- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
Гликоген - животный полисахарид, состоит из остатков глюкозы. В качестве энергетического (в основном) материала он откладывается в запас в органах и тканях. Самое большое его количество находится в печени (2-10%), которая считается депо гликогена, и мышцах (0,5-2%). Его распад происходит путем фосфоролиза (преимущественно в клетках) и гидролиза (в пищеварительном тракте). В последнем случае из гликогена образуются декстрины и мальтоза. Раствор йода окрашивает гликоген в красно-бурый цвет различной интенсивности и оттенков.
Ход опыта
В центрифужную пробирку (предварительно взвешена!) поместить 2 г печени, взятой у только что убитого животного (гликоген быстро подвергается ферментативному расщеплению), и залить ее 2 мл 60% раствора КОН. Поставить на 1 ч в кипящую водяную баню, перемешивая периодически ее содержимое стеклянной палочкой. Затем пробирку вынуть из бани, охладить водопроводной водой, влить в нее 10 мл этанола и поместить в емкость со льдам на 20-30 мин. Выпавший осадок гликогена отделить путем центрифугирования при 3000 об/мин в течение 5-10 мин. Надосадок слить, а осадок растворить в 2 мл 15% раствора КОН, добавить в него 10 мл этанола, вновь охладить и отделить также центрифугированием. Надосадок слить. Пробирку с осадком гликогена взвесить и, вычтя из (полученного показателя первоначальный вес пробирки, найти массу гликогена. После этого проделать качественную реакцию на гликоген, для чего осадок растворить в 5 мл дистиллированной воды и добавить к нему 1 каплю 1% раствора йода.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Выделить гликоген из печени и сделать вывод о его количестве в ткани этого органа.
3. Подтвердить наличие гликогена по реакции с йодом.
Вопросы для самоподготовки по теме 7
1. Основные углеводы (моно-, ди- и полисахариды), встречающиеся в организме, а также используемые в кормлении животных и питании человека (глюкоза, фруктоза, галактоза, мальтоза, лактоза, сахароза, крахмал, гликоген, клетчатка, гемицеллюлоза, лигнин, пектин). Их строение и роль в организме.
2. Переваривание и всасывание углеводов в организме животных и человека желудком (реакции, ферменты). Усвоение клетчатки, лигнина, пектина.
3. Химизм и энергетика спиртового, уксусно-кислого, пропионово-кислого, масляно-кислого, лимонно-кислого брожения. Условия протекания, возбудители.
4. Химизм и энергетика разложения клетчатки, древесины, лигнина и пектиновых веществ. Условия и возбудители.
5. Химизм и энергетика аэробного дыхания (окисление лактата, ацетата, пропионата, бутирата, этанола).
Тема 8. Липиды и их обмен
К липидам относятся природные органические соединения, нерастворимые в воде, а растворимые в неполярных органических растворителях (хлороформе, эфире, бензоле и др.).
Липиды выполняют в организме важнейшие биологические функции: они входят в состав клеточных мембран, играют важную роль в функционировании нервной системы, являются запасными веществами, в форме которых депонируется метаболическое топливо, выполняют защитную роль. Некоторые из этих веществ выполняют функции светочувствительных пигментов, гормонов и т.д.
Липиды подразделяются по химическому строению на следующие группы:
1. Жирные кислоты. 2. Триацилглицеролы. З. Воска.
4. Фосфоглицериды: а)фосфатидилэтаноламин; б) фосфати- дилхолин; в) фосфатидилсерин; г) фосфатидилинозитол; д) кардио- липин. 5. Сфинголипиды: а) сфингомиелин; б) цереброзиды; в) ган- глиозиды. 6. Терпены, стеролы и их эфиры с жирными кислотами.
Триацилглицеролы (нейтральные жиры)
Жиры – сложные эфиры глицерина и высокомолекулярных жирных кислот.
В состав жиров входят многочисленные предельные (или насыщенные) и непредельные (или ненасыщенные) жирные кислоты. Среди предельных кислот чаще встречаются стеариновая (С17Н35СООН) и пальмитиновая (С15Н31СООН). Из непредельных жирных кислот основная роль принадлежит олеиновой (С17Н33СООН), линолевой (С17Н31СООН) и линоленовой (С17Н29СООН), большое физиологическое значение имеет также арахидоновая (С19Н31СООН) кислота. Непредельные жирные кислоты характеризуются наличием двойных связей: в молекуле олеиновой кислоты содержится одна двойная связь, в молекуле линолевой – две, линоленовой – три, арахидоновой – четыре. Благодаря наличию двойных связей непредельные кислоты отличаются высокой реакционной способностью. Линолевая, линоленовая и арахидоновая (так называемые полиненасыщенные) кислоты не синтезируются в организме человека и животных должны поступать с пищей или кормом. Недостаток этих кислот в пище вызывает серьёзные нарушения обмена веществ, исчезающие при потреблении продуктов, в состав которых входят непредельные жирные кислоты. Поэтому указанные соединения относят к веществам, обладающим витаминным действием (витамин F). Линолевая и линоленовая кислоты содержаться в растительных маслах (льняном, подсолнечном и др.), арахидоновая кислота – в печеночных жирах рыб, сливочном масле, некоторых видах маргарина и свином сале.
В состав масел некоторых тропических растений входят также циклические жирные кислоты (хаульмугровая, гиднокарповая и др.).