Паразитология

Размеры трофозоитов ротовой амебы составляют 5 — 35 мкм (в среднем 10—12 мкм) (рис. 4, д, е, цв. вклейка). Цитоплазма подразделена на светлую эктоплазму и гранулированную, сильно вакуолизированную эндоплазму. Псевдоподии многочисленные и более широкие, чем у Е. histolytica. В пищеварительных вакуолях обнаруживаются грибы, бактерии, эпителиальные клетки и по­ глощенные амебой лейкоциты на разных стадиях переваривания. При окрашивании по Гейденгайну ядра переваривариваемых лей­ коцитов интенсивно окрашиваются и могут быть приняты за эрит­ роциты, которыми в норме ротовые амебы не питаются. Иногда эритроциты присутствуют в их цитоплазме при абсцессах ротовой полости. Ядра размером 1,7 — 6,7 мкм у живых амеб не видны. При окрашивании по Гейденгайну в ядре выявляется мелкое ядрышко с тонкими ахроматиновыми нитями к ядерной мембране. Пери­ ферический хроматин виден в виде отдельных глыбок, не одина­ ковых по форме и величине. Ротовая амеба иногда обнаруживает­ ся в содержимом легочных абсцессов, что важно для правильной дифференциальной диагностики с внекишечным амебиазом, выз­ ванным Е. histolytica.

Бластоцистис

Положение бластоцистиса (Blastocystis hominis) в системе про­ стейших окончательно не определено. По современным молеку­ лярным данным бластоцистисы близки к золотистым водорослям (Chrysophyta). Паразит обитает в кишечнике человека, многих по­ звоночных и даже беспозвоночных животных.

Биология и жизненный цикл. Различают несколько морфологи­ ческих форм бластоцистисов. Амебоидные формы имеют размеры 10—15 мкм в диаметре. Они овальные, с одной или двумя боль­ шими псевдоподиями. Эта форма встречается редко и в неболь­ шом количестве. Гранулярные формы размером 15 — 25 мкм име­ ют крупногранулярную цитоплазму; ядра у живых бластоцистов не видны. Вакуолярная форма, чаще всего встречающаяся в фека­ лиях, имеет размеры 5 — 30 мкм. Ее форма овальная, сферическая или эллипсоидная. В центре вакуолярной формы расположена круп­ ная вакуоль, окруженная тонким слоем цитоплазмы.

Жизненный цикл бластоцистиса полностью не изучен. Пред­ полагается, что вакуолярные формы модифицируются в грану­ лярные и амебоидные. Внутри гранулярных форм путем множе­ ственного внутреннего деления формируются молодые грануляр­ ные формы, преобразующиеся в вакуолярные. Амебоидные фор­ мы также делятся и преобразуются в вакуолярные (рис. 1.6). Ваку­ олярные формы тоже способны к делению; причем образуются как тонкостенные, так и толстостенные вакуолярные формы. Ин-

22

Рис. 1.6. Жизненный цикл бластоцистиса:

/ — деление вакуолярной формы; 2 — вакуолярные формы; 3—6 — развитие гранулярной формы из вакуолярной; 7— выход вакуолярных форм из грануляр­ ной формы; 8 — амебоидная форма; 9 — деление амебоидной формы; 10 — превращение амебоидной формы в вакуолярную

вазионными для других организмов являются толстостенные ва­ куолярные формы, выводящиеся с фекалиями во внешнюю среду.

Клинические проявления. Бластоцистисы и вызываемое им за­ болевание бластоцистоз распространены повсеместно, но чаще всего регистрируются в регионах с теплым климатом. Бластоцис­ тоз вызывает энтероколит с мягкой диареей. Тяжелый бластоцис­ тоз, сопровождающийся многократным жидким стулом, болями в животе, рвотой, обычно развивается у ослабленных людей, осо­ бенно детей, а также пациентов с иммунодефицитными состоя­ ниями.

Диагностика. Для диагностики бластоцистоза проводят микро­ скопическое исследование свежего или фиксированного стула пациента.

23

Изучение нашивного материала. В свежих фекалиях при ис­ пользовании фазово-контрастного микроскопа можно выявить не­ подвижные вакуолярные формы бластоцистисов.

Изучение окрашенного материала. Бластоцистисы выявляют­ ся на мазках фекалий, окрашенных раствором Люголя. При этом в вакуолярных формах видны от одного до четырех ядер, лежащих в кольце периферической цитоплазмы (рис. 4, ж—и; рис. 5, а, в, цв. вклейка). У двухъядерных форм ядра часто расположены сим­ метрично на противоположных полюсах бластоцистиса. Кроме ядер в периферической цитоплазме видно кольцевидное скопление цитоплазматических гранул. В целом такая клетка кажется окру­ женной кольцом четок.

Диагноз ставится при обнаружении бластоцистисов в стуле пациента, при отсутствии других патогенов, способных вызвать энтероколит.

Профилактика. Профилактика бластоцистоза заключается в со­ блюдении мер гигиены, как и при других кишечных инфекциях.

Контрольные вопросы

1.Какие виды амеб обитают в организме человека?

2.В чем отличие дизентерийной амебы от остальных видов?

3.Опишите жизненный цикл дизентерийной амебы и способы про­ филактики амебиаза.

4.Какая морфологическая форма важна для диагностики амебной дизентерии?

5.Каковы морфологические отличия forma minuta и forma magna?

6.Почему при исследовании кала на амебиаз недостаточно исследо­ вать только нативный мазок?

