- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
Витамин А (ретинол, антиксерофтальмический витамин) находится главным образом в рыбьем жире, печени, желтке, яиц, сливочном масле. В растениях обнаружены его предшественники (провитамины) - каротины, при гидролизе которых в организме из них образуется витамин А.
Проба с H2SO4. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло, подсолнечное масло и препарат витамина А - по 2 капли. Добавить в каждую пробирку под вытяжным шкафом по 1 мл хлороформа. Перемешать и очень (!) осторожно внести по 1 капле концентрированной H2SO4. Появление красно-фиолетового окрашивания, переходящего в красно-бурое, свидетельствует о наличии витамина А в пробе.
Проба с треххлористой сурьмой. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло, подсолнечное масло и препарат витамина А - по 2 капли. Добавить в каждую под вытяжным шкафом около 1 мл 33% хлороформного раствора сурьмы. Появление синего окрашивания свидетельствует о наличии ретинола.
Задание: 1. Выполнить опыт-пробу с H2SO4 или с треххлористой сурьмой.
2. Определить ретинол в вазелиновом, подсолнечном масле и препарате витамина А и сделать вывод о его наличии в них.
3. Указать практическое значение качественных проб на витамин А.
4. Написать схему образования из -каротина ретинола и отметить биороль последнего.
Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
Витамин Д (кальциферол, антирахитический витамин) содержится в рыбьем жире, печени, желтке яиц, сливочном масле. В клетках кожи человека и животных он образуется под действием ультрафиолетовых лучей из провитаминов - 7-дегидрохолестерола (витамин Д3).
Бромхлороформная проба. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло и препарат витамина Д - по 2 капли и по 2 капли (под вытяжным шкафом) раствора брома в хлороформе (1:60).
При наличии витамина Д3 появляется зеленовато-голубая окраска раствора.
Анилиновая проба. В три сухие пробирки внести соответственно вазелиновое масло, подсолнечное масло и препарат витамина Д - по 2 капли. Добавить в каждую пробу по 10 капель хлороформа и по 1 капле анилинового реактива (15 частей анилина + 1 часть концентрированной НCl). Очень осторожно нагреть. При наличии витамина Д желтая эмульсия приобретает красный цвет.
Задание: 1. Выполнить опыт с бромхлороформной или анилиновой пробой.
2. Определить кальциферол в вазелиновом, подсолнечном масле и препарате витамина Д3, сделать заключение о его наличии в них.
3. Указать прикладное значение качественных проб на витамин Д3.
4. Написать схемы образования витаминов Д2 и Д3 из их провитаминов и отметить биороль кальциферолов.
Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
Витамин С (аскорбиновая кислота, антицинготный витамин) синтезируется в организме животных (кроме морской свинки, обезьяны и человека). Животные и человек испытывают большую необходимость в витамине во время беременности, при различных заболеваниях и т.д. В этих случаях особенно, как и вообще, потребности в нем организма должны покрываться за счет его поступления с растительной пищей.
Ход опыта
Взять кусочек растительного материала (лист капусты, картофель и т. д.), растереть его в ступке. Залить дистиллированной водой. Перемешать. Отфильтровать. Налить в 1-ю пробирку (контроль) 1 мл дистиллированной воды, во 2, 3 и 4-ю - по 1 мл фильтрата. В 3-ю добавить 0,1 н раствора НСl, а в 4-ю - 5 капель 0,1 н раствора NaOH, обе прокипятить и охладить водопроводной водой. Затем в каждую пробирку внести по 1 капле свежеприготовленного 1% раствора красной кровяной соли – К3Fе(СN)6 и по 1 капле 1% раствора FеС13.
При наличии витамина С в пробе появляется синее окрашивание, а при стоянии образуется осадок берлинской лазури.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Определить и сделать вывод, есть ли витамин С в исследуемом материале.
3. Как влияют высокая температура и реакция среды на сохранность аскорбиновой кислоты?
4. Написать строение витамина С и схему его разложения.