Лабораторная работа № 5

Инфекция, инфекционный процесс

Патогенность и вирулентность микроорганизмов

I. Вопросы для обсуждения.

1. Понятия “инфекция”, “инфекционный процесс”, “инфекционная болезнь”. Формы и виды инфекций и инфекционных болезней. Источники, пути, способы заражения. Периоды (стадии) инфекционной болезни.

2. Понятия патогенности и вирулентности микроорганизмов.

3. Факторы инвазии и агрессии микроорганизмов. Микробные токсины.

4. Определение патогенности и вирулентности in vivo и in vitro.

II. Работа, выполняемая студентами.

1. Определение наличия гиалуронидазы у различных штаммов St. aureus.

В пробирку с субстратом действия этого фермента – гиалуроновой кислотой - вносят петлей культуру стафилококка, инкубируют 30 мин при 37⁰С. Гиалуроновая кислота под действием уксусной кислоты образует сгусток полимера муцина; если при внесении 10% уксусной кислоты в пробирке не происходит образование муцина, это свидетельствует о наличии у микроба фермента – гиалуронидазы, гидролизующей субстрат.

2. Определение плазмокоагулазы у St. aureus.

В пробирку со стерильной цитратной плазмой вносят петлей испытуемую культуру стафилококка, термостатируют при 37⁰С 30-40 мин. В случае выработки микробом фермента плазмокоагулазы происходит образование сгустков фибрина, что свидетельствует о патогенности культуры.

3. Капсула как фактор агрессии патогенных микроорганизмов. Микроскопия капсульных дрожжей Cryptococcus sp. (демонстрационный препарат).

4. Завершение задачи по выделению чистой культуры. Работа с определителем.

5. Задача . Определение чувствительности испытуемой культуры микроорганизмов к различным антибиотикам методом дисков (диффузии в агар). Бумажные диски, пропитанные определенными антибиотиками, накладывают, соблюдая правила асептики, на поверхность МПА в чашках Петри, предварительно засеянных “газоном” исследуемой бактериальной культурой. Затем ставят чашки на рост в термостат (37⁰С, 24 ч). Учет результатов проводят на следующем занятии.

6.Оформление протокола и уборка рабочего места.

Лабораторная работа № 6

Химиотерапевтические препараты и принципы химиотерапии

Антибиотики, определение антимикробной активности

и чувствительности микроорганизмов к антибиотикам

I. Вопросы для обсуждения

1. Понятие о химиотерапевтических веществах и принципах химиотерапии инфекционных болезней. Этиотропность и органотропность химиотерапевтических препаратов. Химиотерапевтический индекс.

2. Классы химиотерапевтических препаратов, полученные методом химического синтеза и механизм их действия на микробные клетки

3. Антибиотики, принципы их классификации, спектр и механизм их действия на патогенные микробы.

4. Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар по ГФ XI , методом серийных разведений.

5. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом дисков. Единицы действия антибиотиков. Статическое и цидное действие на чувствительные микроорганизмы.

6. Естественная и приобретенная устойчивость микробов к химиотерапевтическим препаратам (включая антибиотики). Механизмы ее формирования и пути преодоления.

7. Тестовый опрос по теме: “Химиотерапевтические препараты и принципы химиотерапии”.