7.Стул больного амебиазом доставлен в лабораторию через час после дефекации и исследован методом нативного мазка. Достоверен ли отри­ цательный результат?

8.В чем преимущества окрашенных препаратов перед нативным маз­ ком при исследовании кала на амебиаз?

9.Опишите жизненный цикл бластоцистиса.

10.Опишите строение бластоцистисов, выявляемых в нативном мазке

ина окрашенных препаратах.

Гл а в а 2

Класс Ресничные

Тело ресничных простейших (Ciliata), или инфузорий, покры­ то ресничками, часто правильно расположенными в виде рядов или групп, либо собранными в пучки (цирри), служащие для дви­ жения. Характерной особенностью инфузорий является наличие двух ядер: крупного полиплоидного макронуклеуса и маленького диплоидного микронуклеуса. Представители этой группы размно­ жаются как бесполым путем в форме поперечного деления (а не продольного, характерного для большинства простейших), так и половым, представленным конъюгацией — последовательностью из нескольких делений, в ходе которых у большинства инфузорий макронуклеус исчезает, а микронуклеусы делятся и происходит обмен ими между двумя организмами. В результате такого полово­ го деления количество организмов не увеличивается, но возника­ ют новые организмы с другим хромосомным набором. Многие инфузории являются паразитами и комменсалами позвоночных и беспозвоночных животных. У человека паразитирует только один вид — балантидий (Balantidium coli).

Балантидии — самые крупные среди простейших, обитающих в кишечнике человека (рис. 2.1, а). Балантидии являются частыми паразитами пищеварительного тракта свиней, крупного рогатого скота, некоторых других домашних и диких животных.

Биология и жизненный цикл. Основным хозяином этого вида является свинья. В кишечнике свиньи балантидии существуют в виде «больших» и «малых» форм, которые могут конъюгировать между собой, но не между особями равного размера. Основная форма размножения — бесполое поперечное деление. В кишечни­ ке свиньи балантии образуют скопления, «колонии». Они пита­ ются компонентами пищи хозяина и бактериями кишечника. Для свиней балантидии непатогенны, т.е. являются комменсалами. В ки­ шечнике свиньи балантидии инцистируются, цисты выводятся наружу с фекалиями (рис. 2.1, б). Эти цисты служат для зараже­ ния других хозяев, включая человека.

Заражение человека происходит при проглатывании зрелых цист балантидия. В кишечнике балантидии выходят из цист, превраща­ ются в вегетативные формы и начинают размножаться, заселяя толстый кишечник. В кишечнике человека балантидии образуют цисты очень редко и в небольшом количестве, поэтому он не может

25

Рис. 2.1. Балантидии:

а — трофозоит; б — циста; / — удли­ ненные реснички, окружающие вход в цитостом; 2 — цитостом; 3 — область формирования пищеварительных ваку­ олей; 4— сократительная вакуоль; 5 — макронуклеус; 6— микронуклеус; 7 — область выведения экскреторных ваку­ олей (цитопрокт); 8 — пищеваритель­

ные вакуоли

а

служить основным источником заражения. Вегетативные стадии быстро погибают вне кишечника и не могут заражать других хо­ зяев.

Клинические проявления. В организме человека балантидии спо­ собны длительно существовать как комменсальные организмы, не вызывая заболевания. Причина перехода балантидиев в пато­ генную паразитическую форму пока неизвестна. При вызываемом ими заболевании, балантидиазе, в толстом кишечнике развивает­ ся воспалительно-чзвенный процесс. Балантидии нарушают цело­ стность слизистой оболочки толстого кишечника, в образовавши­ еся язвенные поражения проникают бактерии, что приводит к развитию выраженного воспаления.

Различают острый и хронический балантидиаз. Хроническая форма встречается чаще. Острая балантидная дизентерия сопро­ вождается сильным зловонным слизисто-кровавым поносом с повышением температуры, головной болью, тошнотой и рвотой. При мягкой форме балантидиаза стул полужидкий, с примесью слизи, но без крови. При хроническом течении балантидиаза на­ блюдается чередование обострений, мало отличающихся от ост­ рых форм, с периодами ремиссий, во время которых диареи мо­ жет не быть совсем. При отсутствии своевременного лечения ост­ рые формы балантидиаза часто приводят к летальному исходу.

Осложнения балантидиаза в виде поражения других органов, кроме кишечника, исключительно редки.

Диагностика. Диагноз устанавливается на основании клиниче­ ских данных и результатов лабораторных и инструментальных ме­ тодов обследования. Исследуются свежий стул и материал, взя­ тый из-под края язвы при ректоманоскопии. В старом стуле веге-

тативные формы не обнаруживаются из-за их быстрой гибели вне кишечника. Цисты в стуле обнаруживаются очень редко.

Изучение нашивного материала. Мазки свежего материала про­ сматривают под микроскопом сначала при малом (х70), а затем при большом (х400) увеличении предпочтительно с использова­ нием нагревательного столика. Вегетативные формы балантидиев овальные, размером 40 — 60x30 — 40 мкм (мелкие формы) и 90 — 120x60 — 80 мкм (крупные формы) (рис. 5, б, цв. вклейка). Перед­ ний конец несколько сужен и сплющен, задний расширен. Вдоль тела идут ряды ресничек. На переднем конце видно узкое углубле­ ние, перистом, на дне которого расположен клеточный рот, цито­ стом. Края перистома покрыты более длинными ресничками. В ци­ топлазме содержатся многочисленные пищевые вакуоли с бакте­ риями и другими пищевыми частицами. Иногда в пищевых вакуо­ лях видны эритроциты и лейкоциты на разных стадиях перевари­ вания. В задней и передней половинах тела расположены сократи­ тельные вакуоли. Крупный макронуклеус и вдавленный в него микронуклеус расположены в середине тела и видны только на окрашенных препаратах. Вегетативные формы активно передвига­ ются с помощью ресничек.

