III. Демонстрация.

Таблицы “Морфология вирусов”, “Методы культивирования вирусов”.

Для культивирования вирусов может быть использовано два способа получения культуры ткани – метод первичных эксплантантов и метод пассажных культур. Первый метод основан на использовании первой генерации клеток, т.е. каждый раз необходимо получать вновь культуру из ткани. Пассажные культуры ткани поддерживают путем непрерывных перевивок, в частности, опухолевых клеток. Наиболее удобным методом является получение однослойного роста, при котором происходит образование сплошного, стелющегося по стенке сосуда слоя клеток. Растущая ткань должна омываться сложной синтетической средой, содержащей все необходимые вещества для жизнедеятельности клетки (среда 199). Культивирование ткани должно производиться в строго асептических условиях.

Вирусы при росте на культуре ткани вызывают цитопатическое действие (ЦД) – это может быть изменение формы клеток, структуры ядра, цитоплазмы и др. (см. плакат).

VI семестр

Лабораторная работа № 1

Морфолого-физиологические особенности

кокков и палочковидных бактерий

Получение чистых культур микроорганизмов

I. Вопросы для обсуждения.

1. Морфолого-биологические особенности кокков, их практическое значение.

2. Грамотрицательные аэробные и факультативно-анаэробные палочки, распространение в природе, практическое значение.

3. Характеристика грамположительных спорообразующих палочек.

4. Методы получения чистых культур.

II. Работа, выполняемая студентами.

1. Описать особенности роста кокков и палочковидных бактерий на плотных питательных и жидких питательных средах.

2. Приготовить мазки, окрасить по Граму и измерить размер клеток. Результаты по п.1 и п.2 оформить в виде табл.1.

3. Ознакомиться с биохимическими особенностями микроорганизмов (демонстрация). Результаты оформить в виде табл. 2.

4. Посев почвы на среду Гетчинсона для выявления микроорганизмов, разрушающих целлюлозу. Для этого 0,1 мл почвенной взвеси (1:100) внести в стерильную чашку Петри, затем положить стерильный диск из фильтровальной бумаги и налить 2-3 мл среды Гетчинсона. Чашки поместить во влажную камеру и выдержать 14 суток при 24⁰С. Работа выполняется на бригаду из 3 студентов.

5. Задача 1.Выделение чистой культуры микроорганизмов.

Этап 1. Из полученной микробной взвеси приготовить мазок, окрасить по Граму. Произвести посев на чашку Петри с МПА штриховым методом (“отжатой петлей”) с целью получения изолированных колоний.

Таблица 1

Морфология бактерий

Наименование микроорганизма	Рост на МПА	Рост на МПБ	Подвижность	Микроскопическая картина с рисунком	Размеры клеток, мкм
St. aureus St. saprophyticus Micrococcus luteus
Pseudomonas aeruginosa Serratia marcescens Proteus vulgaris
Bac. subtilis Bac. licheniformis Bac. cereus

Таблица 2