- •Введение
- •Оформление работы:
- •1. Дата.
- •2. Тема: номер и название работы.
- •Организация учебного процесса по биохимии
- •Правила техники безопасности при работе в биохимической лаборатории
- •Тема 1. Реакция среды
- •Работа 1. Определение реакции среды молока и яйца с помощью универсальной индикаторной бумаги
- •Работа 2. Определение реакции среды бесцветных растворов с помощью прибора Михаэлиса
- •Работа 3. Определение рН гомогената мышечной ткани, раствора яичного белка с помощью прибора Михаэлиса Приготовление гомогената из тканей животных
- •Ход опыта
- •Лучи света
- •Матовое стекло
- •Работа 4. Определение рН растворов и биологического материала электрометрическим (потенциометрическим) методом
- •Вопросы для самоподготовки по теме 1
- •Тема 2. Буферные системы
- •Работа 5. Приготовление ацетатного буферного раствора и изучение зависимости величины рН от соотношения компонентов
- •Работа 6. Изучение действия на буферный раствор небольшого количества кислоты
- •Работа 7. Изучение действия на буферный раствор большого количества кислоты
- •Работа 8. Изучение действия небольшого количества щелочи на буферный раствор
- •Работа 9. Изучение действия на буферный раствор большого количества щелочи
- •Работа 10. Влияние разбавления водой буферного раствора на величину его рН
- •Вопросы для самоподготовки по теме 2
- •Тема 3. Коллоидные растворы
- •Работа 11. Получение гидрофобного коллоидного раствора гидроксида железа Fe(oh)3.
- •Работа 13. Диализ коллоидных растворов
- •Работа 14. Изучение механизма коагуляции золя железа
- •Работа 15 . Изучение защитного действия гидрофильных коллоидов (эмульсоидов)
- •Вопросы для самоподготовки по теме 3
- •Tеma 4. Адсорбция и абсорбция
- •Работа 16. Адсорбция органических красок животным углем
- •Работа 17. Определение количества уксусной кислоты, адсорбированной животным углем
- •Вопросы для самоподготовки по теме 4
- •Тема 5. Химия и обмен белков
- •Работа 18. Определение количества белка в гомогенате мышечной ткани, яйце рефрактометрическим методом
- •Работа 19. Определение белка по методу Лоури
- •Работа 20. Разделение смеси аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге
- •Работа 21. Определение количества аминокислот в биоматериале по азоту аминогрупп методом формольного титрования по Серенсену
- •Работа 22. Изучение действия пепсина на переваривание белка
- •Вопросы для самоподготовки по теме 5
- •Тема 6. Ферменты (энзимы)
- •Работа 23. Приготовление раствора фермента -амилазы (кф 3.2.1. 1) слюны
- •Работа 24. Обнаружение в слюне амилазы и определение специфичности ее действия
- •Работа 25. Изучение влияния рН среды на активность амилазы слюны
- •Работа 26. Изучение влияния температуры на активность энзимов
- •Работа 27. Изучение действия активаторов и ингибиторов на активность ферментов
- •Вопросы для самоподготовки по теме 6
- •Тема 7. Углеводы и их обмен
- •Работа 28. Изучение механизма переваривания углеводов и определение активности -амилазы (кф 3.2.1.1.) слюны
- •Работа 29. Обнаружение гликогена в тканях животных
- •Вопросы для самоподготовки по теме 7
- •Тема 8. Липиды и их обмен
- •Работа 30. Изучение растворимости жира
- •Работа 31. Определение кислотного числа жира
- •Работа 32. Определение йодного числа.
- •Работа 33. Исследование эмульгирования жира
- •Работа 34. Изучение механизма переваривания липидов и определение активности панкреатической липазы (кф 3. 1. 1. 3)
- •Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
- •Вопросы для самоподготовки по теме 8
- •Тема 9. Витамины
- •Работа 36. Обнаружение витамина а в жире
- •Работа 37. Обнаружение витамина д в жире
- •Работа 38. Обнаружение витамина с в биоматериале
- •Вопросы для самоподготовки по теме 9
- •Тема 10. Минеральные вещества и вода
- •Работа 39. Определение количества кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани по де Ваарду
- •Работа 40. Определение содержания кальция в молоке и гомогенате мышечной ткани комплексонометрическим методом
- •Работа 41. Определение количества неорганического фосфора в молоке и гомогенате мышечной ткани
- •Вопросы для самоподготовки по теме 10
- •Тема 11. Молоко
- •Работа 42. Определение общей кислотности молока по Тернеру
- •Работа 43 Выделение казеиногена из молока и исследование его свойств.