Цисты имеют сферическую или овальную форму. Их диаметр составляет 40 — 60 мкм. Через толстую стенку виден макронуклеус (рис. 5, г, цв. вклейка).

Более эффективно выявление балантидиев по методу Бермана.

Изучение окрашенного материала. Окрашенные препараты обычно изучают в учебных или научных целях, а не для диагнос­ тики.

Профилактика. Профилактические меры заключаются в соблю­ дении правил личной гигиены, а также в предупреждении загряз­ нения окружающей среды необеззараженными фекалиями сви­ ней. Цисты балантидиев могут переноситься мухами. Балантидиаз распространен повсеместно, но чаще регистрируется в теплых регионах мира. Отмечены вспышки балантидиаза в местах разви­ того свиноводства.

Контрольные вопросы

1. Какой вид животных является специфичным хозяином балантидия?

2.Какими методами выявляют балантидия?

3.Каковы характерные морфологические черты балантидия, позволя­ ющие отличать его от других простейших кишечника человека?

26

Гл а в а 3

Класс Жгутиковые

Внастоящее время известно, что простейшие, обладающие жгутиками (Mastigophora), принадлежат к разным по происхож­ дению группам и не всегда связаны друг с другом эволюционно. Однако в соответствии с принятой в медицине утилитарной клас­ сификацией простейших они обычно рассматриваются вместе. Отличительной чертой этих организмов является наличие одного или нескольких жгутиков на всех или только некоторых стадиях жизненного цикла.

3.1. Отряд Kinetoplastida

Представители отряда Kinetoplastida обладают, кроме жгутиков, характерным органоидом, кинетопластом, который является уча­ стком гигантской модифицированной митохондрии, содержащей большое количество митохондриальной РНК. Кинетопласт обыч­ но расположен вблизи от основания жгутика — базального тела. В жизненном цикле этих простейших чередуются несколько мор­ фологических форм.

Лейшмании

У человека паразитируют несколько видов лейшмании (род Leishmania), вызывающие несколько различающихся по клини­ ческим проявлениям форм лейшманиоза. По биологическим осо­ бенностям и способности вызывать определенные формы лейш­ маниоза эти виды сгруппированы в несколько видовых комплек­ сов. Лейшмании комплекса Leishmania donovani (L. donovani, L. infantum, L. chagasi) вызывают висцеральный лейшманиоз. Виды

комплекса Leishmania	mexicana	(L.	mexicana, L. amazonensis,
L. venezuelensis, L. major, L. garnhami)			являются возбудителями
кожного лейшманиоза.	Виды	комплекса		Leishmania braziliensis
(L. braziliensis, L. guyanensis, L.		panamensis,		L. peruviana) вызы­

вают кожно-слизистый лейшманиоз. Объединенные в комплекс

Leishmania tropica виды (L. tropica, L. aethiopica, L.	amazonensis,
L. peruviana) являются возбудителями как кожного,	так и кож-
28

но-слизистого лейшманиоза. Иногда кожную форму лейшманиоза вызывает и L. peruviana.

Морфологически все виды лейшмании очень похожи. Их раз­ личают с помощью тонких молекулярных и изоэнзимных методов. Есть биологические различия между линиями одних и тех же ви­ дов лейшмании, связанные с определенными географическими регионами.

Биология и жизненный цикл. Биология и жизненные циклы всех видов лейшмании одинаковы (рис. 3.1). Лейшмании являются внут­ риклеточными паразитами человека и развиваются с участием переносчика — москита — мелкого двукрылого насекомого, при­ надлежащего к семейству Phlebotominae. Кроме человека, лейш­ мании могут поражать животных — собак, шакалов, кошек и ди­ ких представителей семейства кошачьих, лисиц, грызунов и обе­ зьян. В зависимости от вовлеченности в циркуляцию паразита резервуарных хозяев различают антропонозный (без участия живот­ ных) и зоонозный (с вовлечением резервуарных хозяев) лейшманиозы. Только L. donovani в Индии не имеет резервуарных хо­ зяев, и болезнь всегда является антропонозом.

В жизненном цикле лейшмании чередуются две морфологиче­ ские формы: амастиготы, имеющие короткий внутренний жгутик без наружной части, которые являются внутриклеточными пара­ зитами человека (рис. 3.2, а), и промастиготы — жгутиковые фор-

Рис. 3.1. Жизненный цикл лейшмании:

1 — зараженный промастиготами москит кусает человека; 2 — промастиготы проникают в макрофаги и превращаются в амастиготы; 3 — макрофаг, запол­ ненный амастиготами; 4 — выход амастигот из макрофага и заражение других макрофагов; 5 — москит кусает зараженного человека, зараженные макрофаги попадают в его организм; 6 — разрушение макрофага в организме москита; 7 — амастиготы превращаются в промастиготы в организме москита; 8 — размноже­

ние промастигот в организме москита

29

Рис. 3.2. Строение лейшмании:

а — амастигота; б — промастигота; / — ядро; 2 — кинетопласт; 3 — вакуоль; 4 — базальное тело; 5 — жгутик

