Технологічна карта проведення практичного заняття

	ЕТАП	Час, хв	Навчальні посібники	Місце проведення
1	Корекція знань та вмінь студентів шляхом розв’язання навчальних задач	35	Довідкові дані, набір завдань	Навчальна аудиторія
2	Виконання лабора-торної роботи, оформлення протоколу	30	Реактиви для визна-чення активності амі-лази в сироватці крові, хім. посуд, фотоелек-троколориметр
3	Тестовий контроль	10	Збірник тестових зав-дань з біохімії для підготовки студентів до медичного ліцен-зійного іспиту “Крок-1”
4	Аналіз і підведення підсумків заняття	5

Граф логічної структури теми “Визначення активності ферментів, дослідження механізму їх дії”

Механізм дії ферментів. Визначення активності ферментів

Термодинамічні закономірності ферментативного каталізу

Одиниці активності ферментів

Стадії ферментативного каталізу

Загальні принципи визначення актив-ності ферментів

Молекулярні механізми ферментативного каталізу

Створення оптималь-них умов

І Утворення фермент-субстратного комплексу

Ефект зближення та орієнтації

Визначення за зміною концентрації субстрату або продукту реакції

ІІ Активація фермент-субстратного комплексу

Ефект деформації субстрату

Використання фізико-хімічних методів дослідження

ІІІ Утворення продукту реакції і відділення його від ферменту

Ефект кислотно-основного каталізу

Ефект ковалентного каталізу

Заняття 7

Тема. Вивчення кінетики ферментативного каталізу. Дослідження ролі кофакторів та коферментних вітамінів у прояві каталітичної активності ферментів

Актуальність теми. Однією з характерних рис життя є здатність живих організмів кінетично регулювати хімічні реакції, пригнічуючи намагання до досягнення термодинамічної рівноваги. Ферментативна кінетика досліджує закономірності впливу різних факторів на швидкість реакції. Вивчення кінетики ферментативних реакцій дає інформацію для з’ясування молекулярних механізмів дії ензимів, передбачення імовірності, напрямку і швидкості реакцій.

Мета загальна – уміти пояснювати основні кінетичні закономір-ності перебігу ферментативних реакцій, роль кофакторів різної природи в дії ензимів.

Конкретні цілі, уміти:

1. Зображати і пояснювати графіки залежності перебігу фермен-тативних реакцій від концентрації ферменту, субстрату, рН і температури.

2. Трактувати роль вітамінів та їх біологічно активних похідних у механізмах ферментативного каталізу.

3. Пояснювати механізм утворення множинних форм ферментів і переваги визначення ізоферментів у біооб’єктах.

При підготовці до заняття користуйтеся літературою:

1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. - Київ; Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. - С. 103-108.

2. Гонський Я.І., Максимчук Т.П. Біохімія людини. - Тернопіль: Укрмедкнига, 2001. - С. 67–69, 83–88.

3. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. - М.: Медицина, 1998. - С. 126–129, 134–139.

4. Мари Р. и соавт. Биохимия человека. – М.: МИР, 1993. – Т.1, С. 81-90.

Теоретичні питання

1. Кінетика ферментативних реакцій: залежність швидкості ре­­­акцій від концентрації ферменту, субстрату, рН та температури.

2. Константа Міхаеліса-Ментен, її смислове значення. Обробка рівняння Міхаеліса-Ментен за методом подвійних зворотних величин – рівняння Лайнуївера-Берка.

3. Використання К_m для характеристики активності ферментів і передбачення можливості перебігу метаболічних процесів у клітині.

4. Ізоферменти – множинні молекулярні форми білків, результат експресії різних генетичних локусів.

На занятті ви повинні будете виконати експериментальну частину роботи згідно з алгоритмом лабораторної роботи та методикою її проведення.