- •Работа 44. Определение редуктазы молока
- •Работа 45. Определение количества лактозы в молоке с помощью рефрактометра
- •Вопросы для самоподготовки по теме 11
- •Рекомендуемая литература.
Работа 35. Реакция обнаружения холестерола в растительном и животном маслах.
Реакция Сальковского на холестерол
Под действием концентрированной серной кислоты происходит дегидратация молекулы холестерола с образованием холестерилена – соединения, окрашенного в красный цвет.
Реактивы: а) холестерол, 1%-ный хлороформный раствор, или растительное масло, хлороформный раствор;
б) серная кислота, концентрированная (р20=1,836).
К 2-3 мл хлороформного раствора холестерола (или растительного масла) в пробирке осторожно, наслаивая по стенке, добавляют 1-2 мл концентрированной серной кислоты. Пробирку легко встряхивают. Вначале верхний слой, а затем и вся жидкость в пробирке принимает красную, оранжевую или красно-фиолетовую окраску.
Реакция Либермана – Бурхарда на холестерол
При реакции холестерола с уксусным ангидридом и серной кислотой образуются сульфокислоты холестерилена, обладающие сине-зеленой или зеленой окраской.
Реактивы: а) холестерол, 1%-ный хлороформный раствор, или растительное масло, хлороформный раствор;
б) уксусный ангидрид;
в) серная кислота, концентрированная (р20=1,836).
Ход опыта
В пробирку наливают 2-3 мл хлороформного раствора холестерола или растительного масла, прибавляют 10 капель уксусного ангидрида и наслаивают по стенке 2-3 капли концентрированной серной кислоты. Через 5-8 мин появляется вначале красное, затем сине-зеленое и зеленое окрашивание расщепляется на свои компоненты в клетках эпителия кишечных ворсинок.
Освободившиеся желчные кислоты всасываются в кровь и через систему воротной вены снова поступают в печень. Жирные же кислоты вступают в сложноэфирную связь с глицерином, образуя жир, свойственный ужу данному виду животного.
Гидролиз фосфолипидов катализируется ферментами фосфолипазами (А,В,С,D), расщепление холестеридов происходит под влиянием холестеролэстеразы.
Задание: 1. Выполнить опыт.
2. Написать химическую структуру холестерола.
3. Биологическая роль холестерола.
4. Применение методов определения холестерола в работе товароведа-эксперта.
Вопросы для самоподготовки по теме 8
1. Липиды и липоиды (понятие, свойства, классификация, биороль).
2. Холестерол (строение, роль, производные).
3. Желчные кислоты (представители, строение, роль).
4. Фосфолипиды (строение, представители, роль).
5. Сфинголипиды (строение, представители, роль).
6. Ацилглицеролы (строение, переваривание, всасыва-
ние продуктов гидролиза, роль желчных кислот в этих процессах).
7. Жирные кислоты (высшие, низшие, заменимые, незамени- мые, предельные, непредельные), строение, представители, роль.
8. Пути использования глицерина и жирных кислот (-окис-ление - схема и др.) в клетках. Роль процессов.
9. Ацетоновые тела (представители, причины и схема их образования, пути устранения).
10. Регуляция обмена липидов в организме животных и человека с целью сохранения их здоровья.
Тема 9. Витамины
Витамины - физиологически активные вещества, принимаю- щие разнообразное участие в обмене веществ живых организмов непосредственно или в составе сложных ферментов в виде коферментов и простетических групп.
Витамины - органические вещества с разнообразным строени- ем молекул и различными физико-химическими свойствами. Все витамины подразделяются на две большие группы: жирорастворимые (A, D, E, K) и водорастворимые (витамины группы В, аскорбиновая кислота).
Определение их в кормах и продуктах питания имеет существенное значение, так как от них зависят здоровье и продуктивность животных. Недостаток витаминов в организме (гиповитаминоз) и избыток (гипервитаминоз) имеют отрицатель-ные последствия.