мы, развивающиеся в переносчике (рис. 3.2, б). Заражение чело­ века происходит при укусе зараженного москита, который вместе со слюной впрыскивает в организм промастиготы лейшмании. Промастиготы фагоцитируются клетками ретикулоэндотелиальной системы человека, главным образом моноцитами и макрофа­ гами. В этих клетках промастиготы отбрасывают жгутик, округля­ ются и превращаются в амастигот. Внутри клеток амастиготы де­ лятся продольным делением, постепенно заполняя собой пора­ женные клетки (рис. 6, а, б, цв. вклейка). Разрыв последних при­ водит к освобождению амастигот. Они фагоцитируются другими клетками ретикулоэндотелиальной системы и вновь размножают­ ся. Постепенно значительная часть моноцитов и макрофагов ока­ зывается пораженной. Они проникают в селезенку, костный мозг и другие внутренние органы, функции которых нарушаются.

Паразиты попадают в переносчиков при питании кровью на зараженном человеке или животном. В моските амастиготы пре­ вращаются в жгутиковые промастиготы и размножаются. Спустя 6 — 8 сут после заражения переносчика в его ротовом аппарате скапливаются промастиготы, которые впрыскиваются в человека или животное при кровепитании. Таким образом цикл замыкается.

Заражение лейшманиозом возможно также внутриутробно (при передаче от зараженной матери плоду) и при переливании крови.

Клинические проявления. На территории бывшего СССР висце­ ральный лейшманиоз встречается в Средней Азии, Казахстане и Закавказье. Он распространен в Индии и Центральной Азии, Сре­ диземноморском регионе, Северной и Центральной Африке, Цен­ тральной и Южной Америке. Висцеральным лейшманиозом чаще

30

болеют дети. Инкубационный период длится от нескольких недель до нескольких месяцев. Заболевание проявляется повышением тем­ пературы тела до 39 — 40 °С, часто с двукратным суточным подъе­ мом, ознобом, слабостью, отсутствием аппетита. Увеличиваются размеры селезенки, печени и лимфатических узлов, появляется болезненность в левом подреберье, развиваются анемия и исто­ щение. При индийском висцеральном лейшманиозе появляются также кожные язвы. На фоне присоединившихся вторичных ин­ фекций развиваются пневмония и диспепсия, которые часто при­ водят к смерти больного. У пациентов, выздоровевших после вис­ церального лейшманиоза, может развиться кожный лейшманиоз.

Кожный лейшманиоз распространен в Туркмении, Узбекис­ тане, Средиземноморье, а также Центральной Африке, Централь­ ной и Южной Америке, Центральной Азии. Особое значение для появления заболевания на территории России имеют очаги лейш­ маниоза в Крыму, Северном Кавказе, Молдове, Азербайджане, Турции. В Средней Азии важная роль в циркуляции лейшмании в природе принадлежит диким грызунам, песчанкам. В остальных регионах особое значение имеют зараженные лейшманиями соба­ ки. При кожном лейшманиозе сначала на месте укуса москита появляются небольшие буровато-красные бугорки, обычно мало­ болезненные. Эти бугорки увеличиваются, изъязвляются (через 3 — 6 недель при антропонозной форме и через 1 — 3 недели при зоонозном лейшманиозе). Возникают воспаление и отек окружаю­ щей ткани, воспаляются лимфатические узлы. Процесс длится не­ сколько месяцев и обычно заканчивается самопроизвольным за­ живлением язвы с образованием рубца. После перенесенного кож­ ного лейшманиоза развивается стойкий иммунитет.

Кожно-слизистый лейшманиоз распространен, главным об­ разом, в Центральной и Южной Америке; в других регионах его распространение ограничено небольшими очагами в Африке, Азии

иСредиземноморье. Начало болезни напоминает кожный лейш­ маниоз. На месте укуса москита возникает язва (лейшманиома) однако впоследствии язвы появляются и на других частях тела. После заживления кожных язв, часто спустя многие годы, пора­ жение распространяется на слизистые оболочки носа, горла, глотки

игортани. Изъязвления захватывают хрящевую ткань, переходят на губы, мягкое нёбо, щеки. Развивается уродующая деформация лица. Болезнь длится годами и плохо поддается лечению.

Все виды лейшманиозов особенно опасны для больных СПИДом .

Диагностика. При подозрении на лейшманиоз важную роль иг­ рает факт пребывания человека на территориях, эндемичных по данному заболеванию. Одним из простейших диагностических те­ стов является реакция на выявление гипергаммаглобулинемии (формол-гел-теста по Непиру). Сыворотка крови таких больных

31

при смешивании с 40 % раствором формалина окрашивается в белый цвет. Гипергаммаглобулинеимия выявляется также элект­ рофорезом.

При висцеральном лейшманиозе в клетках крови лейшмании обнаруживаются редко, поэтому исследуют мазки пунктатов кост­ ного мозга, селезенки или печени, окрашенные по Романовско­ му—Гимзе (см. рис. 6, б, г, цв. вклейка).

При кожном лейшманиозе исследуют мазки из нераспавшихся язв или инфильтратов вблизи язв (рис. 6, в, цв. вклейка). При этом бугорок или участок краевого инфильтрата для обескровливания захватывают и сдавливают пальцами левой руки, делая неглубокий надрез. С его стенки концом скальпеля берут кусочек ткани, кото­ рый вместе с серозной жидкостью переносят на предметное стекло и размазывают по его поверхности. Ткань для приготовления маз­ ков можно также взять из прокола, сделанного толстой иглой на границе пораженных и здоровых тканей. При приготовлении пре­ паратов нужно избегать попадания в них крови, которая не содер­ жит лейшмании и затрудняет изучение под микроскопом.

Лейшмании обнаруживаются внутри мононуклеаров или мак­ рофагов в виде телец с голубой цитоплазмой и розовым, более ярко окрашенным кинетопластом и более бледным, но более круп­ ным ядром. Если при приготовлении мазка клетки были разруше­ ны, лейшмании также могут лежать вне клеток. Присутствие кинетопласта и ядра помогает отличить лейшмании от внутрикле­ точных токсоплазм, саркоцистисов и некоторых других организ­ мов. При окрашивании кожных проб кинетопласты напоминают грамположительные кокки (которые в норме содержатся на коже), но отличаются от них внутриклеточным расположением и при­ сутствием рядом более бледного ядра.

Используется также посев крови или материала костного пунктата на агаровую среду N N N (по фамилиям предложивших их ученых: Novy, Neal, Nicolle). На ней отмечается быстрый и обиль­ ный рост их культуры в форме промастигот (рис. 7, а, цв. вклейка). В препаратах из пораженных тканей больных кожно-слизистым лейшманиозом лейшмании обнаруживается мало или они вообще отсутствуют. Рост их культуры на кровяном агаре медленный, скуд­ ный и неустойчивый.

При висцеральном лейшманиозе используется также метод биологических проб. В качестве лабораторных животных использу­ ют хомяков (Cricetulus griseus, Mesocricetus auratus), которых за­ ражают суспензией субстрата биологических проб, взятых из кос­ тного мозга, лимфатических узлов, печени. Если животные не по­ гибают ранее, их забивают на 15 —30-е сутки и готовят из тканей печени, селезенки и лимфатических узлов препараты (мазки, от­ печатки), которые окрашивают по Романовскому —Гимзе и про­ сматривают.

Используются также серологические реакции (НРИФ, реак­ ция непрямой агглютинации (РНГА) и др.), в крупных лаборато­ риях применяют ПЦР для выявления антигенов лейшмании в тка­ нях пораженных органов.

Профилактика. Индивидуальная профилактика состоит в ис­ пользовании репеллентов против укусов насекомых и москитных сеток в регионах распространения лейшманиоза. Важны также выявление больных и их своевременное лечение, меры контроля над численностью москитов: уничтожение мест их выплода и ис­ пользование инсектицидов.

Трипаносомы

Как и лейшмании, трипаносомы (род Trypanosoma) имеют кинетопласт. У человека паразитируют два вида трипаносом. Trypanosoma cruzi поражает человека в Южной Америке, два под­ вида Т. brucei gambiense и Т. brucei rhodesiense паразитируют у людей в Африке. Подвид Т. brucei bricei паразитирует у животных и не поражает человека. Трипаносомы имеют несколько морфоло­ гических форм, чередующихся в жизненном цикле (рис. 3.3). Ама­ стиготы и промастиготы сходны по строению с этими морфоло­ гическими формами у лейшмании. Эпимастиготы отличаются от промастигот положением кинетопласта и базального тела, нахо­ дящихся возле центрально лежащего ядра; ундулирующая мемб­ рана короткая. У трипомастигот кинетопласт и базальное тело ле­ жат в задней части удлиненного тела, жгутик тянется вперед, об­ разуя длинную ундулирующую мембрану.

Биология и жизненный цикл. Человек заражается трипаносомой при укусах кровососущих насекомых — переносчиков. Жизненные циклы африканских и американских трипаносом различаются.

В жизненном цикле американских трипаносом чередуются три морфологические формы: амастигота, трипомастигота и эпимас-

2

Рис. 3.3. Морфологические формы трипаносом:

a — амастигота; б — промастигота; в — эпимастигота; г — трипомастигота; / — ядро; 2 — кинетопласт; 3 — жгутик; 4 — ундулирующая мембрана

32	2 Корнакова	*Х "3

Рис. 3.4. Жизненный цикл американских трипаносом:

/ — при укусе клопа в организм человека проникают трипомастиготы; 2— трипомастиготы проникают в клетки внутренних органов и превращаются в амасти­ готы; 3 — амастиготы превращаются в трипомастиготы, которые разрывают по­ раженные клетки и проникают в непораженные; 4— трипомастиготы в перифе­ рической крови; 5 — клоп при питании получает трипомастигот из организма человека; 6 — трипомастиготы превращаются в эпимастиготы; 7 — эпимастиготы размножаются; 8 — эпимастиготы превращаются в трипомастиготы, готовые

заразить человека

тигота (рис. 3.4). Заражение человека происходит при укусе клопов семейства Triatominae. Резервуарными хозяевами служат многие дикие и домашние животные. При американском трипаносомозе в организме человека трипаносомы паразитируют в виде амасти­ гот, как при лейшманиозах. Амастиготы развиваются внутри кле­ ток различных внутренних органов, размножаются продольным делением, превращаются в несущие жгутики трипомастиготы, выходят при разрыве пораженных клеток в кровяное русло и по­ ражают другие здоровые клетки организма, где вновь превраща­ ются в амастигот. Клопы заражаются при кровепитании, погло­ щая трипомастиготы из периферической крови. В пищеваритель­ ном тракте переносчика трипомастиготы преобразуются в эпима­ стиготы, размножаются продольным делением, а затем заполня­ ют задний отдел пищеварительного тракта клопа и снова превра­ щаются в заразные для человека трипомастиготы. При кровососании трипомастиготы выделяются с фекалиями клопа. Человек почесывает место укуса и вносит трипомастиготы в ранку или на пальцах переносит их на слизистые оболочки глаза или рта, где они внедряются в организм.

