- •Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии
- •Часть 1
- •Методические указания к практической работе
- •Практическая работа
- •1. Ознакомиться с иммерсионной системой микроскопа
- •8. Просмотр фильмов: «Живая клетка», «l-формы бактерий», «Спора»
- •9. Просмотр фильма: «Жизнь бактериальной клетки»
- •2. Изучение мазка из культуры Bac.Anthracis, окрашенного по Гутштейну (клеточная стенка)
- •3. Изучение устройства фазово-контрастного микроскопа
- •Методические указания к практической работе
- •5. Изучение устройства темнопольной микроскопии
- •Методические указания к практической работе
- •3. Изучение и зарисовка демонстрационных препаратов грибов Mucor, Aspergillus, Penicillium
- •1. Изучение методики приготовления пластинчатого агара
- •Характеристика роста исследуемых культур
- •3. Изучение методики посева культуры на пестрый ряд
- •1. Знакомство со средами и аппаратурой для культивирования анаэробов
- •4. Итоговая контрольная работа по теме: «Физиология микроорганизмов (химический состав, питание, дыхание, питательные среды, ферменты, размножение, стерилизация, дезинфекция)»
- •Характеристика типовых штаммов, входящих в задачи
- •Характеристика выделенных культур
- •1. Знакомство с методикой забора водопроводной воды для бактериологического исследования
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл питьевой воды централизованного хозяйственно-питьевого водоснабжения
- •Расчет наиболее вероятного числа бактерий (нвч) в 100 мл воды водоемов
- •5. Знакомство с методикой определения количество микроорганизмов в воздухе
- •2. Знакомство с устройством и работой автоклава, сухожаровой печи
- •2. Изучить методы, доказывающие спонтанные мутации у бактерии:
- •4. Зарисовать схему строения бактериофага
- •5. Определить титр бактериофага
- •Результаты титрования фага по методу Грациа
- •Интерпретация значений диаметров зон задержки роста при определении чувствительности микроорганизмов к антимикробным препаратам (Среда агв)
- •Допустимые пределы диаметров зон задержки роста
- •Эталонных штаммов при контроле воспроизводимости
- •И точности результатов диско-диффузионного метода
- •(Среда агв)
- •Определение степени чувствительности кишечной палочки к стрептомицину
- •1. Изучение окрашенных по Граму мазков-отпечатков из органов
- •6.1. Возбудитель холеры
- •1. Зарисовка демонстрационных препаратов холероподобного и Эль-Тор вибрионов
- •Патогенез холеры
- •4. Нарисовать колонии вибрионов на средах сэдх и tcbs
- •6.2. Возбудитель чумы
- •1. Изучение мазка из чистой культуры Yersinia pestis, окраска метиленовым синим
- •2. Изучение Yersinia pestis в мазке-отпечатке из органов, окрашенном по Граму
- •3. Изучение колоний вакцинного штамма палочки чумы на среде Туманского
- •Диагностика иерсиниоза
- •Диагностика холеры
- •Бактериологическая диагностика чумы
- •Практическая работа
- •6.1. Возбудитель туляремии
- •6.2. Возбудитель бруцеллеза
- •6.3. Возбудитель сибирской язвы
- •Бактериологическая диагностика туляремии
- •Бактериологическая диагностика бруцеллеза
- •Бактериологическая диагностика сибирской язвы
- •Список сокращений
6.3. Возбудитель сибирской язвы
1. Изучение палочек Bac.anthracis в мазках-отпечатках, окрашенных по Граму из органов белых мышей (зарисовать)
В препарате видны грамположительные палочки, длина которых достигает или превышает диаметр клеток ткани органа, располагающиеся попарно или в виде коротких цепочек, окруженные капсулой.
2. Изучение мазка из чистой культуры Bac.anthracis, окрашенного по Ожешко (для обнаружения спор)
Бациллы сибирской язвы образуют споры овальной фермы, расположенные в центре и не превышающие поперечника микробной клетки. В препарате, окрашенном по методу Ожешко, споры приобретают красный цвет, а тело бактерий - синий.
З. Изучение колоний вакцинного штамма возбудителя сибирской язвы (зарисовать)
На МПА видны крупные серебристо-серые, зернистые, с неровным краем колонии (R-форма). При изучении колоний под микроскопом с небольшим увеличением наблюдают отходящие от краев колонии пучки нитей, имеющих сходство с переплетенными косичками или их обычно сравнивают с "львиной гривой» или с «головой Медузы Горгоны» (зарисовать).
Схема 7
Бактериологическая диагностика туляремии
Кожная реакция ГЗТ (проба с тулярином)
Схема 8
Бактериологическая диагностика бруцеллеза
Кожная реакция ГЗТ (проба Бюрне)
Схема 9
Бактериологическая диагностика сибирской язвы
Кожная проба с антраксином
4. Знакомство с препаратами для специфической диагностики, профилактики и лечения сибирской язвы (записать в тетрадь)
Специфическая профилактика осуществляется лицам, подвергающимся опасности заражения сибирской язвой (работникам предприятий по переработке кожевенного сырья и шерсти, мясокомбинатов, ветеринарным работникам, работникам лабораторий, работающим с возбудителем сибирской язвы), проводят профилактические прививки сибиреязвенной живой сухой вакциной для накожного и скарификационного применения (СТИ).
Сибиреязвенная вакцина СТИ. Названа в честь санитарно-технического института, в котором была впервые разработана Гинсбургом и Тамариным. Вакцина представляет собой высушенную взвесь живых спор вакцинного штамма сибиреязвенных бацилл. Вакцинный штамм получен путем отбора стойких мутантов бескапсульных сибиреязвенных бацилл. Он проявляет резко пониженную вирулентность в отношении лабораторных животных и практически непатогенен для кроликов и овец. Вакцина предназначена для специфической профилактики сибирской язвы у людей, создает иммунитет продолжительностью до 1 года. Вакцинацию проводят в плановом порядке и по эпидемическим показаниям. Плановую профилактику против сибирской язвы осуществляют людям, чьи профессии связаны с риском заражения; работники мясокомбинатов; лица, занятые сбором и переработкой сырья животного происхождения; лицам, работающим с живыми культурами или с зараженными лабораторными животными. Эту же вакцину вводят для профилактики в ветеринарной практике.
Вакцину вводят накожным или подкожным способом однократно. Непосредственно перед прививками ампулу с сухой вакциной вскрывают, шприцом вводят в нее 1 мл 30% раствора глицерина (приложен к коробке с вакциной), слегка встряхивают до получения равномерной взвеси. На кожу верхней трети плеча наносят (после предварительной обработки кожи спиртом или эфиром) 2 капли вакцины и делают насечки через каждую каплю. Прививка проводится с 14 лет, первичная вакцинация состоит из 2-х прививок с интервалом 21 день, ревакцинация проводится ежегодно.
Разработана и широко применяется другая отечественная комбинированная (живая+инактивированная) вакцина на основе ослабленных живых споровых культур сибиреязвенной бациллы и одного из антигенов микроорганизма, сорбированного на гидроокиси алюминия (для усиления иммунного ответа).
В США разработана и применяется инактивированная вакцина для человека против сибирской язвы.
Экстренная профилактика – антибиотики (феноксиметил-пенициллин по 1 мг 3 раза в течение 5 дней, тетрациклин по 0,5 мг 3 раза в день). Показана в течение первых 5 дней контакта; её проводят людям, соприкасавшимся с материалом, содержащим возбудитель и его споры, принимавшим участие в убое и разделке туш больных животных; лицам, ухаживавшим за больными животными и принимавшим участие в захоронении; приготовлявшим или употреблявшим пищу из мяса больного животного.
Менее предпочтительно использование специфического сибиреязвенного иммуноглобулина. Противосибиреязвенный иммуноглобулин. Препарат представляет собой гамма-глобулиновую фракцию сыворотки крови лошадей, гипериммунизированных живой сибиреязвенной вакциной и вирулентным штаммом бацилл. Препарат обладает защитными и антитоксическими свойствами, вводят его внутримышечно для экстренной профилактики и лечения сибирской язвы, после определения чувствительности к лошадиному белку. Экстренную профилактику проводят при возникновении очага сибирской язвы людям, которые ухаживали за больными животными, принимали участие при их захоронении; людям, которые употребляли мясо больных животных; а также людям, тесно контактировавшим с больным сибирской язвой человеком (общая постель, полотенце). Введение иммуноглобулина с лечебной целью применяют в сочетании с другими методами лечения.
Антраксин. Антраксин - аллерген, представляет собой белково-полисахаридно-нуклеиновый комплекс, извлеченный при гидролизе сибиреязвенных бацилл, после предварительной термической денатурации балластных белков. Применяется для постановки кожно-аллергической пробы в диагностике сибирской язвы.
7. Рейтинг по теме: «Возбудители особо опасных и зоонозных инфекций» (возбудители холеры, чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы)
8. Подведение итогов занятия – 5 минут