1.2.3.5.2.2 Фотоколориметрический метод

1. Рутина 0,02 г

Кислоты аскорбиновой 0,3 г

Кальция глюконата 0,5 г

Количественное определение рутина. Около 0,02 г порошка (точная масса навески) помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 15 мл 96% спирта этилового и нагревают на водяной бане 2-3 мин. при частом помешивании. После охлаждения объем раствора доводят тем же спиртом до метки и фильтруют.

К 5 мл фильтрата прибавляют 4,5 мл воды очищенной, 0,5 мл 0,1 моль/л раствора натра едкого и перемешивают. Через 15 мин. измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны около 415 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Раствор сравнения – смесь из 96% спирта этилового и воды (1:1).

Параллельно проводят реакцию с 0,5 мл 0,02% раствора РСО рутина (0,0001 г/мл), 1,4 мл 0,1% свежеприготовленного раствора аскорбиновой кислоты, 4,5 мл 96% спирта этилового, 3,1 мл воды очищенной, 0,5 мл 0,1 моль/л раствора натра едкого и через 15 мин. измеряют оптическую плотность.

Содержание рутина в граммах (Г) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Г =, где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО рутина;

а – навеска лекарственной формы, г;

Р – масса порошка по прописи, г.

Приготовление раствора РСО рутина. Около 0,0100 г (точная масса навеки) рутина растворяют в 15 мл 96% спирта этилового в мерной колбе вместимостью 50 мл при нагревании на водяной бане. После охлаждения объем раствора доводят тем же спиртом до метки.

В 1 мл раствора РСО содержится 0,0002 г рутина.

Раствор устойчив в течение месяца при хранении в защищенном от света месте.

2. Раствор фурацилина 0,02%.

Количественное определение фурацилина. К 0,5 мл лекарственной формы прибавляют точно 7,5 мл воды очищенной, 2 мл 0,1 моль/л раствора натра едкого и перемешивают. Через 20 мин. измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны около 450 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм.

Раствор сравнение – вода. Параллельно проводят реакцию с 0,5 мл 0,02% раствора РСО фурацилина (0,00010 г) и измеряют оптическую плотность.

Содержание фурацилина в граммах (Г) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО;

а – навеска лекарственной формы, мл;

Р – объем лекарственной формы, мл.

Приготовление раствора РСО фурацилина. Около 0,0200 г (точная масса навески) растворяют 70-80 мл воды очищенной в мерной колбе вместимостью 100 мл, при нагревании на водяной бане при 70-80°С. После охлаждения объем доводят водой до метки.

В 1 мл раствора РСО содержится 0,0002 г фурацилина.

Раствор устойчив в течение месяца при хранении в защищенном от света месте.

3. Кислоты фолиевой 0,001

Сахара 0,2

Количесвтенное определение кислоты фолиевой. Около 0,5 г (точная масса навески) лекарственной формы помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 5 мл 1% раствора аммиака и взбалтывают. Затем прибавляют 20 мл воды очищенной, 10 мл 0,1 моль/л раствора серебра нитрата и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают.

Оптическую плотность полученного раствора измеряют при 400 нм; толщина слоя в кювете 10 мм, в качестве раствора сравнения используют воду очищенную.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора РСО фолиевой кислоты.

Содержание кислоты фолиевой в граммах (Г) в лекарственной форме рассчитывают по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО;

Р – масса порошка по прописи, г;

а – навеска лекарственной формы, г.

Приготовление раствора РСО кислоты фолиевой. Около 0,0500 г (точная масса навеки) кислоты фолиевой вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в смеси 50 мл воды очищенной и 2 мл концентрированного раствора аммиака и доводят объем раствора водой до метки, перемешивают.

Этот раствор годен в течение 1 мес. при хранении его в прохладном, темном месте.

5 мл раствора РСО фолиевой кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2,5 мл 1% раствора аммиака, 20 мл воды, 10 мл 0,1 моль/л раствора серебра нитрата и доводят объем раствора водой до метки.

4. Раствор хлоргексидина биглюконата 0,02-0,05%.

Количественное определение хлоргексидина биглюконата. К 5 мл 0,02-0,05% исследуемого раствора прибавляют 1 мл 1% раствора хлорида окисного железа, взбалтывают и через 10 мин. измеряют оптическую плотность раствора при длине волны 400 нм; толщина слоя в кювете 10 мм.

Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность с 5 мл 0,05% раствора РСО хлоргексидина биглюконата.

Содержание хлоргексидина биглюконата в граммах (Г) в лекарственной форме рассчитывают по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО;

а – навеска лекарственной формы, мл;

Р – объем лекарственной формы, мл.

Приготовление 0,05% раствора РСО хлоргексидина биглюконата. 5 мл 20% раствора хлоргексидина биглюконата, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят водой до метки (раствор А). 5 мл раствора А доводят водой до метки в мерной колбе вместимостью 100 мл.

1 мл раствора РСО содержит 0,0005 г хлоргексидина биглюконата.

5. Раствор этакридина лактата 0,01%; 0,02%; 0,05%; 0,1% или 0,2%.

Количественное определение этакридина лактата. Помещают 10 мл (0,01%), 5 мл (0,02%), 1 мл (0,1%) или 0,5 мл (0,2%) раствора в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 1 мл 0,1 моль/л раствора кислоты хлористоводородной, 0,3 мл 0,1 моль/л раствора натрия нитрита, перемешивают 2 мин. и объем доводят водой очищенной до метки. Раствор защищают от действия света.

Измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны около 520 нм в кювете с толщиной слоя 20 мм. Окраска устойчива 5 мин. Раствор сравнения – вода.

Параллельно проводят реакцию с 1 мл 0,1% раствора РСО этакридина лактата (0,001 г/мл) и измеряют оптическую плотность.

Содержание этакридина лактата в граммах (Г) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Г = , где

а – объем раствора, взятый для анализа, мл;

Р – объем лекарственной формы, мл;

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО.

Приготовление раствора РСО этакридина лактата. Около 0,1000 г (точная масса навески) этакридина лактата растворяют в 70-80 мл воды очищенной в мерной колбе вместимостью 100 мл при слабом нагревании на водяной бане. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки.

В 1 мл раствора РСО содержится 0,001 г этакридина лактата.

6. Рибофлавина 0,002

Глюкозы 0,2

Раствора цитраля 0,01% 10 мл

Количественное определение рибофлавина и цитраля.

Рибофлавин. К 0,5 мл лекарственной формы прибавляют 9,5 мл воды очищенной и измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны около 445 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – вода.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора, содержащего 2,5 мл 0,004% раствора РСО рибофлавина (0,0001 г) и 7,5 мл воды.

Содержание рибофлавина в граммах (Г) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО;

Приготовление 0,004% раствор РСО рибофлавина. Около 0,0100 г (точная масса навески) рибофлавина растворяют в 150 мл воды очищенной в мерной колбе вместимостью 250 мл при нагревании на водяной бане. После охлаждения объем раствора доводят водой до метки.

В 1 мл раствора РСО содержится 0,00004 г рибофлавина.

Раствор устойчив в течение месяца при хранении в защищенном от света месте.

Цитраль. Перед анализом лекарственную форму взбалтывают. К 1 мл раствора прибавляют точно 9 мл воды очищенной и тщательно перемешивают (раствор А).

К 2 мл раствора А добавляют 3 мл 96% спирта этилового, 2 мл воды очищенной, 1,8 мл 0,01% раствора 2,4-динитрофенилгидразина и оставляют на 30 мин. Затем добавляют 1,2 мл 1 моль/л раствора натра едкого и перемешивают. Через 30 мин. измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны 467 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Раствор сравнения – смесь из 3 мл 96% спирта этилового, 1 мл 0,004% раствора РСО рибофлавина, 3 мл воды очищенной, 1,8 мл реактива и 1,2 мл 1 моль/л раствора натра едкого.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора, приготовленного следующим образом: к 1 мл 0,002% раствора РСО цитраля (0,00002 г) прибавляют 2 мл 96% спирта этилового, 4 мл воды очищенной, 1,8 мл реактива и оставляют на 30 мин. Затем добавляют 1,2 мл 1 моль/л раствора натра едкого и перемешивают. Через 30 мин. измеряют оптическую плотность окрашенного раствора.

Содержание цитраля в граммах (Г) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО;

Приготовление 0,02% раствора РСО цитраля. Около 0,1000 г (точная масса навески) цитраля растворяют в 96% спирте этиловом в мерной колбе вместимостью 100 мл (раствор А).

Разбавляют 0,5 мл раствора А тем же спиртом в мерной колбе вместимостью 25 мл (раствор Б).

В 1 мл раствора Б содержится 0,00002 г цитраля.

Раствор А устойчив в течение 6 месяцев при хранении в плотно закрытых флаконах в защищенном от света месте. Раствор Б устойчив в течение 2 недель при хранении в тех же условиях.

7. Рибофлавина 0,001 г

Кислоты аскорбиновой 0,02 г

Калия йодида 0,2 г

Раствора глюкозы 2% - 10 мл

Количественное определение рибофлавина. К 1 мл лекарственной формы прибавляют точно 9 мл воды очищенной и далее определяют по методике, описанной в прописи 6.

Содержание рибофлавина в граммах (Г) в лекарственной форме вычисляют по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО.

8. Раствор левомицетина 0,015%.

Количественное определение левомицетина. К 1,5 мл раствора А (приготовление раствора см. пропись 6, раздел 1.2.3.5.2.1) прибавляют 1 мл 0,1% раствора натрия нитрита и через 3 мин. объем доводят водой очищенной до 8 мл. Затем добавляют 2 мл 1% раствора β-нафтола, приготовленного на 10% растворе натра едкого и перемешивают.

Через 10 мин. измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны около 364 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм. Раствор сравнения – смесь 1 мл 0,1% раствора натрия нитрита, 7 мл воды очищенной и 2 мл 1% раствора и β-нафтола, приготовленного на 10% растворе натра едкого.

Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствора, содержащего 1,5 мл 0,002% раствора РСО левомицетина (0,00003 г/мл).

Содержание левомицетина в граммах (Г) в лекарственной форме рассчитывают по формуле:

Г = , где

D_x – оптическая плотность раствора испытуемого образца;

D_ст – оптическая плотность раствора РСО.

Приготовление раствора РСО левомицетина. 0,0100 г (точная масса навески) левомицетина растворяют при нагревании в 60-70 мл воды очищенной в мерной колбе вместимостью 100 мл, после охлаждения раствор доводят водой до метки.

10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят водой очищенной до метки.

Раствор РСО левомицетина содержит 0,00002 г левомицетина в 1 мл.