34

АфриК&некие-трипаносомы переносятся кровососущими муха­ ми цеце рода Glossina (рис. 3.5). Резервуарными хозяевами служат свиньи и некоторые дикие животные. В человеке африканские трипаносомы существуют в виде жгутиковых форм, трипомасти­ гот, размножающихся продольным делением в лимфатической жидкости, спинном ликворе и других внутренних жидкостях. При попадании в организм мухи цеце трипомастиготы преобразуются в другую морфологическую форму, эпимастиготы, которые так­ же размножаются в пищеварительном тракте переносчика про­ дольным делением, заполняют колюще-сосущий аппарат, где превращаются в трипомастиготы. Последние впрыскиваются в тело человека при кровепитании. Таким образом происходит зараже­ ние следующего хозяина.

Клинические проявления. При африканском трипаносомозе, или сонной болезни, повышается температура, воспаляются лимфа­ тические узлы, во внутренних органах развиваются воспалитель­ ные очаги, миокардит, тромбоцитопения и внутренние кровоте­ чения. Увеличиваются размеры селезенки и печени. Вследствие этих процессов летальный исход МОЖвт наступить еще до ПрояйЯеНН0| симптомов поражения центральной нервной системы (ЦНС). На поздней стадии наблюдается менингоэнцефалит, сопровождаю-

Рис. 3.5. Жизненный цикл африканских трипаносом:

/ — при укусе мухи цеце трипомастиготы попадают в кровь; 2 — трипомастиго­ ты разносятся по организму; 3 — трипомастиготы размножаются в жидких сре­ дах организма человека; 4 — при питании муха цеце получает трипомастигот; 5 — в пищеварительном тракте мухи цеце трипомастиготы превращаются в эпимастигот; 6 — эпимастиготы размножаются; 7 — эпимастиготы передвигаются в ротовой аппарат мухи цеце; 8— эпимастиготы размножаются в ротовом аппара­

те мухи цеце и превращаются в инвазионные трипомастиготы

35

шийся нарастающей сонливостью. Изменяется психическое состо­ яние, появляются судороги, параличи. Болезнь без лечения обыч­ но заканчивается летально. При своевременном выявлении болезнь излечима.

Американский трипаносомоз, или болезнь Чагаса, развивает­ ся медленно, часто в течение многих лет. Вначале в месте про­ никновения трипаносом на коже появляется фурункулоподобный инфильтрат, чагома, или при проникновении паразитов через слизистую оболочку глаза развивается конъюнктивит. По­ являются головная боль, мышечные боли, температура подни­ мается до 40 "С, воспаляются лимфатические узлы. Паразиты могут поражать все ткани, но наибольшее их количество обнаружива­ ется в сердечной мышце и мышцах кишечника. Развивающаяся сердечная недостаточность может вызвать смерть больного. Через 4 — 6 недель болезнь переходит в скрытую хроническую форму, при которой симптомы выражены слабо. На поздней стадии бо­ лезни Чагаса нарастают симптомы поражения сердца, кишечни­ ка, развивается истощение и больные погибают. Лечение не раз­ работано.

Диагностика. В России обнаруживают только завозные случаи трипаносомоза. Диагноз ставится при выявлении паразитов в кро­ ви или спинномозговой жидкости. При африканском трипаносо­ мозе методы диагностики зависят от стадии заболевания. В началь­ ном периоде трипомастиготы обнаруживаются в месте укуса мухи цеце и периферической крови. На стадии лихорадки и после ее окончания трипаносомы выявляют в пунктате увеличенных лим­ фатических узлов. При поражении ЦНС эффективно исследова­ ние спинномозговой жидкости. Изучение ведется на нативных или окрашенных препаратах.

Изучение нашивного материала. Кровь с цитратом, пунктат лимфатического узла или центрифугированную спинномозговую жидкость изучают под микроскопом, лучше с применением фа­ зового контраста, темного поля или при опущенном конденсоре. Подвижные трипомастиготы видны в поле зрения. Кроме того, их присутствие заметно по пассивному движению клеток крови изза активного движения жгутиков паразитов.

Изучение окрашенного материала. Мазки крови окрашива­ ют по Романовскому —Гимзе. Для выявления трипаносом ис­ пользуют толстую каплю, а для более детального изучения стро­ ения паразитов — тонкий мазок (рис. 7, б— д, цв. вклейка). Пре­ парат просматривают при иммерсионном увеличении микро­ скопа.

Типичные трипомастиготы имеют длину 15 — 40 мкм и шири­ ну 2—4 мкм. Цитоплазма окрашивается в голубой цвет. Ядро, рас­ положенное примерно посередине клетки, окрашивается в руби- ново-красный цвет, так же как и лежащие позади него кинето-

36

пласт и базальное тельце, от которого начинается жгутик. Сам жгутик выходит из задней части клетки, волнообразно тянется вдоль нее вперед и соединен с поверхностью клетки ундулирующей мембраной. Впереди клетки видна длинная свободная часть жгутика. В плазме крови или тканевой жидкости трипаносомы дви­ гаются при помощи колебаний жгутика и мембраны, а также по­ средством изгибаний тела. В более поздней стадии заболевания в крови появляются и более короткие (11—27 мкм) и широкие формы трипаносом с тупо закругленным задним концом и почти полным отсутствием свободной части жгутика.

