- •Основы инфузионно-трансфузионной терапии
- •1. Общая характеристика трансфузиологии
- •2. Определение групп крови
- •Подробные сведения по вопросу «Определение группы крови системы аво стандартными изогемагглютинирующими сыворотками».
- •1. Необходимое оснащение.
- •2. Проведение исследования.
- •2. Ошибки при определении группы крови системы аво стандартными гемагглютинирующими сыворотками.
- •Б. Определение группы крови с помощью цоликлонов (моноклональных антител)
- •Подробные сведения по вопросу «Определение группы крови системы аво цоликлонами»
- •В. Перекрёстный способ определения групп крови системы ав0.
- •3. Резус-фактор. Определение резус-принадлежности
- •1. Оснащение:
- •2. Проведение исследования.
- •3. Учёт результатов.
- •2. Оснащение.
- •3. Проведение исследования на плоскости.
- •4. Оценка результата.
- •4. Действие перелитой крови на организм
- •5. Методы и пути гемотрансфузий
- •6. Показания и противопоказания к переливанию крови
- •7. Донорство и доноры
- •8. Компоненты крови, препараты крови и кровезаменители
- •Подробные сведения по вопросу «Компоненты крови, препараты крови и кровезаменители»
- •1. Предоперационная заготовка компонентов аутокрови.
- •2. Предоперационная гемодилюция.
- •3. Интраоперационная реинфузия крови.
- •Признаки эффективности внутривенной инфузии при шоке
- •Общие сведения об обмене воды в организме человека
- •2. Производные декстрана (среднемолекулярные и низкомолекулярные).
- •3. Препараты желатина. Желатина – это денатурированный белок, получаемый из коллагена животных тканей.
- •9. Организация трансфузионной терапии в отделении
- •Мероприятия перед гемотрансфузией
- •Оценка годности консервированной крови.
- •Подробные сведения по вопросу «Организация гемотрансфузии в отделении»
- •1. Проба на индивидуальную совместимость на плоскости при комнатной температуре (проба на групповую совместимость по системе аво).
- •2. Проба на индивидуальную совместимость с применением 33% раствора полиглюкина (проба на резус - совместимость).
- •10. Посттрансфузионные реакции и осложнения
- •Подробные сведения по вопросу «посттрансфузионные осложнения (пто)»
- •1) Острый иммунный гемолиз (гемотрансфузионный шок, опн).
- •1. Пирогенные реакции.
- •2. Антигенные негемолитические гипертермические реакции.
- •3. Аллергические реакции (крапивница, отёк Квинке, бронхоспазм).
- •4. Анафилактический шок.
- •1. Бактериальный шок.
- •2. Осложнения, вызванные недоброкачественностью перелитой крови. Острый неиммунный гемолиз.
- •2. Острая гиперволемия (острая волемическая перезрузка).
- •3. Воздушная эмболия.
- •4. Тромбэмболия.
- •1. Цитратная интоксикация.
- •2. Нарушения гемостаза. Двс – синдром.
- •3. Ацидоз.
- •4. Гиперкалиемия.
- •5. Гипотермия.
- •6. Синдром острого поражения лёгких (сопл).
- •1. Заражение сифилисом.
- •2. Заражение малярией.
- •3. Заражение вирусным гепатитом.
- •4. Заражение вирусом иммунодефицита человека (вич).
- •5. Заражение вирусом простого герпеса (впг), цитомегаловирусом ( цмв) и вирусом Эпстайна – Бара( вэб).
- •Заключение
В. Перекрёстный способ определения групп крови системы ав0.
Это одновременное распознавание антигенов в эритроцитах исследуемой крови с помощью стандартных сывороток (цоликлонов) и выявление антител, содержащихся в сыворотке этой крови, с помощью стандартных эритроцитов.
Определение группы крови системы АВ0 стандартными эритроцитами
Необходимы стандартные эритроциты трёх групп крови 0(I); А(II); В(III). Стандартные эритроциты группы 0(I) являются контрольными (в них нет антигеновАиВ). Стандартные эритроциты приготавливают на СПК из крови доноров с заранее известной группой крови; хранят при +40+50+ 60С. Срок годности 2 года. Для определения группы крови, в пробирку берут 3 – 5 мл крови (без стабилизатора). Кровь должна отстояться или её центрифугируют для разделения на сыворотку и эритроциты. На тарелку наносят в три точки по одной большой капле (0,1мл) сыворотки исследуемой крови из пробирки, а рядом с ними (соответственно маркировке) – по одной маленькой капле (0,01мл) стандартных эритроцитов групп 0(I), А(II), В(III).
Дальнейшие действия проводятся подобно определению группы крови стандартными сыворотками: соответствующие капли исследуемой сыворотки и стандартных эритроцитов смешивают отдельными стеклянными палочками (уголками предметного стекла), пластинку периодически покачивают и наблюдают за реакцией.
В те капли, где наступила агглютинация, но не ранее, чем через три минуты, добавляют по одной капле изотонического раствора, перемешивают и продолжают наблюдение при периодическом покачивании пластинки до истечения 5 минут. После чего оценивают результаты исследования.
Одновременно с вышеописанным исследованием со стандартными эритроцитами проводится исследование со стандартными сыворотками по ранее изложенному способу.
При определении групповой принадлежности крови перекрёстным способом оценивают данные, полученные при обеих реакциях (со стандартными сыворотками и стандартными эритроцитами).Результат перекрёстного способа считается достоверным, если, при оценке результатов исследований со стандартными сыворотками и со стандартными эритроцитами, совпадают ответы о группе исследуемой крови.
Если этого совпадения не происходит, исследования следует вновь переделать.
Результаты реакций со стандартными эритроцитами |
Сыворотка исследуемой крови содержит антитела |
Исследуемая кровь принадлежит к группе | |||
В(III) |
А(II) |
О(I) | |||
эритроцитарный антиген В. |
эритроцитарный антиген А. |
В эритроцитах нет антигенов А и В. | |||
+
|
+
|
- |
анти – А и анти – В |
О(I) | |
+
|
- |
- |
анти – В |
А(II) | |
- |
+
|
- |
анти – А |
В(III) | |
- |
- |
- |
не содержит антител «анти –А» и «анти- В». |
АВ(IV) |
Знаком плюс (+) обозначено наличие агглютинации;
Знаком минус (-) обозначено отсутствие агглютинации
3. Резус-фактор. Определение резус-принадлежности
В эритроцитах 85 % людей имеется особый антиген, названный Резус-фактором (антиген D). Такие люди считаются резус-положительными, а остальные 15%, не имеющие в крови Резус-фактора (антигена D), — резус-отрицательными. Резус-фактор (антиген D) передается по наследству как аутосомный доминантный признак.
В отличие от групповых агглютининов системы АВ0, в крови человека не содержится, подобных агглютининам α и β, естественных антител к Резус-фактору (антигену D). Их появление всегда связано с иммунизацией, т.е. попаданием в организм Резус-фактора (антигена D) . Самой частой причиной такой иммунизации является беременность резус-отрицательной женщины резус-положительным плодом, который унаследовал Резус-фактор (антиген D) от отца.
Антирезусные антитела могут вырабатываться также при ошибочном переливании резус-отрицательному реципиенту резус-положительных эитроцитов крови. При последующей такой гемотрансфузии может возникнуть тяжелое осложнение, связанное с резус-несовместимостью.
И, наконец, возможна искусственная иммунизация отобранных резус-отрицательных доноров-мужчин по специальной схеме малыми порциями резус-положительной крови. Такая иммунизация проводится для последующего получения от этих доноров антирезусной сыворотки. Таким образом, в отличие от групповых факторов системы АВ0, антитела к Резус-фактору (антигену D) всегда иммунные и требуют специальных методов для их выявления.
В настоящее время установлено, что помимо Резус-фактора существует около 40 родственных антигенов, объединяемых в систему антигенов DCE(илиRh-hr) — систему «Резус». Фактор С встречается у 70% людей, факторE- у 30%.
Резус-отрицательная кровь — это кровь, содержащая антигены системы Резус в таких количествах и разновидностях, которые не имеют существенного значения и не учитываются при переливании крови.
В эритроцитах резус-отрицательных людей имеются также факторы системы «резус», обозначаемые символами d, с, е. Факторы «С», «Е», «с» и «е» причиной трансфузионных реакций и осложнений бывают редко, причем последние чаще наблюдаются в акушерской практике. Их частота и тяжесть находятся в прямой зависимости от числа беременностей, родов, абортов и гемотрансфузий.
