- •Пензенский государственный университет медицинский институт кафедра «микробиологии, эпидемиологии и инфекционных болезней»
- •Тема 1: иммунологическая лаборатория. Основные модели в иммунологии. Особенности работы с иммунокомпетентными клетками.
- •План Программа:
- •Демонстрация:
- •Задание студентам:
- •1. Приготовление препаратов для микроскопического и серологического исследования.
- •3. Забор биологического материала с поверхности питательной среды в чашке Петри:
- •Список литературы:
- •Тема № 2: иммунитет: виды иммунитета, неспецифические факторы защиты.
- •Фагоцитоз
- •Лизоцим
- •Опыт действия лизоцима на различные виды микробов
- •Контрольные вопросы:
- •Тема № 3: иммунитет: антигены и антителообразование, иммунные реакции.
- •План: Программа:
- •Демонстрация:
- •Задание студентам:
- •Реакция агглютинации
- •Метод адсорбции агглютининов по Кастеллани
- •1. Ориентировочная реакция агглютинации
- •2. Реакция развернутой агглютинации с целью серотипирования e. Сoli
- •Контрольные вопросы:
- •Список литературы:
- •Тема № 4: иммунитет: иммунологическая память и толерантность.Трансплантационный иммунитет.Иммунные реакции.
- •Иммунологическая толерантность
- •1. Реакция агглютинации по Видалю с целью серодиагностики брюшного тифа
- •2. Рнга с VI-эритроцитарным диагиостикумом
- •Контрольные вопросы:
- •Список литературы:
- •Информационный материал При бактериальных инфекциях различают: антибактериальный иммунитет - иммунитет против структурно-функциональных компонентов бактериальной клетки
- •Противовирусный иммунитет – иммунитет при вирусных инфекциях
- •1. Реакции Вассермана (серодиагностика сифилиса)
- •2. Рск с целью раздельного определения IgM и IgG
- •3. Титрование комплемента
- •4.Рск с целью раздельного определения IgM и IgG в сыворотке больного сыпным тифом.
- •Список литературы:
- •Тема № 6: Иммунитет: гнт и гзт. Антитоксический иммунитет.
- •Антитоксины
- •Применение аллергических проб для диагностики заболевания
- •3. Реакция флоккуляции
- •Список литературы:
- •Тема№ 7: иммунитет: иммунные реакции с использованием меченых антител или антигенов. Иммунобиологические препараты.
- •Список литературы:
- •Вопросы к коллоквиуму №1
1. Реакция агглютинации по Видалю с целью серодиагностики брюшного тифа
Для постановки реакции берут:
сыворотку исследуемого больного для определения в ней антител;
О - и Н-диагноста кумы бактерий брюшного тифа, паратифа А и паратифа В;
физиологический раствор.
Кровь для получения сыворотки берут в количестве—15—20 капель путем укола мякоти пальца или 2 —3 мл при помощи венепункции.
Дают крови свернуться в термостате в течение 30—60 минут, затем простерилизованной петлей обводят сгусток, отделяя его от стенки пробирки, и дают отстояться сыворотке на холоду до образования над сгустком прозрачного слоя. Сыворотку помещают пипеткой в отдельную пробирку. Первое разведение (1:50) делают при помощи пипетки—0,1 мл сыворотки + 4,9 мл физиологического раствора. Дальнейшие разведения (1:100— 1:200 — 1 : 400—1:800) готовят по обычной схеме.
Берут 6 рядов пробирок по 6 пробирок в каждом. По 1 мл сыворотки разведения 1: 100 наливают в первую пробирку каждого ряда, 1: 200 — во вторую, 1 : 400 — в третью и т. д.; в шестую, контрольную, пробирку наливают 1 мл физиологического раствора.
Во все пробирки первого ряда добавляют по 1—2 капли брюшнотифозного Н-диагностикума; в пробирки второго ряда — брюшнотифозный 0-диагностикум; в пробирки третьего я четвертого ряда добавляют А-паратифозный, Н - и 0-диагностикумы, а в 5-й и 6-й ряд— В-паратифозный H - и 0-диагностикум. Пробирки ставят в термостат на 2 часа, отмечают результат реакции, затем оставляют при комнатной температуре на сутки; после этого срока дают заключение об окончательном результате реакции.
Возбудителем заболевания считается тот микроб, который агглютинируется сывороткой больного. Реакция считается положителыной, если агглютинация произошла хотя бы в первой пробирке с разведением 1: 100; обычно она наступает в больших разведениях. Если происходит групповая агглютинация с двумя или с тремя антигенами, то за возбудителя болезни принимается тот микроб, с которым произошла агглютинация в наиболее высоком разведении сыворотки.
Нагрузочные реакции
2. Рнга с VI-эритроцитарным диагиостикумом
Тип реакции - реакция непрямой гемагглютинации.
Исследуемый материал - сыворотка крови обследуемого.
Диагностический препарат - Vi-эритроцитарный диагностикум (взвесь в физиологическом растворе эритроцитов барана с нагруженными на них Vi - антигенами S.typhi ).
Принцип реакции: к разведениям сыворотки обследуемого добавляют Vi-эритроцитарный диагностикум.
Положительный результат – гемагглютинат ("зонтик"); отрицательный результат - плотный осадок эритроцитов на дне лунки ("пуговка").
Диагностический тигр реакции 1/ 40.
Применение: отбор лиц, имеющих титр антител к Vi – антигенам S.typhi выше диагностического.
Трактовка результатов: лица с положительной реакцией в титре выше, чем 1/40 считаются подозрительными на бактерионосительство S.typhi и подлежат бактериологическому обследованию на наличие S.typhi в кале, моче и желчи.
Контрольные вопросы:
1.Каков механизм иммунологической толерантности?
2. Какими свойствами обладают толерогены?
3.Что изучает трансплантология?
4.Какие виды антител Вы знаете?
5.Что такое серодиагностика?
6.Каков механизм реакции развернутой агглютинации.