- •Б и о л о г и ч е с к а я х и м и я
- •Isbn 978-985-496-528-4
- •Методические советы студентам
- •Техника лабораторных работ и безопасность труда
- •3. Электрическими приборами
- •5. Газовыми и другими нагревательными приборами
- •6.Водопроводом
- •7. Химической посудой и вспомогательными приспособлениями
- •Занятие № 1 работа № 1. Колориметрия, общий принцип. Устройство фотоэлектроколориметра
- •Принципиальная схема устройства фотоэлектроколориметра
- •Занятие № 2 работа № 1. Цветные реакции на белки и аминокислоты
- •Биуретовая реакция на белки
- •2. Нингидриновая реакция
- •Ксантопротеиновая реакция Мульдера (на ароматические аминокислоты)
- •4. Реакция Фоля на цистеин
- •Работа № 2. Определение общего белка плазмы биуретовым методом
- •Занятие № 3 работа № 1. Осаждение белков концентрированными минеральными кислотами
- •Работа № 2. Разделение альбуминов и глобулинов яичного белка методом высаливания
- •Занятие № 4 работа № 1. Кислотный гидролиз белков
- •Работа № 2. Определение протеолитической активности трипсина
- •Занятие № 5 работа № 1. Влияние температуры на активность амилазы
- •Работа № 2. Влияние активаторов и ингибиторов на активность амилазы слюны
- •Работа № 3. Определение активности амилазы (диастазы) в сыворотке крови и моче по методу каравея
- •Занятие № 6 работа № 1. Кинетика действия липазы. Влияние желчи на активность липазы
- •Занятие № 7
- •Занятие № 10 работа № 1. Количественное определение мочевой кислоты в моче
- •Занятие № 11
- •Работа № 2. Определение активности цитохромоксидазы
- •Принцип метода. Смесь -нафтола и п-фенилендиамина (реактив «нади») окисляется цитохромоксидазой в присутствии кислорода, образуя продукт конденсации индофеноловый синий по схеме:
- •Занятие № 13 работа № 1. Количественное определение макроэргических соединений мышц
- •Занятие № 14
- •Задания для самостоятельной работы:
- •Занятие № 16 работа № 1. Качественная реакция на адреналин
- •Занятие № 17 работа № 1.
- •Занятие № 18 работа № 1. Количественное определение витамина с
- •Занятие № 19 работа № 1. Количественное определение глюкозы в крови. Энзиматический (глюкозооксидазный) метод
- •Занятие № 20
- •Занятие № 21 работа № 1. Количественное определение пировиноградной кислоты в моче
- •Занятие № 22
- •Самостоятельная аудиторная работа
- •По теме «обмен и функции углеводов»
- •Задания для самостоятельной работы:
- •Занятие № 24 работа № 1. Определение триглицеридов в сыворотке крови
- •Занятие № 25 работа № 1. Определение общего холестерина в сыворотке крови (энзиматический метод)
- •Занятие № 26 работа № 1. Определение липопротеинов низкой плотности (лпнп) в сыворотке крови
- •Занятие № 27
- •Занятие № 30 работа № 1. Определение мочевины в сыворотке крови (диацетилмонооксимный метод)
- •Занятие № 31
- •Занятие № 34 работа № 1. Определение гемоглобина гемоглобинцианидным методом
- •Работа № 2. Определение кальция фотометрическим методом
- •Занятие № 35 работа: биохимический анализ мочи
- •2. Полуколичественное определение белка.
- •3. Качественное определение глюкозы в моче (проба Гайнеса).
- •Занятие № 36 работа № 1: определение общего белка в спинномозговой жидкости биуретовым методом
- •Референтные величины основных биохимических показателей у взрослых кровь
- •Спинномозговая жидкость
- •Референтные величины основных биохимических показателей крови у детей
- •Л и т е р а т у р а
- •Тестовые задания
- •4) Шаг спирали равен 0,54 нм
- •2) Ламберта-Бугера-Бера
- •2) Концентрации субстрата, при которой скорость реакции равна максимальной скорости
- •4) Дж. Уотсон
- •2) Липолитическое (увеличивает распад жира)
- •В состав триглицеридов входят:
Занятие № 11
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ АУДИТОРНАЯ РАБОТА
ПО ТЕМЕ «БИОСИНТЕЗ БЕЛКОВ»
Задания для самостоятельной работы:
1. Написать реакции образования и строение валил-тРНК.
2. Составить схему биосинтеза дипептида метионилглутамата (стадии инициации и элонгации трансляции).
3. Рассмотреть роль генной инженерии в получении белков человека. Записать схему процесса.
4. Рассмотреть роль полимеразной цепной реакции (ПЦР) в диагностике. Записать схему ПЦР.
5. Выполнить индивидуальные задания по теме.
Дата: _______________
ЗАНЯТИЕ № 12
РАБОТА № 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АКТИВНОСТИ СУКЦИНАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. СДГ один из ключевых ферментов цикла трикарбоновых кислот, прочно связанный с внутренней мембраной митохондрий. Роль кофермента выполняет ФАД, соединенный с белком ковалентной связью. Фермент in vivo окисляет янтарную кислоту (сукцинат):
ФАД ФАДН2
СООН СООН
СН2СН
СН2сукцинатдегидрогеназа СН
(СДГ)
СООН СООН
Сукцинат Фумарат
Работа дает представление о дегидрогеназных реакциях в ЦТК.
ПРИНЦИП МЕТОДА.
Субстрат – янтарная кислота. Конечный акцептор водорода – 2,6-дихлорфенолиндофенол (синий цвет), который при восстановлении превращается в бесцветную лейкоформу. Источником фермента является отмытая мышечная ткань. В опыте (in vitro) ход реакций следующий:
Малонат является конкурентным ингибитором фермента СДГ.
ХОД РАБОТЫ:
А. Получение ферментного препарата.
2 г свежих мышц измельчают ножницами, гомогенизируют с небольшим количеством воды. Мышечную кашицу переносят на двойной слой марли (воронка) и промывают 25 мл воды. Отжатую мышечную массу переносят в пробирку, добавляют 4 мл воды, размешивают стеклянной палочкой и суспензию равномерно разливают в 4 пробирки.
Б. Определение активности фермента.
Взять четыре пробирки и приготовить инкубационные смеси в соответствии со схемой:
№пробирки отмерить |
1 |
2 |
3 |
4 |
Ферментный препарат (гомогенат ткани)
Н2О
Малонат
Сукцинат
2,6-дихлорфенолиндофенол |
1,0 мл кипячение 2 минуты
0,5 мл
-
1,0 мл
2 капли |
1,0 мл -
0,5 мл
-
1,0 мл
2 капли |
1,0 мл -
1,5 мл
-
-
2 капли |
1,0 мл -
-
0,5 мл
1,0 мл
2 капли |
Перемешать. Инкубация 15 минут при 37оС. в термостате |
РЕЗУЛЬТАТ:
ВЫВОД: