Задание№3. Определение температурного коэффициента гемолиза эритроцитов крови человека

Материалы и оборудование: фотоколориметр ФЭК, секундомер свежая кровь мыши, смесь Никифорова, стаканчики на 50 мл, 0,1 н соляную кислоту, мерный цилиндр, раствор Рингера для теплокровных, спирт, вата, пипетки на 2 и 1 мл.

Методика выполнения работы.

1. Подготовить к работе фотоколориметр и секундомер. Фотоколориметр прогреть с раскрытой крышкой рабочей камеры в течение 10 мин. и ручками "Установка 100" установить стрелку на 0 (100% пропускания).

2. Поместить 1-2 капли крови в 20 мл раствора. Проверить степень пропускания света взвесью. Если она меньше 30 %, то добавить раствор Рингера и довести степень пропускания света в предел 30 - 45%.

3. Приготовить 0,005 н раствор соляной кислоты на растворе Рингера. К 2 мл взвеси крови, помещенным в фотоколориметрическую кювету, влить 1 мл кислоты. Засечь время по часам; одновременно снять нулевое показание колориметра. По секундомеру отмечать показания колориметра через каждые 30 с. Процесс гемолиза считается завершенным, когда показания прибора не изменяются (три числа подряд неизменны). Повторить опыт.

4. Взвесь форменных элементов крови и раствор кислоты подогреть на 10° С относительно температуры воздуха. Провести аналогичные мероприятия и измерения. Опыт повторить.

5. Вычислить температурный коэффициент гемолиза и кажущуюся энергию активации процесса.

Задание №4. Определение температурного коэффициента и энергии активации фотосинтеза в веточке элодеи

Материалы и оборудование: пробирка, цилиндр или большой стакан, стеклянная палочка, термометр, секундомер, элодея.

Методика выполнения работы.

Скорость фотосинтеза в веточке элодеи можно оценить по количеству пузырьков О₂, выделяющихся из среза стебля.

1. В цилиндр и пробирку наливают воду комнатной температуры.

2. Выбирают свежую веточку элодеи и острой бритвой обновляют срез стебля у ее основания для того, чтобы освободить засорившиеся межклеточные ходы в стебле.

3. Веточку элодеи привязывают ниткой к стеклянной палочке так, чтобы свежесрезанный кончик был направлен кверху, и погружают в пробирку. Пробирку с веткой помещают в цилиндр с водой комнатной температуры.

4. Считают количество пузырьков, выделяющихся из среза за одну минуту. Такой подсчет нужно сделать 3 раза и вычислить среднее арифметическое.

5. Повышают температуру воды во внешнем цилиндре на 10С, добавляя в цилиндр горячую воду и контролируя температуру по термометру, погруженному в пробирку.

6. Повторяют операции п. 4.

7. Оформляют результаты работы в виде таблицы.

8. Вычисляют Q₁₀ и Е по вышеуказанным формулам

Абс. температура, К	Повторность	Число пузырьков	Среднее число пузырьков
	1
	2
	3
	1
	2
	3

Литература:

Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Д. (1999). Биокинетика. М: Гранд, с 13-23

Билибин Д.П. Практикум по физиологии, с 75, 1970

Гизе А. Физиология клетки. М: Изд. Иностранной литературы, 1959. Гл. 5. Приложение, с. 60

Руководство к практическим занятиям по физиологии человека и животных. 2-е издание. (2004) (Ред. И.П. Ашмарин, А.А. Каменский, Г.С. Сухова). М: изд. МГУ, с.78-81