При болезни Чагаса в острой стадии паразитов обнаруживают

впериферической крови в нативных или окрашенных по Рома­ новскому—Гимзе препаратах. Однако вследствие небольшого ко­ личества паразитов часто обнаружить их удается лишь при много­ кратных исследованиях. Используется метод обогащения центри­ фугированием, а также ксенодиагностика. Для этого выращенных

влабораторных условиях триатомовых клопов, свободных от трипа­ носом, в небольших садках помещают на кожу больных людей. В по­ ложительных случаях при содержании клопов при температуре 30 °С через 2 недели после кормления в их кишечнике накапливается такое количество трипаносом, что обнаружить их не представляет трудностей.

Применяется также интраперитонеальное заражение кровью больного лабораторных животных (мышей, морских свинок и др.). Однако в этих случаях результат можно получить лишь через 4 не­ дели.

Для культивирования Т. cruzi применяются обычные при вы­ ращивании трипаносом и лейшмании среды: кровяной агар, сре­ да NNN и др.

Используются также серологические реакции.

Профилактика. Профилактика трипаносомозов заключается в использовании инсектицидов для уменьшения популяций мух цеце и клопов. При индивидуальной профилактике применяют репел­ ленты.

3.2. Подкласс Polymastigota

Представители подкласса Polymastigota имеют несколько жгу­ тиков и лишены кинетопласта. Размножается эта группа простей­ ших путем продольного бесполого деления. Один из жгутиков тя­ нется вдоль тела и на отдельных участках соединен с клеточной мембраной, образуя ундулирующую мембрану, служащую для движения. Некоторые жгутиконосцы являются безвредными ком­ менсалами желудочно-кишечного тракта человека, другие — па­ тогенными паразитами.

37

Лямблия

Впервые лямблию (Giardia intestinalis, syn. G. lamblia, G. duodenalis) обнаружил в 1859 г. профессор Харьковского университета Д. Ф. Лямбль в стуле больных диареей. Впоследствии этот вид был назван в честь первооткрывателя Lamblia intestinalis. Однако в со­ ответствии с современными правилами таксономии вид называ­ ется Giardia intestinalis. В литературе также можно встретить на­ звания G. lamblia u G. duodenalis.

Биология и жизненный цикл. Лямблии паразитируют в двенад­ цатиперстной кишке и верхних отделах тонкого кишечника. Вопре­ ки распространенному мнению они не поражают желчный пу­ зырь, так как желчь действует на них губительно. Лямблии суще­ ствуют в виде вегетативной формы, или трофозоита, и цисты. Грушевидные трофозоиты имеют уплощенную вентральную по­ верхность, образующую присасывательный диск, с помощью ко­ торого они прикрепляются к кишечным ворсинкам (рис. 3.6, о; рис. 8, <7, б, цв. вклейка). Паразит имеет два ядра и четыре пары жгутиков, осуществляющих характерное вращательное движение вокруг продольной оси. Продольно на вентральной стороне про­ ходит укрепляющая структура, аксостиль, различимый на окра­ шенных препаратах, а иногда и у живых лямблий. В средней части тела его пересекают небольшие парабазальные тела. Лямблии ли­ шены собственных пищеварительных ферментов и поглощают через наружную мембрану низкомолекулярные продукты переварива­ ния хозяина. В кишечнике человека лямблии активно размножа­ ются и могут покрывать его стенку сплошным слоем.

а

Рис. 3.6. Строение трофозоита и цисты лямблии:

а — трофозоит; б — циста: / — присасывательный диск; 2 — ядро; 3 — параба­ зальные тела; 4 — аксостиль; 5 — жгутики; 6 — оболочка цисты; 7 — светлый ободок цитоплазмы

Заражение человека происходит при проглатывании инвази­ онных цист. Из цисты выходят два подвижных трофозоита, при­ крепляются к поверхности кишки и начинают питаться и размно­ жаться. Вместе с кишечным содержимым часть лямблий переме­ щается в дистальные отделы кишечника и погибает. Выделение живых трофозоитов происходит обычно при послаблении стула. В оформленном стуле живые трофозоиты обнаружить трудно. Пос­ ле дефекации трофозоиты вне организма погибают в течение 20 мин. Часть трофозоитов окружается оболочкой и переходит в состояние цисты (рис. 3.6, б). Лямблии формируют цисты не по­ стоянно, а периодически, особенно под влиянием неблагоприят­ ных условий: при обильном выделении желчи, которая действует на них губительно, дефиците углеводов в пище, высокобелковой диете. Цисты являются расселительной стадией жизненного цик­ ла, ответственной за заражение других хозяев. Они устойчивы к низким температурам, высыханию и хлорированию. В окружаю­ щей среде цисты выживают до нескольких месяцев, особенно при попадании в воду. Большинство случаев массового заражения лю­ дей лямблиозом происходит из-за употребления для питья воды, загрязненной фекальными стоками.

Клинические проявления. Лямблиоз — одна из самых распро­ страненных в мире кишечных инфекций. Около 25 % населения Земли заражено этими паразитами. Особенно часто заражаются дети. Лямблиоз может протекать в острой и хронической формах. При остром лямблиозе наблюдается учащенный (2 — 4 раза в сут­ ки) жидкий стул без примеси крови, схваткообразные боли в животе, при пальпации боль в эпигастральной области, тошнота, повышенное газообразование в кишечнике. Для хронического лямблиоза характерен неустойчивый стул, послабления, чередующи­ еся с запорами, симптомы гастродуоденита, снижение аппетита, головные боли, нарушения сна, снижение трудоспособности, ал­ лергические проявления вплоть до бронхиальной астмы.

