганизмов
- •11. Особенности культивирования анаэробных бактерий
- •IV. Примеры ситуационных задач
III. План практической работы
1. Изучить механизм и этапы окраски по Граму, приготовить мазок из смеси бактерий и окрасить по Граму, заполнить таблицу в рабочей тетради.
2. Изучить механизм и этапы окраски по Цилю-Нильсену, приготовить мазок из сапрофитных микобактерий, окрасить по Цилю-Нильсену, заполнить таблицу в рабочей тетради.
3. Сравнить строение прокариотической и эукариотической клетки по ряду признаков, заполнить таблицу в рабочей тетради.
4. Изучить и перечислить в таблице основные таксономические категории на примере С.tetani и Т.pallidum или других бактерий.
IV. Примеры ситуационных задач
Задача 1
Из мокроты больного приготовлен мазок и окрашен по методу Циля-Нильсена. При микроскопии с масляной иммерсией обнаружены длинные палочки, располагающиеся одиночно и окрашенные в красный цвет. Сформулируйте заключение микроскопического исследования:
1. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Mycobacterium
2. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы Staphilococcus
3. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы Streptococcus
4. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae
Задача 2
Из гноя больного приготовлен мазок и окрашен по методу Грама. При микроскопии с масляной иммерсией обнаружены кокки (шаровидные бактерии), располагающиеся в виде гроздьев винограда и окрашенные в фиолетовый цвет. Сформулируйте заключение микроскопического исследования:
1. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Mycobacterium
2. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Staphylococcus
3. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Streptococcus
4. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы семействаEnterobacteriaceae Задача 3
Из фекалий больного приготовлен мазок и окрашен по методу Грама. При микроскопии с иммерсией обнаружены одиночные палочки, окрашенные в красный цвет. Сформулируйте заключение микроскопического исследования:
1. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Mycobacterium
2. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Staphylococcus
3. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы рода Streptococcus
4. В исследуемом материале обнаружены микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae
Тема 2: Специальные методы окраски. Устройство биологического микроскопа. Виды микроскопии. Порядок проведения иммерсионной микроскопии
Цель занятия: знать различные методы окраски, используемые для выявления структур бактериальной клетки (спор, капсул, включений) и отдельных групп микроорганизмов; устройство биологического микроскопа и правила работы с ним; виды микроскопии (фазово-контрастная, люминесцентная, темнопольная, электронная); порядок проведения микроскопии с масляной " иммерсией; уметь выявлять наличие капсул у бактерий в препаратах, окрашенных методом Бурри-Гинса; выявлять наличие спор у бактерий в препаратах, окрашенных методом Ожешко; готовить препараты «раздавленной» и «висячей» капли из грибов и бактерий; определять подвижность у бактерий; определять включения бактерий (зерна волютина) в препаратах, окра-
шенных методом Леффлера; проводить микроскопию с масляной иммерсией.
тог
Задание на дом:
I. Вопросы для самоподготовки:
1. Специальные методы окраски для выявления отдельных структур бактериальной клетки (Бурри-Гинса, Ожешко, Леффлера).
2. Методы окраски отдельных групп про- и эукариот.
3. Изучение подвижности микроорганизмов.
4. Виды микроскопии (фазово-контрастная, люминесцентная, темнопольная, электронная). 2,
5. Устройство биологического микроскопа.
6. Порядок проведения иммерсионной микроскопии.
II. Базовый текст 4. 1. Специальные методы окраски для выявления отдельных структур бактерий. Метод Бурри-Гинса. Относится к сложным методам окраски и используется для выявления капсулы бактериальной клетки. Этапы окраски:
1. На предметном стекле смешать каплю взвеси микробных клеток с каплей туши, разведенной 1:10 и при помощи стекла со шлифованным краем сделать мазок таким же образом, как мазок крови, высушить и осторожно фиксировать в пламени горелки или горящим на мазке спиртом.
2. Нанести на мазок водный раствор фуксина на 1-2 мин.
3. Промыть водой, высушить на воздухе. Метод Бурри-Гинса относится к негативным методам окраски: на первом этапе тушь, обтекая капсульные бактерии, создает черный или коричневый фон (соответствующий цвету туши) на котором хорошо видны неокрашенные бактерии, которые на втором этапе окрашиваются в красный цвет, а капсула остается бесцветной. Таким образом, капсулы бактерий хорошо видны на темном фоне туши виде неокрашенных зон вокруг красных бактерий.
Метод Ожешко (Ауэски). Относится к сложным методам окраски и используется для выявления спор бактерий. Этапы окраски:
1. На нефиксированный мазок нанести 0,5% раствор хлористоводородной кислоты (НС1) и подогреть в течение 2-3 мин на пламени (для протравливания плотной оболочки споры) до полного испарения кислоты.
2. Окрасить по методу Циля-Нильсена.
Споры бактерий будут окрашиваться в красный цвет (как кислотоустойчивые бактерии), а
вегетативные формы в синий цвет (как некислотоустойчивые бактерии).
Метод Леффлера. Относится к простым методам окраски и используется для выявления
зерен волютина (цитоплазматических включений полифосфатов) у возбудителя дифтерии
(С.diphtheriae), у которого эти включения располагаются по полюсам клетки. Мазок окрашивают уксусно-кислым метиленовым синим в течение 3-5 минут. Зерна волютина
обладают свойством метахромазии и более интенсивно накапливают краситель — цитоплазма бактерий окрашена в голубой цвет, зерна волютина — в темно-синий.