- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
Коагуляция — это уменьшение степени дисперсности коллоидных частиц под действием физико-химических факторов. При этом частицы дисперсной фазы становятся в диаметре больше 150 нм, т. е. они переходят в зону грубых растворов.
Причины коагуляции - ионы электролитов, рН, температура, радиация и др.
Ход опыта
В три колбочки налить по 10 мл золя железа. Затем в каждую колбочку добавить из соответствующей бюретки по каплям раствор электролита до исчезновения блеска коллоидного раствора. Количество мл израсходованного электролита записать в таблицу.
Задание: 1. Зная заряд коллоидных частиц сделать вывод 1-й, какие ионы электролитов вызвали коагуляцию.
2. На основе полученных в опыте данных определить, сколько мл каждого из электролитов было бы израсходовано на коагуляцию, если бы концентрация их была 0,001 М?
Таблица 1
№ опыта |
Электролит коагулянт |
Концентрация электролита,М |
Расход электролита на коагуляцию, мл |
|
Исходной концентрации |
Впересчете на 0,001 М |
|||
1 |
NaCl |
6 |
|
|
2 |
Na2SO4 |
0,005 |
|
|
3 |
K3Fe (CN)6 |
0,001 |
|
|
3. Опираясь на 1-й вывод и найденные в расчетах величины расхода 0,001 М электролитов, доказать, почему на коагуляцию одинакового объема коллоида их пошло разное количество.
4. Указать стадии и признаки коагуляции.
Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
Отличительной чертой коллоидных систем является их неустойчивость, ведущая во многих случаях к выделению осадков. При этом осадки имеют химический состав дисперсной фазы. Причиной неустойчивости золей является непостоянство их дисперсности.
При добавлении к такому раствору электролита коллоидные частицы теряют заряд и происходит коагуляция суспензоидов.
Эмульсоиды, в отличие от суспензоидов, более устойчивы, так как обладают двумя факторами устойчивости:
1) зарядом частиц,
2) водной оболочкой частиц.
Для коагуляции гидрофильных коллоидов необходимо, кроме нейтрализации заряда частиц, разрушить окружающую их водную оболочку добавлением водоотнимающих средств (спирта, ацетона, танина). Водоотнимающие вещества, разрушая водную оболочку гидрофильных частиц, превращают их в гидрофобные, после чего, происходит процесс коагуляции в присутствии электролита.
Прибавление гидрофильного золя к гидрофобному повышает устойчивость последнего по отношению к электролитам вследствие адсорбции гидрофильных частиц на поверхности гидрофобных — защитное действие. Гидрофильные коллоиды при этом как бы передают свои свойства гидрофобным частицам.
Белок
Различные гидрофильные коллоиды обладают различной защищающей способностью, поэтому возникла необходимость определения их защитной силы. Мерой защитного действия является золотое число.
«Золотое число» есть минимальное количество миллиграммов cуxoгo гидрофильного вещества, которое нужно прибавить к 10 мл коллоидного раствора золота, чтобы задержать переход красного цвета этого золя в фиолетовый под действием 1 мл 10%-ного раствора поваренной соли.
«Золотое число» показывает границу двух концентраций защищающего коллоида, из которых одна создает защиту, а другая вызывает коагуляцию, внешне выражающуюся в переходе красной окраски в фиолетовую. Вместо определения золотого числа часто производят определение рубинового и железного числа путем наблюдения начала коагуляции Fe(ОН)3.
Ход опыта
Налить в 8 пробирок по 1 мл дистиллированной воды. В 1-ю пробирку внести 1 мл 1% раствора белка желатина (гидрофильный коллоид). Перемешать и 1 мл смеси перенести во 2-ю пробирку. Перемешать и 1 мл смеси из 2-й пробирки перенести в 3-ю и т. д. Из 8-й пробирки 1 мл смеси как лишний вылить. Получаем различное разведение желатина: в 1-й пробирке оно равно 1/2, во 2-й — 1/4, в 3-й - 1/8 и т. д.
Налить во все пробирки по 1 мл 1% золя железа и перемешать содержимое пробирок.
Через 3 мин прилить во все пробирки по 0,2 мл 0,1 М раствора A12(S04)3 и отметить номер пробирки, в которой произошла коагуляция.
Расчет
Если осадок образовался, например, в 3-й пробирке, то предел защитного действия желатина находится во 2-й пробирке, где разведение 1/4. Следовательно, «железное число» желатина равно: 0,01 : 4 = 0,0025 г или 2,5 мг. 0,01 г - количество желатина в 1 мл 1% раствора, взятого в опыт.
Задание: 1. Выполнить опыт и найти «железное число» желатина.
2. Дать точное определение «железного числа», исходя из данных опыта.
3. Объяснить механизм защитного действия раствора желатина.