Диагностика. Диагностика лямблиоза может быть затруднена изза того, что вегетативные формы и цисты лямблий выделяются лишь периодически. Во время отрицательных фаз паразитов не­ возможно обнаружить. Длительность этих фаз колеблется от 2 — 3 сутдо 2 — 3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз иссле­ дования рекомендуется проводить с интервалом в одну неделю в течение 4 — 5 недель.

Исследование нашивного материала. Живые трофозоиты лям­ блий можно обнаружить в стуле и дуоденальном содержимом. Для исследования рекомендуется из массы фекалий с помощью дере­ вянной палочки выбрать комочки слизи, которые содержат кроме лямблий лейкоциты и слизь. Трофозоиты лямблий грушевидные, с оттянутым задним концом, имеют длину 10 — 25 и ширину 8 — 12 мкм. В расширенной части трофозоита тело уплощено и вдавле-

38

39

но в зоне присасывательного диска; в боковой проекции лямблии имеют вид ковша. За счет четырех пар жгутиков трофозоиты ак­ тивно передвигаются как поступательно, так и вращательно. При микроскопическом изучении (х400) на фоне присоски иногда различимы два ядра.

При изучении нативного материала можно также обнаружить цисты лямблий (рис. 8, в, цв. вклейка). Цисты овальной формы с толстой оболочкой имеют размер 12 — 14x6— 10 мкм. Они содер­ жат два или, если полностью сформированы, четыре ядра (см. рис. 3.6, б).

Исследование окрашенного материала. Для приготовления окрашенных препаратов используется свежий или постоявший кал. В последнем можно обнаружить только цисты лямблий. Ис­ пользуется также стул, зафиксированный сразу после дефекации консервирующими растворами (Барбагалло, Борроуза, Турдыева, Сафаралиева). В таком фиксированном стуле можно обнару­ жить и трофозоиты, и цисты лямблий. Чаще всего используется окрашивание мазков кала раствором Люголя. В окрашенных трофозоитах, кроме ядер, различимы расположенные возле них и сгруппированные в две симметричные группы базальные тела жгу­ тиков, а также лежащие позади присасывательного диска парабазальные тела. В цистах видны два (в незрелых) или четыре (в зре­ лых) ядра с крупными ядрышками, окруженные светлой неокра­ шенной зоной (см. рис. 8, в—ж, цв. вклейка). В цитоплазме можно также различить жгутики. Оболочка цисты лямблий часто отделе­ на от внутренней цитоплазмы светлым промежутком, обычно сер­ повидной формы. Раствором Люголя цисты окрашиваются в корич­ невый или желтый цвет. На препаратах также встречаются дегенера­ тивные формы цист лямблий. Они мельче по размеру и окрашены в серо-голубой цвет («голубые цисты»); их внутренняя структура не­ различима. При исследовании стула на лямблиоз необходимо диф­ ференцировать лямблий от других кишечных жгутиконосцев.

Профилактика. Как и профилактика других кишечных инфек­ ций, профилактика лямблиоза сводится к мерам по предотвраще­ нию фекального загрязнения воды, пищевых продуктов и других объектов внешней среды. Необходимо уничтожать мух и тараканов как переносчиков цист лямблий. Индивидуальная профилактика состоит из мер личной гигиены. Питьевую воду нужно обеззара­ живать кипячением.

Непатогенные и условно-патогенные жгутиконосцы пищеварительного тракта человека

В пищеварительном тракте человека обитают несколько видов непатогенных или условно-патогенных жгутиконосцев: Pentatricho-

Рис. 3.7. Жгутиконосцы, обитающие в кишечнике человека:

a — кишечная трихомонада (Pentatrichomonas hominis); б — хиломастикс (Chilo- mastix mesnili); в — лямблия (Giardia lamblia); г — энтеромонада (Enteromonas hominis); д — ретортомонада (Retortomonas interstinalis)

monas hominis,	Chilomastix	mesnili, Enteromonas hominis,
Retortomonas intestinalis (рис. 3.7).		В ротовой полости обитает ро­
товая трихомонада Trichomonas		tenax (syn. Т. gingivalis).

Хиломастикс

Хиломастикс (Chilomastix mesnili) чаще всего встречается в стуле (рис. 9, цв. вклейка). Трофозоиты Ch. mesnili грушевид­ ные, с оттянутым и слегка скрученным задним концом тела, имеют длину 7 — 20 мкм. От переднего конца отходят четыре жгутика. Цисты хиломастиксов размером 6 — 9 мкм окрашива­ ются раствором Люголя в желтовато-зеленый цвет, имеют гру­ шевидную или лимоновидную форму с двухконтурной оболоч­ кой, которая на переднем суженном конце образует утолщение в виде светлого колпачка. По этому характерному признаку ци­ сты хиломастиксов легко отличаются от цист других кишечных простейших. В цисте также видно крупное ядро с ядрышком и скобообразная толстая фибрилла, окружающая в цитоплазме цитостом — клеточный рот.

Хиломастиксы обитают в толстом кишечнике. Их патогенность не доказана. Хиломастиксы могут обнаруживаться в стуле больных с диареей в больших количествах. Возможно, их массовое размно­ жение утяжеляет течение кишечных инфекций.

40	41