Наиболее частой причиной посттрансфузионных реакций и осложнений в системе «Резус» является антиген D: по своей антигенности (способности выработки антител) он занимает второе место после антигенов А и В.
Определение резус-принадлежности кровиявляется обязательным у всех доноров и больных, которым назначается гемотрансфузия, так же, как и определение группы крови системы АВ0. Оно проводится в лаборатории специалистом, прошедшим специальную подготовку, — лаборантом или врачом. Наиболее часто в лечебной практике используются два метода: определение резус-принадлежности в пробирке с помощью сыворотки (реагента) анти-D и реакция агглютинации на плоскости с помощью цоликлона анти-D (моноклональных анти-Dантител).
Определение резус-принадлежности в пробирке с помощью антирезусной сыворотки (сыворотки анти-D).Для этого метода используется стандартный универсальный реагент, представляющий собой сыворотку анти-D с добавлением 33 % полиглюкина в качестве коллоидной среды. Для исследования может быть использована свежая несвернувшаяся кровь, взятая из пальца (из вены) непосредственно перед использованием, или консервированная кровь без предварительной обработки, а также эритроциты из пробирки после формирования сгустка и отстаивания сыворотки. Допускается хранить образец крови до определения в холодильнике при температуре от +4 до +6 °С в течение 2 — 3 суток.
Методика проведения. Исследование проводят в центрифужных пробирках объемом не менее 10 мл. На дно пробирки вносят каплю стандартного универсального реагента анти-D, представляющего собой антирезусную сыворотку группы АВ (IV), содержащую 33% раствор полиглюкина. Затем в нее добавляют одну каплю исследуемой крови (или эритроцитов). Наклоном и круговым вращением пробирки содержимое размазывают по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию и делает ее крупнолепестковой. Агглютинация на стенках пробирки наступает, как правило, в течение первой минуты, но для образования устойчивого комплекса антиген — антитело и четкой агглютинации наблюдать следует не менее 3 мин. Затем для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 3 мл физиологического раствора и перемешивают путем 3-х кратного перевертывания пробирки (без взбалтывания).
Оценка результатов. Пробирку просматривают на свет. Результат определяется по наличию или отсутствию агглютинации. Наличие агглютинации (крупные хлопья на фоне просветленной жидкости) указывает на резус-положительную принадлежность исследуемой крови. Отсутствие агглютинации (в пробирке гомогенно окрашенная розовая жидкость) свидетельствует о резус-отрицательной принадлежности исследуемой крови.
Реакция агглютинации на плоскости с помощью цоликлонов анти-D.Используется специальный реагент, содержащий антитела к резус-фактору (цоликлон анти-D супер или аналогичные). На пластинку или планшет наносят большую каплю (около 0,1 мл) реагента, а рядом маленькую каплю (0,02 мл) исследуемых эритроцитов. Тщательно смешивают реагент с эритроцитами стеклянной палочкой (уголком предметного стекла). Через 10 — 20 секунд начинают мягко покачивать пластинку. Несмотря на то, что четкая агглютинация наступает почти мгновенно, результаты реакции учитывают через 3 минуты после смешивания. При наличии агглютинации исследуемая кровь маркируется как резус-положительная, при отсутствии — как резус-отрицательная.
Подробные сведения по вопросу «Определение резус–принадлежности крови»
Определение резус–принадлежности крови больного заключается в выявлении в эритроцитах исследуемой крови антигена Rhо(D). Из входящих в систему Резус шести основных эритроцитарных антигенов (D–d; С – с; Е – е) наиболее активным является антигенRhо(D), который и подразумевается под термином «Резус–фактор». Именно по наличию или отсутствию антигена эритроцитовRhо(D) делят реципиентов на резус–положительных и резус–отрицательных.
Для определения резус – принадлежности чаще используют два экспресс – метода.
А. Определение резус–принадлежности крови стандартным универсальным реагентом антирезус (анти - D) в пробирке без подогрева.
Этим универсальным реагентом является антирезусная сыворотка, лишённая групповых антител «анти–А» и «анти–В»; она пригодна для определения резус – принадлежности крови любой группы системы АВ0.